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很多豆科植物的根细胞能与根瘤菌共生,并由此获得更多营养,提高植株的抗病害能力。那么能不能让其他作物也与根瘤菌共生,为增产创造条件呢?在对此进行尝试时,俄罗斯科研人员通过转基因手段,让烟草、油菜与根瘤菌成功“配对”。根瘤菌在进入豆科植物的根细胞并定居下来后,能与后者协作合成为植株供氧的蛋白,并将游离的氮转变成氮素营养,因此很多豆科植物的种子不仅数量多,而且富含蛋白质。http://pic.biodiscover.com/uploads/b3e3e393c77e35a4a3f3cbd1e429b5dc/article/biodiscover_26d54f184803e74153.jpg可与有益细菌共生的转基因烟草和油菜可否利用这种方式改进其他作物的长势和收成呢?实现这一目标着实不易,因为很多植物的根细胞无法和根瘤菌自然共生。那么能否人工“配对”呢?俄罗斯科学院乌法科学中心的研究人员决定用转基因手段进行尝试。负责这项研究的小组不久前在俄学术刊物《应用生物化学和微生物学》上报告说,研究者将普遍种植的红花烟草和具有重要经济价值的甘蓝型油菜选为实验对象,截取烟草的小块叶片和油菜幼苗的茎部,并为其注入豌豆的一种基因。该基因能指导合成一种植物凝集素,它能与根瘤菌和植物根细胞同时结合,帮助根瘤菌在根细胞中安家落户。在完成上述操作后,研究小组通过培植使烟草叶片边缘和油菜的嫩茎上生成细长的不定根,并让与豌豆共生的根瘤菌和这些不定根亲密接触。实验结果显示,与完全不含特定凝集素基因的烟草和油菜相比,在转基因烟草和油菜根部聚集的根瘤菌的数量分别高出13倍和36倍,人工“配对”取得显著进展。目前研究小组正在观察“配对”后的根瘤菌和根细胞如何共同生活,分析这种共生能否改进烟草和油菜的性状。研究小组成员韦尔希尼娜认为,这种转基因研究有望为促进多种经济作物增产提供新途径。
有人做过甲基硫菌灵在油菜上的残留实验吗?油菜的基质干扰比较大!!很恼火,大家有什么好的建议吗?
油菜是一种重要的油料作物,是世界四大主要油料作物之一,在加拿大、印度、中国和欧洲种植面积最大。自1985年Ooms等获得第一棵转基因油菜植株以来,在国内外广泛开展了一系列的研究工作,抗病、抗虫、抗除草剂及高产量、高品质的转基因油菜相继诞生,部分品种已进入商业化或大田试验阶段。近十年来对转基因油菜的研究取得了长足的进展,其中以抗除草剂的“双低”(低芥酸、低硫苷)油菜为主。一、检测原理样品经过提取DNA后,针对转基因植物所插入的外源基因的基因序列设计引物,通过PCR技术,特异性扩增外源基因的DNA片段,根据PCR扩增结果,判断该样品中是否含有转基因成分。二、试剂与材料引物:根据表11—17的序列合成引物,加超纯水配制成100μmol/L备用,直接用于PCR测试的引物浓度为5μmol/L。Tris饱和酚、三氯甲烷、液氮、异丙醇、70%乙醇、重蒸水、RNase A、2mg/mL溴化乙锭、DNA分子量标准(100~2000bp)、琼脂糖、10×氯化镁(25mmol/L)、Taq酶(5U/μL)、10×dNTP(含2.5mmol/L dATP,dUTP,dCTP,dGTP)。lmol/L Tris—HCl缓冲液(pH 8.0):称取121.1g Tris,溶于800mL水中,搅拌,加入浓盐酸42mL,冷却至室温,用稀盐酸准确调整pH至8.0,分装后高压灭菌备用。0.5mol/L EDTA(pH 8.0):在800mL水中加入186.1g EDTA-Na2·2H2O,磁力搅拌器剧烈搅拌,用氢氧化钠调节溶液pH值至8.0(约需20g氢氧化钠颗粒),然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。DNA抽提缓冲液:量取100mL lmol/L Tris—HCl和50mL EDTA,称取5.0g SDS和16.848g氯化钠,定容至1L,分装后高压灭菌备用。TE缓冲液(pH 8.0):量取10mL lmol/L Tris—HCl(pH 8.0)和2mL 0.5mol/L EDTA(pH 8.0),加水定容至1000mL,分装后高压灭菌备用。10×PCR缓冲液:含500mmol/L氯化钾,100mmol/L Tris—HCI(pH 8.3),15mmol/L氯化镁(MgCI2),0.1%明胶。50×TAE缓冲液:称取484g Tris.量取114.2mL冰乙酸,200mL 0.5mol/L EDTA(pH 8.0),溶于蒸馏水中,定容至2L。分装后高压灭菌备用。10×上样缓冲液:含0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF.30%甘油水溶液。三、仪器基因扩增仪、电泳仪、电泳槽、凝胶分析成像系统、DNA冷冻干燥离心机、冷冻离心机、DNA分析系统、水浴锅、微波炉、微量加样器(0.1~2.5μL、0.5~10μL、2~20μL、10~100μL、20~200μL、200 1000mL)、天平(感量0.001g)、高压灭菌锅、PCR反应管(200μL、500μL两种规格)、Eppendorf离心管(1.5mL)。