推荐厂家
暂无
暂无
藤黄【英文名】Gamboge【别名】玉黄、月黄。【来源】药材基源:为藤黄科植物藤黄的树脂。拉丁植物动物矿物名:Garcinia hanburyi Hook.f.采收和储藏:在开花之前,在离地3m处将茎干的皮部作螺旋状的割伤,伤口内插一竹简,盛受流出的树脂,加热蒸干,用刀刮下,即可。【原形态】藤黄 常绿乔木,高约15-18m。小枝四棱形。单叶对生,几无柄;叶片薄革质,阔披针形,长9-13cm,先端尖,基部楔形,全缘或微波状。花单生或为聚啊伞花序;两性与单性花黄存;花绿白色,无梗;萼片5,花瓣5;雄花通常2-3朵簇生,雄蕊多数,花丝短,花药1室,横裂;雌花具退化雄蕊12枚,其基部合生而环绕子房周围,子房上位,平滑无毛,柱头盾形,为不整齐之裂片或瘤块,4室。浆果,径约2cm。种子4颗。花期11月,果熟期次年2-3月。【生境分布】生态环境:原产柬埔寨及马来西亚,印度、泰国、越南亦产。资源分布:现我国广东、广西有引种栽培。【栽培】野生【性状】性状鉴别 树脂为不规则的圆柱形或块状,棕红色或橙色,外被黄绿色粉霜,可见纵条纹。质硬脆,较易击碎,破面有空隙,具蓝褐色略带蜡样光泽。味辛,有毒。以半透明、色红黄者为佳。【化学成份】藤黄树含藤黄酸(gambogic acid),别藤黄酸(allogambogic acid),新藤黄酸(neogambogic acid)。【药理作用】1.抗菌作用:其种子衣中的色素--藤黄宁对金黄色葡萄球菌有抑制作用,体外的有效浓度为1∶10000;对若干真菌、草分支杆菌、人型结核杆菌效力很豹,对大肠杆菌亦无效闭。新藤黄宁也有抗金黄色葡韵球菌的作用。异构体(异藤黄宁及异新藤黄宁)的抗原虫作用较其母体有效(藤黄宁或新藤黄宁通过肠管时可异构化)。藤黄索在体外对非致病性原虫有抑制作用,特别是β-及γ-藤黄素效力较强。抗原虫与抗菌作用,并不平行。α1-及γ-藤黄素在各方面(如抑制革兰氏阳性细菌之能力、对小鼠人工感染葡萄球菌的保护作用、在血清或金属离干存在时的反应、对热及酸碱度的稳定性等)皆与α2-及β-藤黄素相似。2.其他作用与毒性:β-及α1-藤黄索在超过治疗量时可引起小鼠腹泻(β-藤黄索致泻力更强)。对小鼠的急性毒性(半数致死量,mg/kg)为:α1-及γ-藤黄素皮下注射均为277;腹腔注射分别为87.1及77.18;静脉注射分别为108.4及108,这些数值与α2-及β-藤黄素的毒性栖差甚微。【炮制】制藤黄:1.先用豆腐一大块,平铺于盘内,中间挖一不透底的槽,将藤黄放人,再用豆腐盖严,置于笼屉内,放入锅中,将此锅再坐于大锅内,隔水加热,蒸至藤黄溶化,取出,冷却凝固,去豆腐晒干。2.先将藤黄放入磁罐内,加入比藤黄多10倍量的鲜荷叶煎汁,将罐放入锅中,隔水加热40-60分钟,至罐内溶液呈紫红色时,倒入铜锅内再煎,浓缩成糊状,晒干。(每藤黄斤约用荷 叶半斤煎法,去渣)3.将藤黄加入鲜山羊血中,置铜锅内,加水同煮5-6小时,去山羊血晾干。(每藤黄1斤,用鲜山羊血半斤)【性味】酸;涩;凉;有毒【功能主治】消肿;攻毒;止血;杀虫;祛腐剑疮。主痈疽肿毒;溃疡;湿疮;肿癣;顽癣;跌打肿痛;创伤出血及烫伤【用法用量】外用:适量,研末调敷、磨汁涂或熬督涂。内服:0.03-0.06g,入丸剂
在做抗生素实验时,使用藤黄球菌作指示菌,为什么一定要加陶瓦盖呢,能不能用蒸发皿代替呢,两者的差别是透光和不透光。[em09511]
[size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]GA[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]诱导[/color][/font][font=&][color=#0070c0]KRAS[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]降解[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][size=15px][font=宋体]作者首先通过筛选了一个自制的化合物库,用含有[/font][font=&] KRAS[sup]G12A[/sup][/font][font=宋体]突变的[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞系[/font][font=&]MM.1S[/font][font=宋体]和[/font][font=&]RPMI 8226[/font][font=宋体]鉴定可以降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]水平的化合物,发现藤黄酸([/font][font=&]Gambogic acid[/font][font=宋体],[/font][font=&]GA[/font][font=宋体],)处理可降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平,而其他化合物没有表现出相似或较弱的效果。进一步实验表明,[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以以浓度和时间依赖性方式降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平,以及[/font][font=&] KRAS[/font][font=宋体]的下游[/font][font=&]p-ERK[/font][font=宋体]([/font][font=&]MAPK[/font][font=宋体]通路)和[/font][font=&]p-AKT[/font][font=宋体]([/font][font=&]PI3K[/font][font=宋体]通路)。此外,[/font][font=&]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]不会改变[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的转录水平,表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可能在转录后水平降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size][size=15px][font=宋体]进一步使用蛋白酶体抑制剂[/font][font=&]MG132[/font][font=宋体]发现[/font][font=&]MG132 [/font][font=宋体]部分挽救了[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]诱导的[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]蛋白下调,表明[/font][font=&] KRAS [/font][font=宋体]蛋白降解与泛素[/font][font=&]-[/font][font=宋体]蛋白酶体途径有关,此外,我们采用放线菌酮([/font][font=&]CHX[/font][font=宋体])测定评估显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]处理后,[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的半衰期显著缩短。这些数据表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以诱导[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的蛋白酶体降解,进而损害[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞中的下游信号转导[/font][font=宋体] [size=15px][b]2、鉴定USP2作为GA的新靶标[/b][/size][size=15px]为了确定GA诱导KRAS降解的靶标,作者合成了生物素标记的GA,发现它保留了在MM细胞中诱导KRAS降解的能力,进一步利用该探针开展Pulldown+MS,鉴定到的互作蛋白中,HSP90和USP2这两种与蛋白质降解相关。HSP90是一个已知的GA靶点,作为伴侣蛋白,它可以调节各种蛋白的稳定性,然而HSP90抑制剂STA9090处理不能降低MM.1S细胞中KRAS的蛋白水平,表明KRAS不是 HSP90的底物。因此,作者更加关注USP2,一种新型的GA互作蛋白。通过Pulldown+WB、免疫荧光共定位、竞争实验、CETSA、DARTS实验共同证实了USP2是GA的直接相互作用蛋白。此外,GA在体外相对特异性地抑制USP2的去泛素化活性( [/size][size=15px][b]3、半胱氨酸284对于GA与USP2的共价结合至关重要[/b][/size][size=15px]然后,作者研究了GA和USP2之间的相互作用模式,发现碘乙酸(IAA,一种半胱氨酸烷化剂)与USP2的预孵育完全抑制了GA与USP2的结合,表明GA可能与USP2的半胱氨酸共价结合,这与之前的报道一致,即GA可以通过半胱氨酸残基与其靶标共价结合。接着,通过USP2蛋白与GA一起孵育后质谱鉴定,发现Cys284残基被GA共价修饰。此外,通过构建USP2的两个突变体(C276S、C284S),发现GA 与 USP2(C276S)结合,而不是USP2(C284S),表明GA可以与USP2的Cys284残基特异性形成共价键。结合动力学显示GA 以剂量和时间依赖性方式与 USP2 共价结合,分子对接显示P565和 R289对于形成GA与USP2结合的口袋至关重要。同样通过蛋白点突变实验发现P565 和 R289对GA-USP2相互作用至关重要 [/size][size=15px][b]4、USP2调节KRAS的稳定性[/b][/size][size=15px]前面发现GA降低MM细胞中KRAS蛋白水平并抑制USP2活性,表明USP2可能调节KRAS的稳定性。作者利用CRISPR/Cas9敲除MM.1S和RPMI 8226细胞系中的USP2,发现敲除USP2导致KRAS蛋白水平降低,mRNA水平不变, KRAS的下游效应子p-ERK水平也显著降低。此外,敲除诱导的KRAS下调可被两种细胞系中的蛋白酶体抑制剂MG132挽救。结果表明USP2可以增强KRAS的蛋白质稳定性。进一步研究发现USP2与KRAS互作并使KRAS去泛素化,表明KRAS是USP2的底物 [/size][size=15px][b]5、USP2敲除抑制MM细胞的增殖[/b][/size][size=15px]鉴于KRAS在MM细胞增殖和存活中的关键作用,作者假设USP2敲除可能会使KRAS不稳定,从而导致MM细胞增殖抑制。结果显示USP2敲除显著抑制MM.1S和RPMI 8226细胞系的增殖,诱导这两种MM细胞系凋亡。此外,MM.1S 细胞的异种移植 MM 模型发现,USP2敲除显著抑制肿瘤生长,免疫组化染色也显示USP2敲除组的KRAS水平降低,这些数据共同表明USP2在MM细胞的增殖和存活中起着关键作用 [/size][size=15px][b]6、GA通过靶向USP2和破坏KRAS的稳定性来诱导MM细胞凋亡[/b][/size][size=15px]据报道,GA通过抑制PI3K/Akt/mTOR、[i]NF-κ[/i]B 和其他信号通路诱导MM细胞凋亡。作者发现GA处理可以以剂量依赖性方式降低MM.1S和RPMI 8226细胞的活力并促进细胞凋亡。此外,过表达USP2的细胞对GA诱导的活力降低和KRAS降解表现出部分抗性,且GA处理可以提高 KRAS的泛素化水平。KRAS[sup]G12C[/sup]的过表达可以部分消除USP2敲除诱导的细胞生长抑制。这些数据表明,GA在 MM 细胞中诱导的细胞毒性至少部分归因于其靶向USP2,这降低了KRAS的稳定性。[/size][size=15px]最后,作者探讨了USP2在MM中的临床意义。通过GSE13591数据集发现MM患者骨髓样本中的USP2 mRNA水平明显更高。此外,作者发现原发性骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞系中USP2的蛋白水平高于正常外周血单核细胞(PBMC)和正常骨髓活检,且高USP2水平的MM患者的总生存期降低,这些结果共同表明USP2表达增加与MM中较差的结局之间存在很强的相关性,表明USP2可能是MM治疗的有前途的靶点。[/size][/font][font=&][/font][/size]