氧化苦参碱

[align=center][b]流动相混合方式对苦参碱及氧化苦参碱出峰影响[/b][/align][b]1. 色谱条件与系统适用性试验[/b] 色谱柱Agilent ZORBAX NH[sub]2[/sub](Agilent ZORBAX SB C18)；以乙腈-异丙醇- 3 % 磷酸溶液（80 ：5 : 15)为流动相 ；检测波长为210nm。理论板数按氧化苦参碱峰计算应不低于4000。[b]2. 对照品溶液的制备[/b] 取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品 适量，精密称定，加流动相分别制 成苦参碱94.74 μg/ml， 氧化苦参碱156.65μg/ml的混合溶液，即得。[b]3. 供试品溶液制备[/b] 取本品粉末（过三号筛）约0. 3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液0. 5ml，精密加入三氯甲 烷20ml，密塞，称定重量，超声处理 （功率250W，频率33k Hz)30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱 (100〜 200目，5g，内径 1 cm )上 ，依次以三氯甲烷、三氯甲烷 -甲醇（7 : 3)混合溶液各20ml洗脱，合并收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转移至10ml量 瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。[b]4. 样品分析[/b] 依次将混合对照品溶液和供试品溶液进样10 μL，记录苦参碱、氧化苦参碱保留时间及峰面积。[b]5. 结果[/b]5.1 以乙腈（A)-异丙醇(B)- 3 % 磷酸溶液(C)三相流动相泵前混合 混合对照品溶液及供试品溶液色谱图分别见图1、图2.[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041713523978_9340_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图1 对照品溶液色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041714189908_9161_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图2 供试品溶液色谱图5.2 以乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液（80:5:15)混合溶液为流动相 分别将乙腈、异丙醇、3%磷酸溶液过膜，之后将乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液按照药典比例混合均匀于同一流动相瓶中，超声脱气，在线脱气。混合对照品溶液及供试品溶液色谱图见图3、图4。[align=left][img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041714538638_4360_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] [/align] 图3对照品溶液色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041715257979_1578_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图4 供试品溶液色谱图[b]6 讨论[/b] 以乙腈（A)-异丙醇(B)- 3 %磷酸溶液(C)三相流动相在四元泵上泵前混合，或者以乙腈为流动相A、异丙醇-3%磷酸溶液（5:15）为流动相B二元高压泵上泵后混合，对照品溶液和供试品溶液苦参碱、氧化苦参碱出峰异常，见图1、图2。只有预先将乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液按照药典（80:5:15)比例预先混合均匀，脱气，对供试品溶液及对照品溶液梯度洗脱，苦参碱和氧化苦参碱出峰正常，见图3、图4。