酮咯酸氨丁三醇

【作者】 马铭研； 周丹丹； 于治国；【机构】 沈阳药科大学药学院； 沈阳药科大学药学院 辽宁沈阳110016； 辽宁沈阳110016；【摘要】 目的:比较研究大鼠尾静脉注射与局部皮肤给予酮咯酸氨丁三醇的药动学行为。方法:采用HPLC法,色谱柱:Dia-monsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-三乙胺-冰醋酸(80∶19.9∶0.02∶0.08);流速:1.0mL.min-1;柱温:30℃;检测波长:313nm。结果:酮咯酸氨丁三醇在0.2~100mg.L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 0),日内RSD为2.3%~5.1%,日间RSD为2.2%~12.2%,萃取回收率为86.8%~96.2%,注射剂和凝胶剂的T1/2α分别为(0.4±0.3)h,(2.9±2.6)h;T1/2β分别为(2.7±2.0)h,(9.0±8.5)h。结论:本试验建立的方法操作简单,方法灵敏、特异,结果准确。酮咯酸在大鼠体内药动学行为符合二房室模型;外用给药透皮吸收良好。【谱图】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142206_383898_1609970_3.jpg

因工作需要，需要对酮咯酸氨丁三醇中的残留有机溶剂乙醇和1,2-二氯乙烷进行方法学研究，乙醇为三类溶剂，药典规定限度为0.5%，1,2-二氯乙烷为一类溶剂，药典规定限度为0.0005%，因为1,2-二氯乙烷的限度较低，在FID检测器下很难检测，故需要用到ECD检测器检测1,2-二氯乙烷。 方法学研究为，方法一，乙醇的检测；方法二，1,2-二氯乙烷的检测。1.1方法概述应用GC外标法对酮咯酸氨丁三醇中的残留有机溶剂乙醇进行定量分析。载气：氮气；检测器：FID。1.2对照品及样品名 称来源批号酮咯酸氨丁三醇样品某医药企业120201乙醇西陇化工股份有限公司11070111.3仪器和仪器参数气相色谱仪型号：岛津公司GC-2010天平型号：梅特勒公司XS105顶空进样器型号：DANI公司 HSS86.50色谱柱类型：DB-624 规格30m×0.53mm×3.0µm 载气：氮气 柱温：50 ℃检测器：FID检测器温度: 250℃；进样口温度: 200℃；流速： 3.0 ml/min；进样量： 1.0ml；分流比： 10：1样品盘平衡温度： 80℃；定量环温度： 90℃；传输线温度： 100℃；样品盘平衡时间： 30min1.4溶液配制对照溶液：准确称取乙醇50mg于100ml容量瓶中，用水稀释定容至刻度，摇匀，精密移取3ml置于20ml顶空瓶中，密封即得对照溶液。准确称取样品0.3g，置于20ml顶空瓶中，加水3.0ml，密封即得供试品溶液。1.5验证内容及结果1.5.1系统适用性试验方法：取酮咯酸氨丁三醇溶残对照溶液，依法连续进样5次，记录乙醇峰面积的相对标准偏差（RSD%）。乙醇峰面积的相对标准偏差RSD应不大于10%，乙醇的理论塔板应不小于10000，乙醇的拖尾因子应不大于1.5。结果：序号12345RSD%A乙醇[/si

维权声明：本文为lunanjituan原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。酮咯酸氨丁三醇残留溶剂方法学验证（FID）一、方法：甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸、甲苯 称取异辛烷约20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标贮备液；依次称取甲醇约300mg、乙醇约500mg、二氯甲烷约60mg、乙酸乙酯约500mg、乙酸约500mg、甲苯约89mg，均精密称定，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取溶液5ml，置50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液；称取酮咯酸氨丁三醇约1.0 g，精密称定，置10ml量瓶中，加DMF适量使其溶解，加1.0 ml内标贮备液，加DMF稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取对照贮备液5.0 ml，置10ml量瓶中，加1.0ml内标贮备液，用DMF稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照气相色谱法（中国药典2005年版二部附录V E）和有机溶剂残留量测定法（中国药典2005年版二部附录VIII P第一法），用DB-624毛细管色谱柱（30m×0.53mm×3.0µm ），FID检测器，载气为氮气，进样口温度200ºC ，流速1.5ml/min，分流比5：1；柱温在40ºC下保留5分钟，然后以10ºC/min的速率升至200ºC，至少保留9分钟；检测器温度250ºC。分别精密量取上述两种溶液各1.0µl进样分析，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，含甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸及甲苯分别不得过0.3%、0.5%、0.06%、0.5%、0.5%、0.089%。二、仪器与试药 岛津GC-2010气相色谱仪，FID检测器。甲醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：T20080109）、无水乙醇（分析纯，汕头西陇化工厂有限公司，批号： 0808141）、二氯甲烷（分析纯，汕头西陇化工厂有限公司，批号：0710311）、乙酸乙酯（沈阳瑞丰精细化学品有限公司，批号：20050626）、乙酸（上海试剂一厂，批号：20071201）、甲苯（天津瑞金特化学品有限公司，批号：20060704）、N，N-二甲基甲酰胺（分析纯，天津四友生物医学技术有限公司，批号：070914101）、异辛烷（分析纯，TEDIA company INC.USA，批号：506173）。三、色谱条件 色谱柱：DB-624毛细管气相色谱柱（30m×0.53mm×3.0µm ）。FID检测器，载气为氮气，进样口温度200ºC ，流速1.5ml/min，进样量：1.0µl，分流比5：1；柱温：在40ºC下保留5分钟，然后以10ºC/min的速率升至200ºC，至少保持9分钟；检测器温度250ºC。尾吹：30ml/min。各峰的理论塔板数均应不低于10000，各峰的拖尾因子均应不大于2.0，各峰间的分离度均应不小于2.0。四、气相色谱方法学验证 照有机溶剂残留量测定法测定。根据合成路线，对甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸及甲苯等残留溶剂进行了方法学研究。1、专属性试验1.1空白基线 依柱温设定条件，得基线GC色谱图。见附图。1.2空白溶剂 精密量取DMF1.0µl 注入GC，得空白溶剂GC色谱图。见附图。1.3甲醇 称取甲醇约15mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得甲醇GC色谱图。见附图。1.4乙醇 称取乙醇约25mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得乙醇GC色谱图。见附图。1.5二氯甲烷 称取二氯甲烷约30mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀,量取溶液1ml置10ml量瓶中，加DMF稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得二氯甲烷GC色谱图。见附图。1.6乙酸乙酯 称取乙酸乙酯约25mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得乙酸乙酯GC色谱图。见附图。1.7乙酸 称取乙酸约25mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得乙酸GC色谱图。见附图。1.8甲苯 称取甲苯约45mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀,量取溶液1ml置10ml量瓶中，加DMF稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得甲苯GC色谱图。见附图。1.8异辛烷（内标） 称取异辛烷约20mg，置于50ml量瓶中，加DMF溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得异辛烷GC色谱图。见附图。1.9 对照溶液 依法配制对照溶液，精密量取1.0µl 注入GC，得对照溶液GC色谱图。见附图。由色谱图可知：待测各残留溶剂间的分离度均大于2.0，相互之间没有干扰。1.10 对照与样品混合溶液 依法配制对照溶液和样品溶液，并将二者按1：1相互混合，摇匀。精密量取1.0µl 注入GC，得对照与样品混合溶液GC色谱图。见附图。由色谱图可知：测定样品溶液中的潜在杂质对待测残留溶剂样品无干扰。2、系统适用性试验精密量取对照贮备液5.0ml，置10ml量瓶中，加1.0ml内标贮备液，加DMF稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液，依法连续进样六次，记录色谱图，记录各残留溶剂的保留时间、拖尾因子、理论塔板数、峰面积，计算各溶剂与内标峰面积的比值及RSD。结果见表1～7。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012091040_265708_2961690_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012091041_265709_2961690_3.jpg[img