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[size=16px][font=Arial, &][color=#333333]目的[/color][/font][font=Arial, &][color=#333333] 建立中药材蛤蚧聚合酶链反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])-免疫胶体金试纸条快速分子鉴定方法,研发快速基因检测试剂盒。 [/color][/font][font=Arial, &][color=#333333]方法[/color][/font][font=Arial, &][color=#333333] 筛选提取基因组DNA的方法及试剂,根据蛤蚧mtDNA cytb基因设计种属特异性引物并标记,筛选最佳反应条件,研发[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]基因检测试剂,采用分子克隆及基因测序技术制备对照药材DNA克隆液,利用免疫胶体金试纸条进行结果检测。进而,开发出一体化快速基因检测试剂盒,并对特异性、重现性、灵敏性、稳定性进行评价。 [/color][/font][font=Arial, &][color=#333333]结果[/color][/font][font=Arial, &][color=#333333] 基因组DNA的完整性、浓度、纯度均满足[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]的要求,引物在退火温度63 ℃时,循环20次时,免疫胶体金试纸条显示:蛤蚧对照药材及正品出现两条红色条带,易混品及空白对照出现一条红的条带。琼脂糖凝胶电泳验证正确。对照药材克隆测序结果于蛤蚧mtDNA cytb基因同源性100%。一体化快速基因检测试剂盒的特异性强、重现性好、稳定性好、灵敏度高于琼脂糖凝胶电泳10倍。 [/color][/font][font=Arial, &][color=#333333]结论[/color][/font][font=Arial, &][color=#333333] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-免疫胶体金试纸条鉴定方法能够特异、准确、快速、可视化地鉴定蛤蚧的真伪,一体化快速检测试剂盒使鉴定方法更加规范化、标准化,更适合实地现场检测、适合普遍推广使用。[/color][/font][/size]
请各位老师帮忙看看,不知荆芥对照药材(右边一个为对照药材,左边三个为制剂样品——含荆芥)本身就这样,还是我做的不好,斑点不清晰。多谢![img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907171127582678_7811_1825519_3.jpg!w690x517.jpg[/img]
适时采收,科学合理加工,是提高动物药材质量的关键。现将动物药材的加工方法介绍如下,以供参考。 土鼋 将活土鼋身上的泥土洗净后,放入盐水中(1kg土鼋加10g盐)煮40分钟。待其腹部瘪时捞出,摊在席上,用木板轻轻压出腹部积水,焙干或晒干。 水蛭 第一种方法:把水蛭集中放入盆中,突然倒入开水,以淹没水蛭2~3指深为宜,20分钟左右捞出烫死的水蛭,洗净放在干净的地方晾晒。第二种方法:把水蛭堆入石灰中,埋20分钟左右,水蛭即中毒死亡,然后晒干或烘干,筛去石灰粉即为成品。水蛭加工后的成品以呈自然扁平纺锤形、背部稍隆起、腹面平坦、质脆易折断、断面呈胶质状并有光泽者为佳。 全蝎 (1)加工咸全蝎:加工前,将采收到的蝎子放入盛有冷水的塑料盆中,用工具轻轻的搅动,洗去蝎子身上的泥土,令其慢慢吐出体内的污物,冲洗几次后捞出沥干。按每500g活蝎放食盐150g、水2500ml的标准,将盐在锅内化开,然后放入蝎子,浸泡4~6小时后捞出。把盐水煮沸,除去浮沫,将捞出的蝎子再倒入,用竹席或草席压住,使盐水漫过蝎子,猛火煮沸20分钟,若发现用手指轻捏尾端蝎体挺直竖起,僵直不变,且背面有抽沟,就可以捞出了。将煮好的蝎子摊在草席上,放在通风处阴干,切忌在阳光下曝晒。(2)加工淡全蝎:加工前,把蝎子放入清水中洗净,捞出放入沸水中煮20分钟,每500g活蝎加盐20~30g,煮好后捞出阴干即可。 天龙 捕后用竹扦从嘴穿过腹腔,将尾固定于竹签上,然后用微火烤干或晒干,捕捉和加工时注意尾部不要脱落。 蜈蚣 将蜈蚣倒入盆内或桶内,用开水烫死,再将尾剪开,挤出肠粪和卵。取长宽与蜈蚣相等、两端稍尖的薄竹片,一端刺入下颚,一端扎入尾部上端,借竹片弹力,使其伸直晒干。在加工时,注意不要折头断尾。加工后,储存在干燥处,以防生虫发霉。 蛤蚧 用小捶击蛤蚧头部,使其晕死。用利剪挖掉眼睛,再由腹至胸剖开,掏出内脏,用布擦干(不能用水洗),随即用开水烫过晒干的竹片撑开,用两条扁竹条将四肢平行撑起。用长于蛤蚧全身1/2的扁竹条自腹部纵向插入横竹条与竹片之间,直达头部。用砂纸包好尾部,以免折断,用微火烘干。烘烤时数只排列一行,头部向下,用砂纸条扎紧,即为成对干蛤蚧。 蝉蜕 为蝉科昆虫黑蚱羽化后的干燥蜕壳,此品为野生,资源有限,属零星采集,在采集时注意保持蝉壳完整,采集后洗净泥土,晒干即可。 斑蝥 为芫青科昆虫南方大斑蝥和黄黑小斑蝥的干燥虫体,属野生零星采集品种,采集时应保持虫体完整,晒干即可。