结合珠蛋白

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  • 【分享】C-反应蛋白(CRP)应用进展综述

    1、C反应蛋白概述 1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现一种物质,能在钙离子存在时与肺炎球菌C-多糖起沉淀反应,随后证实这种能与C-多糖反应的物质是一种蛋白质,因而将这种蛋白质命名为C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)。 CRP是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相蛋白(注:急性时相反应包括感染、炎症及创伤时某些血清蛋白浓度的变化,这些蛋白除CRP外,还包括血清淀粉样蛋白A、纤维蛋白原、触珠蛋白、α1酸性糖蛋白、铜蓝蛋白、α1抗胰蛋白酶等。其中CRP在健康人血清中浓度<5mg/L,而在细菌感染或组织损伤时,浓度可升高上千倍,循环中的CRP半衰期为19小时,故被认为其最有价值),由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体,这一特征性结构使其归类于五聚素(一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白)家族。CRP是机体非特异性免疫机制的一部分,它结合C-多糖,在Ca2+存在时可结合细胞膜上磷酸胆碱,可激活补体的经典途径,增强白细胞的吞噬作用,调节淋巴细胞或单核/巨噬系统功能,促进巨噬细胞组织因子的生成,在动脉粥样硬化斑块中也可检测到CRP。 人CRP主要生物学功能: 通过与配体(凋亡与坏死的细胞,或入侵的细菌、真菌、寄生虫等的磷酰胆碱)结合,激活补体和单核吞噬细胞系统,将载有配体的病理物质或病原体清除。 (1)识别外来物质,激活补体系统; (2)增强条理作用,增强吞噬细胞吞噬作用; (3)与血小板激活因子(RAF)结合,降低炎症反应; (4)与染色体结合,消除坏死组织里的细胞DNA。

  • 55.2 厄贝沙坦血浆蛋白结合率测定

    作者:李寅;陈凤仪;张国添;杨辉;黄玉玲;谢清春;钟鸣; (广州市番禺区中心医院;广东药学院药物研究所;广州汉方现代中药研究开发有限公司;)摘要:目的:测定厄贝沙坦在人血浆中的蛋白结合率。方法:采用HPLC法测定厄贝沙坦的浓度。采用平衡透析法测定厄贝沙坦的人血浆蛋白结合率。结果:以Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(磷酸调pH至2.6)(45∶55)为流动相,检测波长为245 nm,血浆样品中其他成分不干扰厄贝沙坦的测定,厄贝沙坦的线性范围为0.10~10.40μg/ml,定量下限为0.10μg/ml。厄贝沙坦的低、中、高浓度的蛋白结合率分别为93.0%、91.5%、92.3%。结论:厄贝沙坦具有较强的蛋白结合率。谱图:无

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  • 应用上新丨基于MALDI-TOF MS的血红蛋白病表型筛查系统
    简介血红蛋白病(Hemoglobinopathy)是由于血红蛋白分子结构或表达异常所引起的遗传性血液病,包括异常血红蛋白病和地中海贫血。常造成患者血红蛋白携氧功能异常和红细胞破坏,引起溶血性贫血、组织缺氧等。该类疾病分布广泛,全球有超过1亿人携带血红蛋白病的致病基因 [1]。在我国,该病流行于重庆、广西、广东、海南等省份,给社会和家庭造成严重的经济负担,已成为重要的公共卫生问题 [2]。 目前,通过新生儿筛查、产前筛查及遗传咨询,早期发现和及时预防是对该病进行防控的主要措施。然而,血红蛋白病仍缺乏系统、高效的筛查手段 [3]。目前,临床上通过结合血常规、 电泳和基因检测进行血红蛋白病的诊断。血常规的特异性不足,不能直接用于疾病的分型。血红蛋白电泳的分辨率低、流程复杂、成本高等因素,限制了其规模化应用 [4]。基因检测可用于血红蛋白病的分型和确诊,但作为筛查手段,还存在价格高、操作复杂、数据分析难度大等问题 [5]。因此,迫切需要系统高效且简便经济的血红蛋白病筛查技术。以常见的血红蛋白病地中海贫血为例,比较几种检测方法: 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)将软电离技术和飞行时间质量分析结合,尤其适用于生物大分子(蛋白、多肽和脂质等)的分析检测。本应用介绍了基于 MALDI-TOF MS(QuanTOF)技术,进行血红蛋白组分分析,进而建立血红蛋白病的表型筛查系统。血红蛋白分子在激光照射和基质的辅助下,四聚体解聚成珠蛋白链单体并带电,离子化的珠蛋白链因分子量差异导致飞行时间不同而被分离检测。区别于其他血红蛋白检测技术,MALDI检测的是珠蛋白链分子。通过QuanHGB血红蛋白软件分析珠蛋白链的分子量和相对含量,实现血红蛋白病的筛查。 15种异常血红蛋白的检测结果比对分析流程样本收集:全血样本 2uL全自动前处理:自动进行样本稀释、混匀、点样等操作质谱检测:加载靶板后,自动完成检测,~30s/ 样本结果输出:QuanHGB血红蛋白软件完成结果判读,标示异常样本结论MALDI-TOF质谱技术通过对血红蛋白组分的定性和定量分析,实现血红蛋白病(地中海贫血、异常血红蛋白病)的筛查,具有检测效率高、成本低、样本用量少、灵敏度高等特点,适用于血红蛋白病的大规模人群筛查。结果基于MALDI-TOF MS的血红蛋白病表型筛查系统,可实现对 β- 地中海贫血(图 1)和近100种异常血红蛋白的检测(图 2, 3) 图1. β-地中海贫血的判读结果 图2. 异常血红蛋白(α-珠蛋白变异)的判读结果 图3. 异常血红蛋白(β-珠蛋白变异)的判读结果参考文献[1] Modell B, Darlison M. Global epidemiology of haemoglobin disorders and derived service indicators[J]. Bulletin of the World Health Organization, 2008, 86(6):480-487.[2] 王燕燕, 李晓辉,徐酉华. 地中海贫血诊治进展与我国现状[J]. 中国实用儿科杂志, 2013, 28(6): 473-476.[3] Risoluti R, Materazzi S, Sorrentino F, et al. Update on thalassemia diagnosis: new insights and methods[J]. Talanta, 2018, 183:216- 222.[4] Srivorakun H, Fucharoen G, Changtrakul Y, et al. Thalassemia and hemoglobinopathies in Southeast Asian newborns: diagnostic assessment using capillary electrophoresis system[J]. Clinical Biochemistry, 2011, 44(5-6):406-411.[5] Shang X, Peng Z, Ye Y, et al. Rapid Targeted Next-Generation Sequencing Platform for Molecular Screening and Clinical Genotyping in Subjects with Hemoglobinopathies[J]. EBioMedicine, 2017, 23:150-159.
  • MALDI-TOF MS又一次发现新型血红蛋白变体
    近日,融智生物合作单位北京大学深圳医院检验科纪玲主任团队使用QuanTOF新一代宽谱定量飞行时间质谱平台(MALDI-TOF MS),第三次发现了新型血红蛋白变体——Hb南昌,文章目前已经发表在Hemoglobin期刊上(https://doi.org/10.1080/03630269.2021.1956946)。血红蛋白(Hb)变体是最常见的遗传性单基因红细胞疾病,其特征是一条或多条珠蛋白链的结构异常。包括地中海贫血和Hb变体在内,目前已经被报道的血红蛋白病有1800多种。阳离子交换高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)是定量检测各种Hb变体的一线筛查方法。基质辅助激光解吸电离(MALDI)技术的发展使得使用质谱(MS)检测完整的珠蛋白链成为可能,并且MALDI-TOF MS可以通过质量差异来区分变异珠蛋白链与正常珠蛋白链。一名33岁来自江西省南昌市的女性来院进行年度体检。她的空腹血糖浓度为5.0 mmol/L,HbA1c最初通过毛细管电泳法得到的结果为5.4%(36 mmol/mol,参考区间4.0–6.0%),电泳图无异常。当时,研究团队正在评估MALDI-TOF MS系统(QuanTOF,融智生物)检测HbA1c的性能,先证者的全血作为评估样本之一。在样品的质谱图中发现了一种变异的珠蛋白链(15156 Da)出现在正常α链的右侧,与正常α链的质量差为30Da[图1(B)]。QuanTOF通过传统的β链糖基化得到的HbA1c值为5.1%(31.0 mmol/mol),通过α链糖基化得到的HbA1c值为6.8%(51 mmol/mol)。图1. 对照组和Hb南昌的MALDI-TOF质谱图。(A)对照品的质谱图显示α链(15126 Da)和β链(15868 Da),以及相应的糖基化α链(15289 Da)和糖基化β链(16031 Da)。(B)箭头表示变异α链峰值(15156 Da)。研究团队又通过毛细管电泳和阳离子交换高效液相色谱法分析Hb[图2], 未发现Hb变异的证据,以及正常的HbA2和Hb F。图2. 血红蛋白分析。(A)毛细管电泳,CE。(B) 阳离子交换高效液相色谱,HPLC。Sanger测序显示HBA2基因的核苷酸131(正向引物)或核苷酸367(反向引物)发生杂合突变(HBA2:c.46Ga)[图3],导致甘氨酸(分子量:75 Da)在密码子15处替换为丝氨酸(分子量:105 Da),证实了QuanTOF的检测结果。据了解,这种突变尚未被报道,所以研究团队以先证者的出生地命名它为Hb南昌。图3. Sanger测序。(A) 正向引物. (B) 反向引物. 箭头表示杂合突变Hb南昌(HBA2:c.46GA)。许多Hb变体以前是通过测量Hb A1c发现的。理论上,容易检测到的变体是电荷差替换,那些无法检测的变体会导致Hb A峰和变异峰重叠,干扰检测结果。MALDI-TOF MS是一种非常有潜力的血红蛋白定量检测方法,它能通过野生珠蛋白链和变异珠蛋白链之间足够的质量差异轻松地检测到色谱或电泳沉默的Hb变体;并且允许通过α或β链糖基化来检测Hb A1c,以克服Hb变体对Hb A1c定量的干扰(在本研究案例中,QuanTOF给出了基于α链糖基化的虚假升高的Hb A1c值,和基于β链糖基化的准确Hb A1c值,这一点也证实了先前的发现)。参考文献:A Novel α-Globin Chain Variant, Hb Nanchang [HBA2: c.46GA, Codon 15 (GGTAGT) (Gly→Ser)], Detected by Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,https://doi.org/10.1080/03630269.2021.1956946。
  • 北大王初课题组发展顺铂结合蛋白的组学鉴定方法
    近日,北京大学化学与分子工程学院、北大-清华生命联合中心、北京大学合成与功能生物分子中心王初课题组在RSC Chemical Biology杂志上发表了题为“ Discovery of Cisplatin-binding Proteins by Competitive Cysteinome Profiling”的研究文章。在这项工作中,作者应用基于竞争的定量化学蛋白质组学策略rdTOP-ABPP,在MCF-7活细胞体系中全局性地鉴定了顺铂(cisplatin)结合蛋白与其结合顺铂的位点,发现并证明了顺铂可以结合谷氧还蛋白1(GLRX1)与具有硫氧还蛋白结构域的蛋白17(TXNDC17)的活性位点。除此之外也发现了一个全新的顺铂结合蛋白甲硫氨酸氨肽酶1(MetAP1),并发现其对顺铂的细胞毒性有一定的保护作用。顺铂是1965年被发现的化疗药物,其在如睾丸癌,卵巢癌等癌症的治疗过程中被广泛应用。其在进入细胞后生成的活性的二价铂离子会进攻DNA上的腺嘌呤或鸟嘌呤,从而引起DNA损伤,最终杀死癌细胞,这个过程被认为是顺铂细胞毒性的主要原因。而近年来很多研究也发现活性二价铂离子除了结合DNA之外,其也会与细胞质中大量亲核性物质反应,比如GSH,RNA以及金属硫蛋白等进行结合,据统计,仅有1%左右的铂是结合到DNA上。大量游离的活性二价铂离子会与细胞中多种有功能的蛋白质结合,从而影响其正常的功能,因此对顺铂结合蛋白的研究有助于我们更完整的理解顺铂细胞毒性的机理以及帮助我们避免顺铂耐药性。目前已经有很多组学上鉴定顺铂结合蛋白的方法,例如利用Pt的特征同位素分布的特点,在一级质谱层面筛选那些潜在的顺铂结合蛋白 或者将ICP-MS与二维凝胶电泳结合,从而在组学层面鉴定潜在的顺铂结合蛋白等,但这些方法受限于较低的灵敏度和通量。对顺铂进行生物正交基团改造,从而通过生物素-亲和素富集来鉴定顺铂结合蛋白的方法也被开发,并成功在酵母细胞中鉴定到数百种潜在的顺铂结合蛋白。但由于顺铂的分子较小,并且其作为无机药物,在其上进行官能团化修饰可能会一定程度上改变顺铂本身的性质,并影响最终的鉴定结果。鉴于活性二价铂离子易与半胱氨酸残基反应并结合,因此作者考虑使用基于竞争的定量化学蛋白质组学策略rdTOP-ABPP来鉴定顺铂结合蛋白。首先作者在活细胞水平上证明了顺铂可以与半胱氨酸特异性反应的探针IAyne竞争结合蛋白质的半胱氨酸残基。在优化了质谱条件后,作者在三次重复的质谱实验中共鉴定并定量到1947个肽段,对其进行条件筛选,定义顺铂处理后肽段的色谱强度与对照组中相同肽段色谱强度比值为Ratio,作者认为三次重复的Ratio平均值与对应的p value满足-log10(p value) x log2(ratio) 1.5的是潜在的顺铂结合位点,共筛选到125个肽段归属于107种蛋白。这些蛋白显著富集于核质交换通路以及氧化还原相关通路,这与之前报道的顺铂会引起DNA损伤以及顺铂会引发细胞产生氧化应激相对应。  随后作者在筛选的107种蛋白中,选择了归属于氧化应激通路的已知的与顺铂有关的靶点蛋白GLRX1以及TXNDC17进行验证,纯蛋白层面的竞争标记与ICP-MS结果均表明这两种蛋白为顺铂结合蛋白,并且其顺铂结合位点均是质谱鉴定到的位点,且均是两个蛋白的活性中心位点,暗示了顺铂结合可能会影响两种氧化还原相关的酶的活性,进而引起氧化应激。纯蛋白质谱实验中,二级谱也表明两个蛋白与顺铂的结合均是桥连结合,这与文献中报道过的其中一种顺铂与蛋白结合的模式是相对应的。  之后作者选择了另一种尚未明确是否与顺铂有相互作用的蛋白MetAP1进行了后续的生化验证。纯蛋白层面的竞争标记实验与ICP-MS的实验结果证明MetAP1是顺铂结合蛋白,且其顺铂结合位点为我们鉴定到的C14位。随后我们测量了顺铂对MetAP1活性的影响,发现顺铂不会明显影响MetAP1纯蛋白的活性,但可以抑制MetAP1在体内的活性,表明顺铂会在活细胞中影响新生成蛋白的N端甲硫氨酸切割,最后通过比较MetAP1的敲除细胞系和野生型的细胞系对顺铂的MTT曲线,作者发现MetAP1在顺铂引起的细胞毒性中起到了一定程度的保护作用。  总之,作者应用竞争性ABPP策略,在MCF-7活细胞中鉴定到了107种潜在的顺铂结合蛋白,并对其中的三个靶标进行了验证。作者发现顺铂可以结合与氧化还原相关的酶GLRX1与TXNDC17的关键酶活中心,暗示了顺铂结合可能会影响两种氧化还原相关的酶的活性,进而可能影响细胞的ROS水平。也证明了顺铂通过结合来影响MetAP1的活性从而影响新生成蛋白的N端甲硫氨酸的加工,并表明MetAP1可以作为提高顺铂细胞毒性以避免肿瘤耐药性的潜在靶点。本文的通讯作者为北京大学化学与分子工程学院、北大-清华生命联合中心、北京大学合成与功能生物分子中心的王初教授。其指导的化学与分子工程学院2019级博士研究生王相贺为本文的第一作者。该工作得到了国家自然科学基金委、国家重点研发计划的经费支持。  本文作者:WXH  责任编辑:JGG  原文链接:https://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2023/cb/d3cb00042g  文章引用:DOI: 10.1039/D3CB00042G

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  • 岛津集团发布新型PPSQ-51A单反应器蛋白测序仪和PPSQ-53A三重反应蛋白测序仪。 新PPSQ-51A / 53A蛋白质测序仪采用岛津SPD-M30A光电二极管阵列检测器,配有新型毛细管流通池,灵敏度是原型号标准检测池的10倍,能进行较长序列的蛋白质研究。 主要特点:1、在等度洗脱模式下进行PTH-氨基酸的分析,等度序列分析提供更稳定的保留时间。这意味着可以使用色谱减法取消在以前的周期中检测到的峰,方便用户识别正确的氨基酸。在等度洗脱模式下进行PTH-氨基酸分析也使实验室通过流动相回收减少废液的浪费,降低运行成本。2、操作简单,专业的蛋白质测序仪将对反应单元和高效液相色谱分析单元提供控制功能,便于进行序列分析。3、新PPSQ软件可配置为满足实验室的各种需要,无论是监管、研究和开发,还是学术。该软件符合FDA 21 CFR Part 11指南对安全、用户管理和审计跟踪的要求。易于使用的数据分析功能,简化操作,数据处理和报告。这些功能允许色谱的后处理、多重色谱的叠加、色谱减法、和氨基酸序列的自动估计。此外,PPSQ-51A / 53A音序器提供定制的报告,并对数据进行快速、全面的的图形显示。拥有以前机型的客户(31A/33A/51B/53B)可以升级现有系统为相同灵敏度,并能拥有和PPSQ-51A / 53A一样的软件。升级包在有高层次的灵活性以及数据库的标准版和客户端服务器版本中都可以使FDA 21 CFR Part 11合规。
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  • Opentrons磁珠蛋白纯化工作站产品介绍:Opentrons OT-2 磁珠蛋白质纯化工作站基于磁珠提取原理,可以自动化完成小规模蛋白质纯化和蛋白质组学样 品处理。磁珠蛋白质纯化工作站可以支持多种工作流程。产品特点:产出稳定:实验产出具有良好的一致性和稳定性96个样本:单次可同时处理多达96个样品高效运行:处理8个样品仅需1小时左右灵活兼容:可与市面上大多数试剂和磁珠兼容核心参数:移液平台工作板位11块板位+1个垃圾槽最大运行样品数量96个样品移液器移液器类型单通道/8通道固定间距移液器移液器范围1~1000ul移液器CV值1ul≤±5%300ul≤±0.3%移液器%D1ul≤±15%300ul≤±0.6%技术原理空气置换原理温控模块温度范围4~95℃温度准确度±1℃ at 65℃温度均匀度±1℃ at 65℃热循环模块温度范围模块底座温度范围:4~99℃模块上盖温度范围:37~110℃底座最大加热速率室温至95℃之间为4.25℃/s底座最大冷却速率95 ℃至室温之间为2.0℃/s可容纳全裙边96孔、0.2 mLPCR板磁珠纯化模块采用高强度升降式N52钕磁铁兼容22 mm至44 mm的标准和深孔实验室器具、各种磁珠产品HEPA模块过滤效率对于0.3um以上的颗粒的效率为99.99%工作环境工作温度20℃~24℃相对湿度40~60%RH电源要求单平台100-240VAC、50/60Hz、最大功率约1150W机器尺寸630*570*660mm(W*D*H)机器重量总重量约为86 kg产品配件/附件:机器设备和移液器:OT-2自动化移液平台、单通道移液器(P300)、8通道移液器(P300)功能模块:热振荡仪(搭配深孔板适配器和 PCR 适配器)、磁珠纯化模块耗材:四合一试管架套装、NEST 12 孔储液槽(50个)、NEST 单孔储液槽(50个)、0.2 mL96 孔PCR 板(25个) 、NEST 2 mL深孔板(50个)、NEST 15 mL 离心管(500个)关于公司:美国Opentrons Labworks是一家生命科学集团,旗下包含Robotic机器人、PRL诊断实验室、NEO细胞工程和AI人工智能四大事业部。合创生物工程(深圳)有限公司是Opentrons集团于2017年7月成立的全资子公司,隶属于机器人事业部,集实验室自动化仪器和耗材研发、生产、销售于一体,主要产品包括自动化移液机器人、高精度移液器、专业配套的硬件模块(磁性、热循环、温控、HEPA模块)和实验器具耗材等。Opentrons的产品广泛应用于高等院校、科研机构以及生物化学制品企业,在分子生物诊断、生物技术、医疗、食品、法医鉴定、基因测序、蛋白质工程等行业广泛使用。目前我们的产品销往全球100多个国家,在超过6000个科研实验室中投入使用,受到业界的广泛好评和关注。2021年Opentrons获得由软银领投的2亿美元C轮融资,未来将继续为生命科学领域做出更大贡献。如果您有意向进一步了解我们的产品,或者对我们有帮助建议,欢迎联系我们。
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  • 质谱定量糖化血红蛋白新高度 QuanTOF I型 和QuanTOF Ⅱ型产品优势可定量:糖化血红蛋白定量检测,同时可检测变异血红蛋白(hemoglobin variant)效率高:一次可达96或384样本通量;一个样本30秒内即可完成检测结果准:质谱检测特异性及灵敏度高,抗干扰能力强成本低:测试成本比其他方法低 应用场景糖化血红蛋白定量质谱系统 QuanGHb糖化血红蛋白定量质谱系统,基于QuanTOF MS技术,得益于其强大的 分辨能力,能准确定量糖化血红蛋白的同时,也可定量其他类型变异血红蛋白(hemoglobin variant),且抗干扰能力优异。三种不同糖化率样本,每种样本24次 点样测试,共72次测试的质谱图叠加, 相对标准误差小于2% 变异血红蛋白(hemoglobin variant)检测 血红蛋白是一种珠蛋白和血红素组成的结合蛋白。在正常成人的血红蛋白(HbA)中, 珠蛋白有2种肽链,一种是α珠蛋白链,一种是β珠蛋白链。血红蛋白病,是一种遗传性 溶血性贫血。分为珠蛋白肽链分子结构异常和珠蛋白肽链分子数量异常,这些都是由于基 因突变引起的。通过检测和定量患者血液中的异常血红蛋白可以发现此种疾病。 变异血红蛋白(hemoglobin variant)是因为蛋白基因突变造成氨基酸改变而形成的。 这些变化导致了血红蛋白的分子量发生变化,因而在质谱图中表现为不同的质量峰。同样, 血红蛋白的糖基化修饰也会造成分子量的变化。 异常样本和正常样本相比,αHb*出现2 种氨基酸改变,分子量改变; βHb*变异体氨基酸改变,并且出现了糖 化血红蛋白Glc-βHb,变异体的糖化血 红蛋白Glc-βHb*功能优势可准确定量糖化血红蛋白 在检测普通糖尿病人的糖化血红蛋白时,QuanGHb检测结果与HPLC检测结果呈现良好 的线性关系。可发现变异血红蛋白(hemoglobin variant)对照血红蛋白和Hb辽宁的 QuanGHb质谱。(A)来自 正常成人的对照血红蛋白和 (B)来自先证者的Hb辽宁。● 分开的两个峰质量相差41.5Da,清楚地表明存在变异体α链(m/z=15,169.4)。● 箭头表示存在正常α链(m/z=15,127.9),正常β链(m/z=15,868.0)和糖化-βHb(m/ z=16,030.0)。 变异血红蛋白(hemoglobin variant)样品的不同方法学测试比对参考文献:1. Anping Xu, et al. Evaluation of MALDITOF MS for the measurement of glycated hemoglobin,Clinica Chimica Acta,154-1602. Anping Xu, et al. Detection of a novel hemoglobin variant Hb Liaoning by matrix assisted laser desorption/ ionization-time of flight mass spectrometry, ClinChem Lab Med 2019,1-3 前处理流程操作全流程
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结合珠蛋白相关的耗材

  • 70502Beaver钴离子螯合磁珠蛋白纯化磁珠
    His-tag蛋白纯化磁珠BeaverBeads™ His-tag Protein Purification磁珠(组氨酸标签蛋白纯化琼脂糖磁珠)是专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,显著地简化了纯化工艺,降低了设备需求,适合科研和工业领域便捷快速地进行组氨酸标签蛋白的纯化工作。对比传统的过柱层析纯化方式, His-tag Protein Purification磁珠通过磁性分离方式纯化组氨酸标签蛋白,无需对粗蛋白样品进行多次费时费力的离心、过滤步骤,无需装柱和过柱层析,无需昂贵的柱层析设备,在1小时内便能便捷地获得高产量和高纯度的目的蛋白,且能轻松实现多样品平行处理,显著提高了工作效率,大大降低了设备、时间和人工成本.本产品系列包括镍离子(Nickel)和钴离子(Cobalt)两种金属离子螯合磁珠。它们在目标蛋白结合量及所得目标蛋白纯度上有所差异,一般推荐客户使用镍离子螯合磁珠,大多数情况下能满足客户对蛋白载量和纯度的要求;对纯度要求更高的客户推荐使用钴离子螯合磁珠。His-tag Protein Purification磁珠广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。产品名称编号规格包装单价BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel Kit-1070501-K1010rxns试剂盒¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt Kit-1070502-K1010rxns试剂盒¥1.可从粗样品直接纯化目标蛋白,极大的缩短纯化时间2. 可轻松实现对目标蛋白浓度和体积的控制通过调节洗脱缓冲液体积的方式,实现对目标蛋白浓度和体积的控制,无蛋白损失,且不存在蛋白变性、沉淀的风险。3. 一步纯化即可获得高纯度目标蛋白海狸磁珠与市场上进口产品相比,一步纯化即得到同水平高纯度的目标蛋白。一个完整的操作流程即可获得纯度可以达到95%以上的目标蛋白。4.平行操作稳定性高,可方便实现高通量和大规模蛋白纯化目的蛋白纯度和产量的标准差均5%。完全不存在流速和样品体积的限制,适用于高通量和大规模蛋白纯化。5.可以获得较高的目标蛋白产率利用海狸磁珠对粗样品进行纯化,一步完整的纯化流程之后,90%以上纯度的目标蛋白,其产率一般达到70~80%。6.可重复使用,再生工艺简单由图A、B可知,海狸磁珠反复进行多达六次再生处理,仍能保持较好的目标蛋白结合能力和纯度。图A. 再生6次后磁珠结合目标蛋白检测图谱 图B. 再生6次后磁珠的蛋白结合量数据图7. 镍螯合磁珠与钴螯合磁珠对不同分子量的His-tag蛋白纯化对比? Co离子螯合磁珠蛋白结合量比Ni离子螯合磁珠稍低,但纯度更高;? Co离子螯合磁珠洗涤和洗脱所用咪唑浓度都比Ni离子螯合磁珠低。图A.镍和钴螯合磁珠纯化His-tag Lif 蛋白 图B.镍和钴螯合磁珠纯化M-MLv蛋白(分子量~ 50KD)对比 (分子量~ 70KD)对比引用文献:Overexpression of a cysteine proteinase inhibitor gene from Jatropha curcas confers enhanced tolerance to salinity stress;ELECTRONIC JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 卷: 18 期: 5 页: 368-375 出版年: SEP 2015Production and Stabilization of an Integrin Binding Moiety of Complement Component 3;MOLECULAR BIOLOGY 卷: 49 期: 5 页: 723-727 出版年: SEP 2015The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达;沈阳农业大学学报Innovation Spaces in Asia: Entrepreneurs, Multinational Enterprises and Policy;登革病毒四型联合重组包膜蛋白III 区的表达和免疫原性鉴定*;中国生物工程杂志Quantitative Proteomic Analysis of Escherichia coli Heat-Labile Toxin B Subunit (LTB) with Enterovirus 71 (EV71) Subunit VP1;INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES 卷: 17 期: 9 文献号: 1419 出版年: SEP 2016人C-Src 蛋白酪氨酸激酶真核表达, 纯化及活性检测;生物技术通报人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定;生物技术一个麻风树Kunitz型蛋白酶抑制剂基因的克隆和鉴定;四川大学学报(自然科学版)锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)抑制小鼠RAW264.7细胞增殖以及吞噬体-溶酶体的融合;细胞与分子免疫学杂志A Novel Assay for Screening Inhibitors Targeting HIV Integrase LEDGF/p75 Interaction Based on Ni2+ Coated Magnetic Agarose Beads;SCIENTIFIC REPORTS 卷: 6 文献号: 33477 出版年: SEP 16 2016Eukaryotic expression,protein purification and identification of human tyrosine-protein kinase Lyn;The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016Design, Recombinant Fusion Expression and Biological Evaluation of Vasoactive Intestinal Peptide Analogue as Novel Antimicrobial Agent;Molecules 2017, 22, 1963 DOI:10.3390/molecules22111963The thermoduric effects of site-directed mutagenesis of proline and lysine on dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides 0326;International Journal of Biological Macromolecules,DOI:10.1016/j.ijbiomac.2017.10.023GR1-like gene expression in Lycium chinense was regulated by cadmium-induced endogenous jasmonic acids accumulation;Plant Cell Rep (2017) 36:1457–1476, DOI:10.1007/s00299-017-2168-2Development of a peptide ELISA to discriminate vaccine-induced immunity from natural infection of hepatitis A virus in a phase IV study;Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2017) 36:2165–2170, DOI:10.1007/s10096-017-3040-6
  • 医脉赛科技 磁珠蛋白A/G(ProteinA/G)抗体亲和磁珠
    产品介绍Protein A/G抗体纯化磁珠是由超顺磁性颗粒与protein A及 protein G共价偶联而成。Protein A/G对多个物种IgG的不变区域(Fc)具有很高亲和力,包括人类,狗和兔等。医脉赛Protein A/G抗体纯化磁珠具有快速磁响应性,高蛋白结合能力和低非特异性结合,可快速有效地从血清、腹水或细胞培养液等生物样品中分离和纯化免疫球蛋白,也可通过抗原抗体结合从生物样品中免疫沉淀靶蛋白。本产品可再生及再生后使用,用于高效抗体制备。操作流程(示意图):产品特性: 高品质微球:超顺磁性纳米微球;粒径:300 nm;pH 稳定性:pH 2-13高磁响应性:30emu/g最大程度保持蛋白活性高纯度低背景,设备简单,结合力高产品应用:蛋白A/G(Protein A/G)抗体亲和磁珠从人血清样本中纯化抗体实例见下:
  • 血浆蛋白结合试验平衡透析装置 PPB
    血浆蛋白结合试验平衡透析装置平衡透析法测定血浆蛋白结合率是用透析膜将蛋白质溶液与缓冲液分隔开,建立在两者之间的一种平衡状态,只有分子量小的药物小分子可以通过。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度与膜的厚度、透析的小分子溶质在膜两边的浓度梯度及透析温度等因素有关。平衡透析法能够直接测出为与蛋白结合的药物小分子的数量,这是分析蛋白与小分子物质结合的关键,从而能够求出结合位点数及结合常数。如图所示,利用半透膜将左右两室进行分隔,左侧加入含药的蛋白溶液,右侧加入空白缓冲液,未被结合的游离药物可以自由穿过半透膜,孵育一定时间后两侧达到平衡,游离药物浓度相等,通过测定两侧药物浓度即可计算得到血浆蛋白结合率。平衡透析法在测定药物血浆蛋白结合率具有操作简单、温度易于控制、PH值可调、设备成本低廉等优点。但是同时存在达成平衡时间较长、溶液体积会变化,且透析时间过长可能会造成由加热或代谢引起的被测物质的降解等缺点。因此在利用平衡透析法测定药物血浆蛋白结合率,或者药物与蛋白质相互作用时需要与其他的一些方法联用,才能获得更准确的作用信息。一般只有血浆蛋白结合率高,分布容积小,消除慢以及治疗指数低的药物在临床上的这种相互作用才有意义。3 血浆蛋白结合平衡透析装置 汇智泰康针对血浆蛋白结合率测定试验研发针对性的平衡透析装置,平衡透析装置包括2n个透析池和透析池之间的透析膜组成,可以同时对多个样品进行透析测定,确定游离化合物比例。透析膜(半透膜)选用高分子膜,孔径可根据客户需求定制。汇智泰康可提供产品:平衡透析装置,半透膜,不同种属血浆等。相关产品:血浆蛋白结合平衡透析装置透析膜血浆蛋白结合试剂盒-猴血浆血浆蛋白结合试剂盒-比格犬血浆血浆蛋白结合试剂盒-大鼠血浆血浆蛋白结合试剂盒-小鼠血浆ADME服务项目肝微粒体代谢稳定性(人,猴,犬,大鼠,小鼠)肝细胞代谢稳定性试验(人,猴,犬,大鼠,小鼠)代谢表型研究代谢产物鉴定代谢途径鉴定 种属比较研究CYPP450抑制实验(CYP1A2,CYP2A6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)CYPP450诱导实验血浆蛋白结合率测定血浆稳定性试验跨膜转运试验药物-药物相互作用毒理学研究ADME相关产品:Ⅰ相代谢稳定性试剂盒Ⅱ相代谢稳定性试剂盒CYP450 酶代谢表型研究试剂盒(化学抑制法/7种抑制剂)CYP450 酶代谢表型研究试剂盒(重组酶法/7种酶)CYP450 酶代谢表型研究试剂盒(重组酶法/单酶)酶抑制(IC50)研究试剂盒(7种特异性底物)酶抑制(IC50)研究试剂盒(单个酶)NADPH再生系统UGT孵育系统0.1M PBS肝微粒体(人,猴,犬,大鼠,小鼠)肝S9(人,猴,犬,大鼠,小鼠)肝原代细胞(人,猴,犬,大鼠,小鼠)CYP450(CYP1A2,CYP2A6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)UGT酶探针底物,代谢产物,抑制剂(CYP1A2,CYP2A6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4)汇智泰康是一家位于中美两地的生物医药合同研发机构,整合中美两地的药物研发技术服务平台,基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025实验室认证,面向全球企业及研发机构提供分析化学、DMPK、药理药效、生物学、以及毒理安全性评价产品与服务。

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