卵孢菌醇

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  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~4.5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

  • 【原创大赛】2014年食源性致病菌蜡样芽孢杆菌风险监测分析

    2014年食源性致病菌蜡样芽孢杆菌风险监测分析 人类对蜡样芽孢杆菌致病性的认识过程进展缓慢,但是大量证据证明,从1898年起,就有蜡样芽孢杆菌造成泌尿系统感染及胃肠炎的记载,有些感染的病例很严重,甚至造成死亡,蜡样芽孢杆菌也可以引起牛的口蹄炎。Lubenau 1906年描述了发生在一家医院的严重的食物中毒事件,300名医务人员及病人用餐后出现急性胃肠炎,对剩余的食物进行检验,发现含有大量的好氧芽孢杆菌,尽管从原文中的描述分析,该污染菌应为蜡样芽孢杆菌,但原作者将其定名为B.peptonificans。Seitz 1913年从一例患肠炎和腹泻的病人中分离出蜡样芽孢杆菌。按照当今的流行病学标准来衡量,有关芽孢杆菌引起食物中毒的早起报道很粗略。很少有人对食物等病检标本的污染菌做过计数,对污染菌的鉴定、命名也不确切,从而造成了不少混乱。正是由于分类学的进展,Hauge经过对4起食物中毒事件的认真调查,于1955年首次确认蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的致病菌。因为蜡样芽孢杆菌在自然界分布广泛,常存在于土壤、空气、水和尘埃中,所以不可避免地会进入到食品中。现将2014年本地蜡样芽孢杆菌的检测情况作如下总结。1 材料与方法1.1试剂和仪器 使用的培养基有磷酸盐缓冲液(PBS)、甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂、胰酪胨大豆多粘菌素肉汤、营养琼脂购买于北京路桥公司。主要仪器包括均质器,电子天平:感量0.1g,VITEK-2 Compact 全自动微生物鉴定系统。1.2依据和方法 根据国家食品安全风险评估中心制定的“食源性致病菌监测工作手册”要求进行增菌、分离、鉴定、菌种保存及送上级实验室复核。试验程序见图2。

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  • 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂检测方法
    甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(简称MYP琼脂),也称蜡状芽孢杆菌选择性琼脂(简称BCS琼脂),是一种高度选择性培养基,用于检测和增菌食品样本中的蜡状芽孢杆菌。成分  蛋白胨            10g  牛肉膏            1g  甘露醇            10g  氯化钠            10g  琼脂             15g  蒸馏水            1000mL  0.2%酚红溶液         13mL  50%卵黄液          50mL  多粘菌素B          100 国际单位/mL  pH7.4制法  将前面五种成分加入于蒸馏水中,加热溶解,校正pH,加入酚红溶液。分装烧瓶,每瓶100mL,121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,每瓶加入50%卵黄液5mL及多粘菌素B10000国际单位,混匀后倾注平板。
  • 氮吹仪在卵磷脂的提取和定性鉴定中的应用
    机体的各组织和细胞均含卵磷脂,其中在脑、神经组织、肝、心脏、肾上腺和精液中含量较为丰富,卵黄中含量最多(约含10%)。卵磷脂易溶于乙醇、乙醚等亲脂溶剂,可利用此类溶剂提取。它不溶于丙酮,利用此性质可与中性脂肪分离。纯卵磷脂中的胆碱基在碱性溶液中分解成三甲胺,三甲胺有特异鱼腥臭味,可鉴别。
  • 卵磷脂的提取和定性鉴定
    机体的各组织和细胞均含卵磷脂,其中在脑、神经组织、肝、心脏、肾上腺和精液中含量较为丰富,卵黄中含量最多(约含10%)。卵磷脂易溶于乙醇、乙醚等亲脂溶剂,可利用此类溶剂提取。它不溶于丙酮,利用此性质可与中性脂肪分离。纯卵磷脂中的胆碱基在碱性溶液中分解成三甲胺,三甲胺有特异鱼腥臭味,可鉴别。

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  • 打破对称!卵母细胞如何脱颖而出?
    在哺乳动物和果蝇中,雌性多细胞雌性生殖细胞包囊(Female germline cyst)中只有一个细胞会成为卵母细胞,但是这颗卵母细胞是如何打破对称性从中脱颖而出的还不得而知。为了揭开这一问题的答案,英国剑桥大学D. St. Johnston研究组与D. Nashchekin(第一作者)合作在Science发文题为Symmetry breaking in the female germline cyst,发现微管负极稳定蛋白Patronin/CAMSAP通过标记果蝇中的卵母细胞,促使生殖细胞打破对称性从而特化形成卵母细胞的具体分子机制。在许多生物中并非所有的雌性生殖细胞都会变成卵母细胞,一部分细胞会变成辅助细胞为卵母细胞提供物料和营养支持【1】。举例来说,小鼠卵巢中一个生殖细胞包囊中包含约30个细胞,其中只有一小部分细胞会变成卵母细胞,大多数的细胞会作为营养细胞(Nurse cells)经历细胞凋亡,将胞质的内容物通过环管(Ring canals)输送卵母细胞(图1)【2, 3】。在果蝇中,生殖细胞包囊形成于生殖腺,包囊具有三个区域。生殖干细胞产生成囊细胞(Cystoblast),成囊细胞在不完全的胞质分裂的情况下分裂四次,产生一个包含16个生殖细胞组成的包囊,这些生殖细胞通过环管相连接(图2)。卵母细胞的选择依赖于非中心体组织中心(noncentrosomal microtubule organizing center,ncMTOC)在未来的卵母细胞中组织一个具有极性微管网络指导动力蛋白(Dynein)依赖的细胞命运决定因子的运输。但是这颗卵母细胞是如何脱颖而出获得命中注定的卵母细胞命运呢?为了揭开这一问题的答案,作者们将目光集中在了Patronin以及其脊椎动物同源蛋白CAMSAPs上。该蛋白是微管负极结合蛋白,是 ncMTOCs非常关键的组分【4,5】。作者们在patronin突变体中检测了卵母细胞标记物的分布,发现突变体中卵母细胞标记物的累积显著地降低。限定表达在区域3中卵母细胞中的联会复合体蛋白C(3)G也在patronin突变体中也显著降低。这些结果说明Patronin对于卵母细胞的决定非常关键。为了对Patronin在生殖腺包囊中的定位进行检测,作者们对内源荧光标记的Patronin-Kate品系进行成像,发现Patronin在2a区域时开始在单独的一个细胞中表达,早于既定卵母细胞标记物的表达,该信号会持续累积在此单个细胞中到区域2b-3,发育到该时期时会在细胞中形成点状信号,最终此细胞发育成为卵母细胞。但是作者们发现patronin的mRNA并不会定位在包囊之中,因此这种不对称的分布依赖于Patronin蛋白而非mRNA的定位或者新蛋白的合成。另外作者们发现动力蛋白在patronin突变体中的定位在推定的卵母细胞中,该结果说明Patronin的缺失会破坏前体卵母细胞中MTOC的形成,从而导致极化的微管网络形成的缺失。通过检测微管正极末端追踪蛋白EB1-GFP对包囊中的MTOC进行可视化观察,作者们发现EB1-GFP信号与Patronin的信号在相同的细胞中共定位。同样,EB1-GFP的不对称定位在patronin突变体的包囊中会消失,此时EB1-GFP的分布模式会相对比较均质。随后,作者们想知道中心体是否对Patronin MTOC的形成是否有一定的贡献,为此对中心体蛋白Asterless与Patronin的共定位进行了探究。作者们发现Patronin与Asterless只有小部分共定位,大部分的Patronin信号都在中心体聚集体的之外,该结果说明Patronin形成的MTOCs是非中心体依赖的。目前,Patronin成为了未来卵母细胞最早的标记物。那么提出了一个新的问题即Patronin是如何富集在卵母细胞中从而打破包囊中细胞的对称性的。其中一个可能的机制是对称性打破依赖于融合体(Fusome)的不对称继承【6】。融合体在区域1的有丝分裂过程中就出现了不对称分布,因此母细胞会比子代细胞继承更多的组分,四环管时期两个细胞中的一个会具有比其他细胞更多融合体。为了验证这一想法,作者们使用融合体标记物Hts检测该观点。Patronin与融合体共定位于早期2a区域,但在包囊向区域3发展时信号会集中在一个细胞之中。因此,该结果说明Patronin的最初定位由融合体决定于早期2a区域,随后被某些机制进一步将此不对称性进行扩大。进一步地,作者们想要探究其中可能的扩大机制。Spectraplakin蛋白Shot引起了作者们的注意,因为该蛋白定位融合体上并且与卵母细胞的特化相关【7】。作者们发现在shot突变体中,Patronin不能在一个细胞中累积并且也不能形成点状信号,而且也不能与融合体相互作用。因此,Shot对于招募Patronin到融合体上是非常关键的,从而能够将融合体不对称信号带给Patronin从而交给细胞命运决定过程进行解码。由此,作者们得到了一个卵母细胞命运决定的工作模型,该模型被称为“四步走”模型(图3),第一步,在包囊形成过程中融合体的不对称性促使一个细胞中继承更多的融合体内容物;第二步,在区域2a,Patronin通过Shot蛋白被招募到融合体上,形成一个微微极化的微管网络结构;第三步,包囊中其他细胞通过动力蛋白将Patronin蛋白结合的微管蛋白运输到预卵母细胞之中;第四步,形成一个正反馈循环通路,动力蛋白运输更多的Patronin以及微管蛋白到卵母细胞中,进一步扩大微管的极性,从而促进动力蛋白运输更多的卵母细胞命运决定因子进入该细胞之中。通过该不对称性建立并逐渐扩展的方式,卵母细胞从包囊中“脱颖而出”。Patronin是CAMSAP家族中保守的成员,这说明该机制可能具有一定的保守性,虽然在哺乳动物中未发现融合体的存在,但是微管依赖的细胞器通过细胞环管运输已被证明在小鼠卵母细胞分化中发挥重要作用。这一发现对于卵母细胞命运建立提供了新的思考。原文链接:http://doi.org/10.1126/science.abj3125
  • 乔杰院士团队发表人体外成熟卵母细胞单细胞测序最新成果
    p   卵母细胞体外成熟是辅助生殖领域已开展近30年的一项重要技术,在预防卵巢过度刺激综合征,保存女性生育力,拓展辅助生殖技术应用领域等展现出巨大的应用价值。 /p p /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/200e2031-e412-4cd0-a657-9cb63171a9a6.jpg" title=" NewsDataAction.png" / /p p   在啮齿类及家畜等动物中,卵母细胞经过体外成熟后,依然可以保持较高的发育潜能,但是人类辅助生殖临床中发现,体外成熟卵母细胞发育潜能较差,形成胚胎的流产率相对较高,且尚无公认的有效改善措施。此前有多项研究揭示小鼠卵母细胞成熟过程中的关键分子,然而对人类卵母细胞成熟过程中的分子表达特征尚不明确。 /p p   2月27日,北京大学第三医院乔杰院士团队的李蓉教授、于洋副研究员与广州医科大学附属第三医院范勇教授,昆明理工大学谭韬副教授团队合作,在Antioxidants & amp Redox Signaling杂志在线发表题为“Single-cell transcriptomics of human oocytes: environment-driven metabolic competition and compensatory mechanisms during oocyte maturation”的研究成果,揭示了体外培养影响人卵母细胞成熟及发育潜能的关键分子及其作用机制。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/2df4c471-0a8d-4c97-a46b-adbe430a85dd.jpg" title=" NewsDataAction-2.png" / /p p /p p   在该研究中,研究者在伦理委员会指导下,通过来自于3名女性捐赠的6枚卵母细胞(每名女性捐赠1枚成熟与1枚不成熟卵母细胞),利用单细胞转录组测序技术,从整体水平上,对体外成熟卵母细胞中的RNA表达特征进行了阐述,并利用小鼠模型、干细胞模型、人类样本等,从基因、亚细胞结构、细胞发育等不同层面,系统揭示了代谢通路关键分子ACAT/HADHA-DPYD在维持卵母细胞发育潜能方面扮演重要的角色。 /p p   首先,研究者利用高通量测序与生物信息学分析手段,明确代谢通路的改变是体外成熟卵母细胞与体内成熟卵母细胞的最典型差异。进而,通过多种筛选手段,包括与不同质量的体内成熟卵母细胞比较、物种间比较等,明确三种与辅酶A相关的酶编码基因(ACAT1、HADHA、DPYD)是潜在影响体外成熟卵母细胞发育潜能的靶标分子(下图)。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/4ca2142c-ebee-4bd7-a0cd-9cd6e94c59c1.jpg" title=" NewsDataAction-3.png" / /p p /p p style=" text-align: center " 筛选与人体外成熟卵母细胞发育潜能相关的靶标分子 /p p   其中,ACAT1和HADHA协同调控三羧酸循环的底物乙酰辅酶A与琥珀酸的生成,间接影响三羧酸循环的效率,导致线粒体功能不足。同时发现,三羧酸循环酶类的激活剂钙离子在体外成熟卵母细胞中浓度降低,再次提供证据表明体外成熟卵母细胞线粒体功能及能量代谢异常。 /p p   然而,为维持发育的进行,卵母细胞在钙离子摄入障碍的情况下,内源钙离子释放,实现钙离子浓度代偿。同时,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸转氢酶(NNT)编码基因上千倍上调表达,促进体内NADH与NADP+的生成。一方面NADH可以提供额外的能量供卵母细胞成熟发育,缓解线粒体功能失调导致的NADH生成减弱,维持其细胞质的生物学功能;另外一方面,NADP+的生成上调DPYD表达,对体外成熟卵母细胞中出现的异常DNA双链断裂进行修复,维持其细胞核的生物学功能。 /p p   综上所述,研究者首次利用严格的对照,排除不同人群遗传的潜在影响,从组学筛选到靶标分子的生物学功能鉴定的系列实验中,明确人体外成熟卵母细胞从受损到功能代偿的分子机制。研究在提示辅助生殖技术每一步操作都潜在对生殖细胞产生影响的同时,也为辅助生殖技术的持续优化提供了理论基础。 /p p   据悉,北京大学第三医院2011级博士生赵红翠为本文的第一作者,2017级博士生李天杰,赵越副研究员,昆明理工大学谭韬副教授为本文共同第一作者,北京大学第三医院李蓉教授为该论文的通讯作者,于洋副研究员,广州医科大学附属第三医院的范勇教授为共同通讯作者。 /p
  • 单细胞ICP-MS应用:评估卵巢癌细胞对顺铂的摄入
    铂类化疗药物是非常著名的一类化疗药物。目前铂类化疗药物已经研制了三代,分别是一代顺铂,二代卡铂、奈达铂;三代奥沙利铂、洛铂。卡铂的有效性是由于其可以与DNA 结合从而导致DNA- 铂(Pt)加合物的形成,但这也会造成DNA 的弯曲。因此在化疗后细胞必须修复DNA 损伤,否则DNA 复制受阻会导致细胞死亡。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感,但一段时间后,患者通常对顺铂治疗表现出耐药性,导致了癌症的复发。顺铂耐药性归因于三种主要的分子机制:DNA 修复的加速,胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中,细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低或者顺铂转运的加速。分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。传统方法是,将细胞群置于顺铂培养液中,然后使用原子吸收光谱(AAS)或者电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)等技术测定细胞群内铂的总量,无法体现顺铂摄入在个体细胞之间的分布和差异。实际上,细胞对顺铂的摄入最有可能根据个体有很大差异,但至今还没有有效的方法来评估。本文使用全新的技术,可对金属在单一细胞水平上进行定量:单细胞电感耦合等离子体质谱 (SC-ICP-MS)。01样品所有实验使用卵巢癌细胞为A2780 和A2780/CP70 细胞系。其中,A2780 是顺铂敏感细胞系, 而A2780/CP70 是顺铂耐药型。按照下图所示流程处理。02仪器NexION® 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS),结合Syngistix™ 单细胞应用软件模块进行数据采集和处理。 NexION 2000 ICP-MS表1.ICP-MS仪器条件03实验结果细胞对顺铂的摄入可利用时间过程实验来研究,即分析顺铂在细胞群内的分布如何随时间变化。将两个细胞系置于30μM顺铂培养液中1,2,4 和8 小时。如图可见,与顺铂耐药细胞A2780/CP70 相比,A2780 随时间推移能摄入更多的顺铂。为了判断顺铂摄入的差异性分布是否归因于细胞周期的不同,还对细胞进行了血清饥饿实验。04结论SC-ICP-MS 是一种在单细胞水平上稳定测量铂的方法。本文利用卵巢癌细胞系A2780 和A2780/CP70 表征了随着时间增加顺铂的摄入有所增长。相比A2780 敏感细胞系,顺铂摄入在耐药性的A2780/CP70 细胞系上水平降低。顺铂摄入的细胞差异性不是由于细胞周期的不同,因为血清饥饿细胞并不改变顺铂的整体摄入。顺铂摄入的胞内差异性是由于其他尚未确定的因素造成的。想要了解更多详情,请扫描二维码下载完整的应用报告。

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  • 活体取卵培养基 400-860-5168转4446
    活体取卵培养基Minitube BoviPlus坚固耐用的外型和简单的操作模式,手动款无需连接任何其他设备就可操作,可快速显示测量数据结果,不需要等,一键校准模式,可以在短时间内完成校准任务,简便的操作模式和稳定式的性能更简单,自动操作,节省不少的时间和精力,采用的是计算全自动控制模式,可以在计算机上完成整个操作,内置自动储存器可储存3500条测量信息,应用领域比较广泛,无需连接其他外接设备。产品优势:1、工作液可以根据需要单配制;2、工作液能保存保存6个月;3、可在采卵过程中防止血液凝结;4、无需外接其他设备就能够操作;5、开机无需提前预热,直接可以使用;6、测量方式是一键自动测量方式。基础参数:1、工作温度:0-50℃;2、主机重量: 6kg;3、电源:AC110~240V,50Hz;4、尺寸:450*450*200mm;5、测量速度:2秒可测量一次;6、储存测量数据:1800条。活体取卵培养基Minitube BoviPlus不锈钢一体成型,巩固了设备的耐用性和结实性,在设计上是比较合理应用的,硬件设施比较完善,采用层流空气流动和无菌过滤法制备的纯水所配制,培养基是经过标准程序生产的。该标准程序被同行刊物中认定为适合胚胎体外生产,无需外接其他设备就能够操作,其性能比较稳定可靠,多重分析模式,可以手动也可以自动,只需要几秒钟就可以计算出来非常的简单快捷,整机的重量为5公斤,可以满足外出工作需求。
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  • 数码气压显微注射泵:DMP-200Digital Pneumatic Microinjection Pump一、DMP-200简介微科精密MPI公司的数码气压显微注射泵DMP-200是可以进行毫秒脉冲微量注射的数显皮升气压显微注射泵,它通过数字化程序控制,可以向显微注射针管产生稳定的高分辨率脉冲压力气体,从而可以对微小细胞、昆虫卵、鱼类卵细胞、成虫等样品进行微量液体注射操作。本型号注射泵的注射压力以及注射时间通过数字屏显示,不仅操作更加直观,并且可以实现更高的精确度。DMP-200数码气压显微注射泵除了常规所需的点动注射模式、手动控制注射模式、时间控制模式外,还可以实现间隔时间循环注射功能,相比于其他类型显微注射仪,本注射泵系统增加了更多的应用可能。DMP-200提供两种方法来启动注射脉冲压力,用触发器或门控模式: 2 前面板按钮2 可选的脚踏开关DMP-200提供四种数字化程控时间设定范围以及时间精度: ☆ 0.01s-9.99s,时间精度为0.01s ☆ 0.1s-99.9s,时间精度为0.1s ☆ 1s-999s,时间精度为1s ☆ 1min-999min,时间精度为1min DMP-200提供0-800KPa程控可调注射压力,注射压力精确度为1KPa.DMP-200提供注射次数计数功能,可以从0-9999自动计数注射次数,亦可中途计数归零。 脉冲压力输出时间由数码电路程控设定,持续性的输出压力气体允许通过高精度电磁阀旋钮对流量大小进行调节并通过数码显示屏实时显示,可通过调节压力大小和压力脉冲时间以清除显微注射针中可能的阻塞。数码气压显微注射泵DMP-200允许的上限输入压力为800KPa,其输出压力可从0到800KPa调节(上限输出压力大小与设备接入的压力源压力上限有关)。设备内部安装有气体过滤器,增加了设备的可靠性,也易于维护。DMP-200因其使用数码电路进行高精度的注射时间和注射压力控制,同时时间和压力等参数通过数码显示屏直观实时显示,增加了实际使用过程中实验条件参数获取的稳定性和可信度。同时,因其时间和压力的分辨率高,可以实现更加准确的皮升级别液体的稳定脉冲注射操作,或者通过时间控制进行液体稳定长时程的输出。相对于传统的压力表和时间刻度表类型显微注射泵来说,DMP-200可以实现更加准的显微注射操作。空间占位不大的DMP-200机箱允许多个控制器堆叠,紧凑的尺寸和稳固的硬件,稳定的微量压力液体输出,使DMP-200可满足多数实验室对皮升压力液体显微注射或微量液体灌注的科研应用需求。数码气压显微注射泵通过使用调节的气压来固定细胞并注射液体,是哺乳动物、线虫、斑马鱼、昆虫等幼体显微注射及斑马鱼、昆虫、哺乳动物等卵细胞基因编辑实验中可选的注射系统。具有使用方便,注射程序简单,重复性良好的特点,注射的体积范围从pL到nL不等。二、产品特点以空气压缩机或气瓶(空气、氮气等惰性气体)作为压力气体供应源,通过设备控制输出管路中的压力气体量,从而实现输出管路前部玻璃注射针中微量液体的显微输出操作,可以输出pL-uL(皮升-微升之间)范围内确定量的脉冲液体显微注射或微负压操作。可以设置和显示的参数,如气体压力、压力输出持续时间以及计数等。DMP-200数码显微注射泵包括压力种类:注射压力,清除压力。可以选配脚踏开关,其功能与设备控制面板上的启动、关闭功能一致。① 注射压力通过数字显示屏实时显示② 注射压力的分辨率为1KPa③ 注射压力可达800KPa④ 压力脉冲时间由时间电路程控设定,精度可达0.01S⑤ 启动:前面板开始按钮、脚踏开关均可启动⑥ 注射时间模式:脉冲数字定时控制、点动注射控制、手动控制时间以及循环程控注射⑦ 提供压力:注射压力、清除压力⑧ 气源输入端口提供一个气体稳压模块⑨ 面板提供注射次数计数功能:0-9999 主要用途¨ 斑马鱼及其他鱼类研究的应用斑马鱼卵细胞的基因物质、药物及染料注射斑马鱼幼鱼的药物、染料的微量注射¨ 啮齿类小动物如大鼠和小鼠等卵细胞基因物质、药物及染料注射¨ 昆虫研究的应用卵细胞注射和幼体及成虫体内核酸物质、药物或染料注射¨ 爪蟾卵细胞基因物质及染料注射嗅觉或味觉感应神经元的PUFF给药;用于果蝇、飞蛾、大鼠、小鼠等动物的嗅觉、味觉或神经递质的PUFF给药¨ 线虫、蠕虫等卵细胞及幼体体内注射核酸物质、药物或染料¨ 动物颅内核团慢病毒、染料的注射,动物组织微量给药¨ 微流控液体流路系统中皮升液滴灌注等五、基本参数输入压力0-800 KPa输出压力0-800KPa(上限值取决于输入压力)输出压力精度1KPa输出压力脉冲时间四个用户可选范围选项: 0.01s-9.99s,时间精度为0.01s 0.1s-99.9s,时间精度为0.1s 1s-999s,时间精度为1s 1min-999min,时间精度为1min 清除压力0-800 KPa自动数码注射计数功能0-9999自动计数,可一键归零压力显示方式数码显示屏实时显示压力脉冲时间显示方式程控设定并通过数码显示屏显示气源输入端口带有可调的气体稳压模块,可设定输入稳定的压力气体操作模式点动注射模式,手动控时模式,数字程控脉冲时间模式,循环注射模式等 控制方式面板按钮开关或脚踏开关气体输入接头6mm 软管接头气体输出接头2mm 软管接头推荐的气体氮气或清洁干燥压缩空气(内置输入气体过滤器)电源220 VAC, 50 / 60 Hz, 0.5 A (直流电源: 24 VDC, 1.5 A, 45W)尺寸350 x 300 x 110 mm重量2.3KG
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  • 活体取卵仪 400-860-5168转4446
    活体取卵仪德国米尼图Minitube采用的是坚硬的不锈钢外壳,技术成熟稳定,安全到位,易操作,轻盈小巧的设计,简便的操作方式,不锈钢外壳,坚固耐用的机体,测定速度快,不需要预热,就能够随时操作,内置存储器,可储存3000条测量记录,测定速度要比普通同款设备快,而且无需等待就能出结果,自动形式的操作模式,可为企业节约时间和精力,采用低噪音传动机构,更清晰、更平稳,更稳定,测量时间短,而且中途间隔时间也短。技术参数:1、显示:数显LCD;2、检测精度: +/-0.25%;3、尺寸:290×295×285mm;4、电源:220V/60HZ;5、变形量:(1-70)mm;6、测量误差:<5%;7、精度: 1%。产品特点:1、设备设计小巧玲珑,可以方便外出携带;2、坚固的外壳设计,整机纯不锈钢机体;3、检测速度快,不需要等待就能出结果;4、设备功能性比较完善,安全性也较为到位;5、校准模式比较简单,一键校准节省时间;6、采用6通道,6个工作区域同时进行分析。活体取卵仪德国米尼图Minitube测定时间短,性能稳定可靠,设备属于简单、平稳、易懂的操作模式,测试方法其实非常的简单,只需要几步就能完成整个流程,采用的是防震包装箱,不怕碰撞,仪器配备了自动停机功能,实现全自动完成测试,坚固的外型设计,轻松的操作方式和易懂形式的测试值,可与电脑和打印机进行连接储存数据,采用的是LCD液晶显示模板,无需提前预热,开机就可以使用,敦实的设计理念,稳固的稳妥的底盘。
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