酶甲基绿琼脂基础

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    琼脂糖电泳步骤之超级基础篇一、电泳前准备准备内容作用1.刷干净电泳制胶的梳子,板子,槽子,蒸馏水洗净晾干防止不必要的重复污染,减少外来的污染。梳子干净有利于梳孔的形成。2.检查电泳槽,根据情况更换buffer排除电泳槽的电极接触不良,确保buffer的缓冲能力,减少污染。3.根据DNA的分离范围选择合适的胶浓度并记录达到较好的分离效果,防止样过快跑出胶或者是过慢浪费时间。4.计算agarose的用量和制胶 buffer的用量记录,胶最终越薄越好。实验记录备查 二、制胶步骤注意事项1.称量agarose和bufferBuffer不要用成H2O,称量相对准确2.融胶,加热到胶产生大量的气泡时,拿出摇匀,继续加热到完全溶解,拿出摇匀,再加热到沸腾。非常热,小心烫手,另外注意不要加热过度使胶冲出瓶子。因此注意选择起码为胶体积2倍以上的瓶子。保证胶混匀和完全溶解,减少可能因此引起的胶中孔径不均匀影响分离效果。3.倒胶,可用水浴的办法使胶冷却到60度左右,即手可以握住瓶子的温度,沿着制胶板的一侧,缓缓地一次性倒入。梳子最好是预先放好并固定的,注意梳孔的体积能点的下所有的样。用枪头赶掉气泡。制胶的桌面相对水平。倒胶时尽量减少气泡的产生。EB如果在制胶时加入,在60度左右时加入,使终浓度为0.5ug/ml。不宜过低,染色成像不明显;不宜过高,导致背景太深。摇匀要沿着瓶壁摇动,尽量减少气泡产生的可能性。高浓度胶例如2%以上的EB很难摇匀,而且凝的速度也相对快,强烈建议跑完胶之后再用EB染色。4.室温凝胶30分钟过程中不要碰到梳子,尽量保持胶的位置不移动。时间不宜过久,导致胶干燥变形;不宜过短,影响胶内部孔径形成。5.拔梳子,放入电泳槽。缓缓地将梳子垂直从梳孔拔出,尽可能使梳子是同时从各个胶孔拔出的。暂时不用的胶最好放入电泳槽电泳液中浸泡。电泳液要浸没胶1mm。 三、上样电泳[

  • CNS_20.001_琼脂

    [align=center][font='times new roman'][size=24px]2021.0[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]7[/size][/font][font='times new roman'][size=24px].[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]29[/size][/font][/align][align=center][/align][align=center][font='黑体'][size=20px]琼脂[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman']陈珺宁[/font][/align][align=center][font='times new roman'](厦门大学化学化工学院)[/font][/align][font='times new roman']摘要:[/font][font='times new roman']琼脂是一种从某些海藻萃取的亲水胶体,在人们日常生产生活的各个领域中有广泛的应用。琼脂可以改善食品的质构,提升食品的品质,并且没有任何毒性,成为一种重要的食品添加剂,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛应用。本文将对琼脂的理化性质、提取工艺与深加工、限量、标准、检测、应用等进行逐一介绍,有助于对该食品添加剂的了解。[/font][font='times new roman']关键词:[/font][font='times new roman']食品添加剂,琼脂,性质,提取,限量,[/font][font='times new roman']标准,检测,应用[/font][font='times new roman'][size=18px]0 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]引言[/size][/font][font='times new roman']琼脂([/font][font='times new roman']agar[/font][font='times new roman']),又称琼胶、洋菜、洋粉或冻粉等,根据中华人民共和国药典记载,琼脂系自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他数种红藻类植物中浸出并经脱水干燥的粘[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url];按照美国药典定义,琼脂是一种从[/font][font='times new roman']Rhodophyceae[/font][font='times new roman']类的某些海藻萃取的亲水胶体。琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖。其中,半乳糖残基上不含硫酸基、甲氧基、丙酮酸基等基团,可发生凝胶化的长链中性多糖是琼脂糖;半乳糖残基上含有这些基团,不发生凝胶化的长链酸性多糖是琼脂胶[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman'][size=13px][1[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2][/size][/font][font='times new roman'][size=18px]1 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]理化性质[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]溶解性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂在水中的溶解度与温度呈一定的正相关。常温下,高纯度琼脂不溶于水、无机溶剂和有机溶剂,只微溶于乙醇胺和甲酰胺;加热条件下,琼脂可溶于水形成溶液。在[/font][font='times new roman']95~100℃[/font][font='times new roman']并间歇式搅拌条件下,或在[/font][font='times new roman']100~120℃[/font][font='times new roman']高压釜中,易制取[/font][font='times new roman']0~5% [/font][font='times new roman']琼脂溶液和用于铸模的[/font][font='times new roman']8~14% [/font][font='times new roman']琼脂溶液。琼脂也可在沸腾的低浓度乙醇([/font][font='times new roman']30~50%[/font][font='times new roman'])溶液中溶解。其他研究发现,琼脂可以溶解于多种溶剂。常温下,干琼脂可以吸水溶胀,其吸水率达[/font][font='times new roman']20[/font][font='times new roman']倍;加热至[/font][font='times new roman']95℃[/font][font='times new roman']可溶于水,极易分散形成中性溶胶,其中琼脂糖含量比例越大,凝胶强度越高。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]黏度[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂凝固能力强,黏度较低,其中石花莱琼脂具有极强凝固能力、低黏度,工业琼脂因在提取过程中受化学试剂破坏具有较低的黏度。琼脂水溶液(溶胶)的黏度受原料的种类和质量,提取和加工条件,琼脂浓度、温度、加入电解质种类等测量条件影响而不同。当[/font][font='times new roman']pH = 4.5~9[/font][font='times new roman']时[/font][font='times new roman'],黏度相对稳定;当[/font][font='times new roman']pH = 6.0~8.0[/font][font='times new roman']时,黏度受老化或离子强度影响有较小变化。开始凝胶化时,在温度一定的条件下,黏度随凝胶现象持续时间的延长而增大,最终形成凝胶。此外,琼脂溶液在高温、电解质、无机酸或酸性盐类等处理后,黏度明显下降。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]絮凝性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂溶液中加入[/font][font='times new roman']10[/font][font='times new roman']倍体积乙醇、[/font][font='times new roman']2-[/font][font='times new roman']丙醇或丙酮,可以定量从其水溶液中絮凝析出;也可以用饱和硫酸钙、硫酸铵或硫酸镁溶液,使琼脂溶液发生盐析。常温下,絮凝析出的琼脂能溶于水或其他溶剂,电解质浓度越大、絮凝温度越高越难溶解,但除非在体系中加入水,否则琼脂不会[/font][font='times new roman']发生凝胶化形成凝胶。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶性与滞后性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝胶性,即使琼脂溶液浓度低至[/font][font='times new roman']0.004%[/font][font='times new roman'],常温下仍能形成凝胶,不需要任何助凝剂。琼脂凝胶有许多物理化学特性:具有热可逆性;其熔化温度受琼脂凝胶浓度和平均分子量影响;凝胶强度受原料种类、化学环境(如浓度、离子强度及[/font][font='times new roman']pH[/font][font='times new roman']等)和提取方法等影响;具有优良的相容性,可与大多数多糖类树胶或蛋白质溶液互溶;放置过程中发生轻微且缓慢的老化。值得注意的是,在多糖类树胶中,只有琼脂的凝胶化温度低于其熔化温度。琼脂溶胶的凝固点在[/font][font='times new roman']32~43℃[/font][font='times new roman']之间,琼脂凝胶的熔点在[/font][font='times new roman']7[/font][font='times new roman']5~90℃[/font][font='times new roman']之间,熔点远高于凝固点被称为[/font][font='times new roman']“[/font][font='times new roman']滞后现象[/font][font='times new roman']”[/font][font='times new roman']。琼脂的许多用途基于其凝胶温度的高滞后性。[/font][font='times new roman']在相同浓度下,琼脂凝胶与其他可凝胶化的物质相比强度最大,其中低浓度凝胶可以保护分散体系、防止扩散作用和改善产品质地,高强度凝胶具有优良的弹性、强度、回复力、可逆性、相对透明性和相对渗透性等特性,均有一定的应用价值和市场前景。此外,琼脂凝胶存在较硬、易脆、粗糙、透明性较差和冷冻后脱水等缺点,但是可以通过与其他材料进行改善,比如与糊精、蔗糖等复合使用可以提高凝胶的强度,与卡拉胶复合使用可以提高弹性和柔软度,与明胶复合使[/font][font='times new roman']用可以提高凝胶的强度、透明度和黏弹性。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.5 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]非酸性降解与稳定性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有优良的稳定性,常温下很难降解,但大量黏度、衍射和凝胶强度实验与研究证明,在超声波、强[/font][font='times new roman']γ[/font][font='times new roman']射线辐射,及强烈搅拌和高温长时间处理后,琼脂的分子链发生断裂,导致琼脂分子量降低,部分理化性能恶化。此外,琼脂具有很强的抗酶解能力不会在人或动[/font][font='times new roman']物体内被酶解,绝大部分随排泄物排出体外。[/font][font='times new roman'][size=18px]2 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]提取与深加工[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][4][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂提取工艺[/size][/font][font='times new roman']琼脂生产自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他几种红海藻,在红海藻细胞壁中以碳水化合物(多[/font][font='times new roman']糖)的形式存在。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']由于琼脂需求量的增加,琼脂提取工艺日益丰富和完善。目前,高温高压法、碱法、酶法辅助提取工艺应用较为广泛。[/font][font='times new roman']2.1.1 [/font][font='times new roman']高温高压法[/font][font='times new roman']高温高压法是琼脂提取的传统方法,主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']浸泡[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。该提取工艺简单,琼脂分子破坏较少,提取率较高,但凝胶强度较低。高温高压法提取琼脂一般适用于硫酸基含量较低的原料,如石花莱。[/font][font='times new roman']2.1.2 [/font][font='times new roman']碱法提取工艺[/font][font='times new roman']碱法工艺常见有低温高碱、中温高碱和高温稀碱3种[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']碱处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']酸处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂白[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→ [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。中低温高碱法提取温度较低、生产工艺较易控制,但用碱量大、环境负担大、生产成本较高;高温稀碱法碱浓度较低,环境污染较小,但提取温度较高、生产工艺不易控制,且在高温条件下琼脂易被破坏,导致胶质流失、降低产率。目前,许多优化提取工艺条件的研究正在进行,以更好地利用碱法工艺提取琼脂。[/font][font='times new roman']2.1.3 [/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺[/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺是使用酶处理辅助碱法提取工艺,即利用纤维素酶在碱处理前或处理后作[/font][font='times new roman']用于藻体,加速破坏藻体的细胞壁,从而促进胶质溶出。酶法辅助提取工艺是对碱法提取琼脂的优化,可以提高琼脂的得率、凝胶强度,并且有效减少碱液和清洗水的用量,减轻环境负担。[/font][font='times new roman'][size=16px]2.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂深加工[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有分子量大、溶解性差等缺点,对琼脂进行适当处理,可以扩大其应用范围。琼脂深加工主要集中在利用琼脂提取琼脂糖和通过降解琼脂制备琼胶寡糖。[/font][font='times new roman']2.2.1 [/font][font='times new roman']琼脂糖提取[/font][font='times new roman']琼脂糖是琼脂的重要组成成分,提取方法主要有碘化钠法、乙酰化法、聚乙二醇法、十[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']六烷基氯化吡啶法([/font][font='times new roman']CPC[/font][font='times new roman'])、二甲基亚砜法([/font][font='times new roman']DMSO[/font][font='times new roman'])、[/font][font='times new roman']EDTA – Na[/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman']法、[/font][font='times new roman']DEAE - [/font][font='times new roman']纤维素法、硫酸铵法、磷酸钠法、尿素法等,目的都是将琼脂中的硫琼脂和琼脂糖分离,纯化琼脂糖。[/font][font='times new roman']2.2.2 [/font][font='times new roman']琼胶寡糖制备[/font][font='times new roman']琼胶寡糖一般是指[/font][font='times new roman']DP[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']degree of polymerization[/font][font='times new roman'])为[/font][font='times new roman']2~10[/font][font='times new roman']的低聚糖[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']包括胶寡糖和新胶寡糖。琼胶寡糖具有重要的生理功能[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']在食品工业、医药工业、日用化工、生物工程等许多方面有广阔应用前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']琼脂寡糖的制备方法主要有化学降解法和酶降解法,缪伏荣[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']和林坤城[/font][font='times new roman'][size=13px][4] [/size][/font][font='times new roman']等人对琼脂降解制备琼胶寡糖作出具体介绍。[/font][font='times new roman'][size=18px]3 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]限量[/size][/font][font='times new roman']根据食品标法查询网的查询结果[/font][font='times new roman'],未查明具体食品中琼脂的最大使用量,结果均为适量使用即可。[/font][font='times new roman'][size=18px]4 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]标准[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][6][/size][/font][font='times new roman']根据中华人民共和国卫生部于[/font][font='times new roman']2010[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']12[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日发布、于[/font][font='times new roman']2011[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日实施的《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》的标准,对感官要求、理化指标、产品规格等技术要求作出详细规定。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]感官要求[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂具有类白色或淡黄色的色泽、呈均匀条状或粉状、无异味。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]理化指标[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB [/font][font='times new roman']1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂中水分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤22%[/font][font='times new roman'],灰分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5%[/font][font='times new roman'],水不溶物([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤1%[/font][font='times new roman'],重金属(以[/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman']计)[/font][font='times new roman']≤20%[/font][font='times new roman'],铅([/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5 mg/kg[/font][font='times new roman'],砷([/font][font='times new roman']As[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤3 mg/kg[/font][font='times new roman']。其中逐一理化指标的检验方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]产品规格[/size][/font][font='times new roman']产品规格按凝胶强度不同划分,分为低强度、中强度、高强度、超高强度,即[/font][font='times new roman']20℃[/font][font='times new roman']下在[/font][font='times new roman']1.5%[/font][font='times new roman']琼脂溶液中,凝胶强度在[/font][font='times new roman']150~400 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为低强度,在[/font][font='times new roman']401~800 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为中强度,在[/font][font='times new roman']801~1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为高强度,[/font][font='times new roman']1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为超高强度。[/font][font='times new roman'][size=18px]5 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]检测[/size][/font][font='times new roman']《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》中规定了琼脂的鉴别试验方法和多种理化指标及凝胶强度的测定方法,本文中简述规定中提到的鉴别试验、淀粉试验、水不溶物以及凝胶强度测定的实验方法[/font][font='times new roman'][size=13px][6] [/size][/font][font='times new roman'],其余理化指标的检测方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]鉴别试验[/size][/font][font='times new roman']取试样[/font][font='times new roman']1g[/font][font='times new roman'],加水[/font][font='times new roman']65mL[/font][font='times new roman'],煮沸[/font][font='times new roman']10min[/font][font='times new roman'],不断搅拌,用热水补足水分,放冷至[/font][font='times new roman']32℃[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']39℃[/font][font='times new roman']即凝结成半透明有弹性的凝胶状物,再加热至[/font][font='times new roman']85℃[/font][font='times new roman']开始熔化;再取适量条状试样的碎片,浸入[/font][font='times new roman']0.01mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液中数分钟,染成棕黑色,取出后加水浸泡后[/font][font='times new roman']渐变紫色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]淀粉试验[/size][/font][font='times new roman']取[/font][font='times new roman']0.5g[/font][font='times new roman']试样,加水[/font][font='times new roman']100mL[/font][font='times new roman'],煮沸溶解后放冷,加[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']滴[/font][font='times new roman']0.05mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液,不得显蓝色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]水不溶物的测定[/size][/font][font='times new roman']称取试样约[/font][font='times new roman'] 1.5g[/font][font='times new roman'](称准至[/font][font='times new roman'] 0.001g[/font][font='times new roman'])于[/font][font='times new roman'] 500mL [/font][font='times new roman']烧杯中,加水至[/font][font='times new roman'] 200mL[/font][font='times new roman'],盖上表面皿,加热煮沸溶解(加热时注意搅动)。趁热用已干燥恒重(前后两次质量之差不大于[/font][font='times new roman'] 0.001g [/font][font='times new roman']为恒重,冷却操作时需严格保持冷却时间的统一)的砂芯坩埚减压过滤,并用热水充分洗涤烧杯和砂芯坩埚,然后将砂芯坩埚于[/font][font='times new roman']105℃±2℃[/font][font='times new roman']电热干燥箱内烘至恒重。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶强度的测定[/size][/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman'].4.1 [/font][font='times new roman']凝胶强度测定的原理[/font][font='times new roman']将试样制成一定浓度和体积的凝胶,用凝胶强度仪测定凝胶在[/font][font='times new roman']15s[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']20s[/font][font='times new roman']内的抗破砝码质量,根据温度换算系数,计算样品凝胶强度。[/font][font='times new roman']5.4.2 [/font][font='times new roman']凝胶强度的测定方法[/font][font='times new roman']制备琼脂凝胶试样,将其放在凝胶强度测定仪的试样座中心位置上,按凝胶强度测定仪说明书进行操作,移动手柄使砝码添加装置杆下端与凝胶表面接触,加大力度使凝胶的表面发生破裂(端点进入凝胶约[/font][font='times new roman']4mm[/font][font='times new roman']以上),记录此时凝胶强度值,同时,测量凝胶的温度。[/font][font='times new roman'][size=18px]6 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]应用[/size][/font][font='times new roman']琼脂因其独特的物理化学性质,在食品、医药、微生物学、实验室应用等许多方面具有广泛的应用。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]食品[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝固性和稳定性,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛用于制造各种糖果、果冻、饮料、冷饮、焙烤制品、速食食品和保健食品、禽类和肉类食品、肉制品、酿造行业等等。[/font][font='times new roman']6.1.1 [/font][font='times new roman']糖果[/font][font='times new roman']在糖果生产中,琼脂作为胶凝剂,主要用于制造软糖。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂凝胶软糖是大众的产品,深受广大消费者的青睐,如无花果等水果琼脂软糖或果汁软糖,价廉物美、销量可观。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂主要依靠其凝胶特点制作软糖,具有含水量高、透明、柔软、有弹性、货架期长的特点。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']根据琼脂的凝胶能力[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']软糖中的琼脂用量一般在[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~2.5[/font][font='times new roman']%,碳水化合物以蔗糖为主,[/font][font='times new roman']淀粉糖浆为辅,其比例约为[/font][font='times new roman']3[/font][font='宋体']∶[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']。用琼脂制造的软糖的透明度、品质及口感均优于其它软糖。琼脂虽然作为传统的凝胶物质在糖果制作中长久应用,但实践表明其口感特性比较单一。近年来也常添加明胶、变性淀粉、果汁[/font][font='times new roman']/[/font][font='times new roman']果泥或瓜果等,有助于糖果配合物料组成的多样性,有利于风味与口感的改进。[/font][font='times new roman'][size=13px][2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]7][/size][/font][font='times new roman']6.1.2 [/font][font='times new roman']果冻[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']在果冻制造过程中添加琼脂,可为稳定剂和胶凝剂,使颗粒悬浮均匀、不沉淀、不分层。根据琼脂的胶凝能力,一般用量为[/font][font='times new roman'] 0.15[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.3[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.3 [/font][font='times new roman']饮料[/font][font='times new roman']琼脂用在饮料类产品中可作为助悬剂,使饮料中固型物悬浮均匀、不下沉。其悬浮时间及保质期长,是其它助悬剂无法代替的,产品透明度、流动性会更好、口感爽滑无异味。在果粒饮料中表现出优异的悬浮效果,使用浓度为[/font][font='times new roman']0.001[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.005[/font][font='times new roman']%即可使果粒悬浮均匀。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']6.1.4 [/font][font='times new roman']冷饮[/font][font='times new roman']琼脂用于冷饮食品,如冰棒、冰淇淋等各种冷冻制品,可减少冰晶,提高抗热融性,使产品更加爽口。在冰淇淋生产中,琼脂可改善冰淇淋的组织状态,提高冰淇淋的黏度和膨胀率,防止冰晶析出,使制品组织细腻轻滑,使用量为[/font][font='times new roman']0.3[/font][font='times new roman']%左右。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂与刺槐豆胶、[/font][font='times new roman']明胶相配合,在冷饮食品的质地和香味稳定性方面起到极优异的作用,并能防止脱水收缩和表面结皮。作为稳定剂的最佳浓度是:琼脂[/font][font='times new roman']0.12[/font][font='times new roman']%、刺槐豆胶[/font][font='times new roman']0.07[/font][font='times new roman']%、明胶[/font][font='times new roman']0.20[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px] [1][/size][/font][font='times new roman']6.1.5 [/font][font='times new roman']焙烤制品[/font][font='times new roman']琼脂可以作为一种略起粘结作用的添加剂,被广泛地用于多种焙烤食品中[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']如焙烤食品生产厂将琼脂用于曲奇饼、奶油夹心派的外壳、含果仁的果冻、馅饼或派的馅、糕饼甜心表层的酥皮、蛋白酥皮筒等。琼脂也可以作为保湿剂,也成功用于面包和糕饼甜心中防干燥。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂还可以作为填充剂和膨松剂,可代替淀粉制造麦片糊、无淀粉面包和餐后点[/font][font='times new roman']心,制作为低热能食品,同时对面包和饼干也起到了保湿、保险的作用。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']在上述这些类型的产品中,琼脂使用的量约在[/font][font='times new roman']0.1[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%的范围内。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']6.1.6 [/font][font='times new roman']速食食品和保健食品[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂素食食品和保健食品中也有重要应用,例如它可以添加用于谷类食品(如麦片)、肉食代用品(如人造肉、素肉等)和素食者食用的甜食与点心中。[/font][font='times new roman']6.1.7 [/font][font='times new roman']禽类和肉类罐头[/font][font='times new roman']在禽类和肉类罐头中,琼脂作为胶冻剂和赋形剂,其用量可以是罐头中清汤的[/font][font='times new roman']0.5[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']2.0[/font][font='times new roman']%,以消除罐头中食品组织发生脆碎。[/font][font='times new roman']6.1.8 [/font][font='times new roman']肉制品[/font][font='times new roman']琼脂作为肉制品的辅料,具[/font][font='times new roman']有提高肉制品的品质、保护其风味等特性。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']琼脂用于灌制香肠、熏制或腓制肉制品,可明显保护其胶体以防止其风味散失。烹调的火腿可浇盖含有琼脂和抗坏血酸的溶液,包装以后,琼脂处理过的肉制品比未处理的和只用抗坏血酸单独处理的肉制品更能保持原有的风味。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.9 [/font][font='times new roman']酿造行业[/font][font='times new roman']琼脂在酿造行业,作为啤酒、酱油和食用醋的澄清剂以加速和改善产品澄清。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]医药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以广泛地用作轻泻剂,在人体肠中不会被消化,在充分水化的情况下,如同纤维素一样,起到增大排泄物体积和促进肠道蠕动的作用,并且无刺激性和可以达到润肠的效果。在放射科中,琼脂常作为钡餐中硫酸钡的悬浮剂。琼脂常常在缓释胶囊药物栓塞药、外科润滑剂,以及许多乳剂类型的药物中用作为起多种功能的添加剂。在药片中,琼脂用作为赋形剂和崩解剂。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]微生物学[/size][/font][font='times new roman']琼脂在微生物学中获得了最有价值的应用。在低浓度下,琼脂即可阻止氧进入液体介质中,可以用于在暴露于空气中的营养肉汤进行厌氧菌的培养。在液体介质中使用的琼脂浓度通常在[/font][font='times new roman']0.007[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']0.08[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']在制作微生物的培养基的过程中,可以通过添加琼脂作为凝固剂来将[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B6%B2%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/8509492][font='times new roman']液体培养基[/font][/url][font='times new roman']转化为固体培养基或[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8D%8A%E5%9B%BA%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/3410252][font='times new roman']半固体培养基[/font][/url][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]实验室应用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以提高颗粒度测量的精确度,可以对包含有固体颗粒的悬浮液的浓度进行测定,亚甲基蓝、甲苯胺蓝、硫堇和频那氰醇等染料可以通过琼脂的作用而发生可逆的聚合。蛋白质可以通过琼脂凝胶作电泳迁移,用于铁蛋白、卵清蛋白、血红蛋白和胃蛋白酶的解析。琼脂钠和琼脂铵、琼脂糖和琼脂糖钠在球蛋白电泳、免疫扩散诊断技术、凝胶过滤和分子大小排阻色谱等技术中是很有应用价值的。琼脂还能稳定胆固醇溶液。[/font][font='times new roman'][size=18px]7 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]总结与展望[/size][/font][font='times new roman']琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖,具有特殊的理化性质,并因此在食品、医药、微生物、实验室等均有广泛的应用。据不完全统计,目前没有明确规定琼脂的最大使用量,适量使用即可。食品安全国家标准对琼脂的感官要求、理化指标和产品规格等均作出详细规定,并给出了与琼脂相关的检测方法。琼脂产业的发展[/font][font='times new roman']具有重要的经济效益、社会效益和生态效益,同时还直接或间接地成为构建海洋渔业生态链和海洋渔业产业经济链不可或少的纽带。随着琼脂在食品工业的广泛应用,必将具有广阔的市场前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']参考文献:[/font][font='times new roman'][[/font][font='times new roman']1] [/font][font='times new roman']琼脂[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']明胶科学与技术[/font][font='times new roman'],2005(03):123-130.[/font][font='times new roman'][2] [/font][font='times new roman']李琴梅[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']戚勃[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂的物化特性及其在食品工业中的应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国食品添加剂[/font][font='times new roman'],2009(06):170-174.[/font][font='times new roman'][3] [/font][font='times new roman']宋雪健[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']王洪江[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']张东杰[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂在食品中的应用研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2017(12):267-268+272.[/font][font='times new roman'][4] [/font][font='times new roman']林坤城[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂提取及深加工研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']福建农业科技[/font][font='times new roman'],2018(09):56-60.[/font][font='times new roman'][5] [/font][font='times new roman']缪伏荣[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']李忠荣[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼胶的降解及其产物的开发应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2007(02):125+128.[/font][font='times new roman'][6] GB 1975-2010, [/font][font='times new roman']食品安全国家标准 食品添加剂 琼脂[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']琼胶[/font][font='times new roman'])[s].[/s][/font][font='times new roman'][7] [/font][font='times new roman']朱肇阳[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']凝胶型糖果[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']第五部分[/font][font='times new roman']——[/font][font='times new roman']琼胶及琼胶软糖[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']食品工业[/font][font='times new roman'],1992(05):2-7.[/font]

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  • 固定化酶技术在中药酶抑制剂筛选中的研究现状
    中药资源丰富,历史悠久,在预防与治疗疾病中扮演着重要的角色。然而,中药的化学成分多种多样,作用机制更是复杂多样,如何从中药中筛选疾病相关药效物质是当前亟待解决的关键问题。大量研究表明,人体许多疾病过程都与体内生物酶调节作用相关,如痛风[1]、阿尔茨海默症[2]、糖尿病[3-5]等。而且,中药在治疗各种疾病中也扮演着重要角色,如白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高自发2型糖尿病小鼠创面愈合速率和质量[6];绞股蓝叶水提物能够降低链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的血糖,其作用机制可能与增加骨骼肌肌膜葡萄糖转运体4蛋白表达和抑制骨骼肌炎症有关[7]。因此,基于酶在疾病发生发展的重要性,以酶为靶点从中药中筛选新药是一有力途径,而且开发一种快速、高效的酶抑制剂筛选方法是当前首要任务。固定化酶技术是20世纪60年代发展起来的,该技术利用物理或化学方法将游离酶固定在相应的载体上用于筛选酶抑制剂。固定化酶技术可以有效提高酶的催化性能和操作稳定性,并降低成本,是目前广泛使用的技术[8]。此外,相比于游离酶,固定酶更有利于酶-配合物的分离纯化,在pH耐受性,底物选择性,热稳定性和可回收性等方面表现出优越的性能[9-10]。不同的酶发挥催化作用的活性部位不同,将酶进行固定时,要使载体材料与酶的非活性部位结合,才可以保留酶的活性,因此载体材料的选择是固定化酶技术发挥作用的关键。本文以固定载体材料(表1)为分类综述了近10年固定化酶技术在中药酶抑制剂[α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,α-Glu)、脂肪酶等] 筛选中的研究现状,希望可以为后续的相关研究提供一定的参考依据。1 磁性载体磁性载体材料是利用铁、锰、钴及其氧化物等化合物制备的一类具有磁性的材料[11],通过改变磁力大小和外部磁场的方向来改变粒子的运动轨迹,从而使酶与载体的结合与分离可以在可控条件下完成,便于固定化酶的分离和收集,并用于酶抑制剂的筛选[12]。以磁性载体为材料的固定化酶技术的最大优点在于利用磁力吸引可使固定化酶快速从反应体系中分离,且固定化方法简单,能有效减少筛选时间及实验试剂的消耗。因此,通过不同方法对磁性载体材料进行功能化修饰,在充分发挥磁性材料优势的基础上改善其表面性质,提高对不同类型目标物的特异性,从而在各类复杂样品的前处理过程中有着良好的应用潜力[13]。目前,磁珠是近年来发展起来的一种常用的磁性载体材料,也叫做磁性纳米粒子,包括氧化铁(Fe3O4和γFe2O3)、合金(CoPt3和FePt)等。其中,Fe3O4纳米粒子具有生物相容性和无毒性等优点,被广泛应用于酶的固定化。中药酶抑制剂筛选中的常用磁珠其磁核以Fe3O4纳米粒子为主,壳层为二氧化硅、琼脂糖、葡聚糖等,是具有超顺磁性的小球形磁性粒子[14-15],可借助外部磁场从生物催化体系中分离酶抑制剂。该方法机械稳定性高、孔隙率低,利于降低反应中的传质阻力,提高了固定化酶的重复使用性。由于其具有操作稳定性高、磁响应强、磁分离速度快等优点,在生物和药物研究中得到了广泛的应用[16]。在进行酶抑制剂筛选时,磁珠的修饰位置不同,所固定的位点也不同。因此,在实验中,往往要根据靶蛋白的分子结构选择合适的磁珠或将某一磁珠进行修饰后作为固定载体。将酶固定在合适的磁珠上会增强酶与待筛选酶抑制剂的亲和力,利用磁力将固定化酶及其抑制剂从提取液中分离,然后洗去与酶不相互作用的化合物,随后可得到酶固定化磁珠配体配合物,最后通过洗脱溶剂使配体释放进而通过质谱表征[17]。在这种方法中,潜在的配体与酶相互作用,生成酶配体配合物,这有利于利用磁性[18-23]从复杂混合物中分离活性化合物。在酶抑制剂的筛选中,磁性载体材料是最常用的固定化载体材料[24-30]。1.1 无机载体材料二氧化硅是磁性纳米粒子表面修饰最常用的无机材料[23,31-34],此外还有二氧化钛[35]、介孔二氧化硅[16]等。Li等[23]首先将Fe3O4分散在水中加入聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)室温搅拌得到产物。然后在超声作用下将产物分散在含有异丙醇和氨水的混合溶剂中,室温搅拌下缓慢加入正硅酸乙酯(tetraethylorthosilicate,TEOS)溶液得到SiO2@Fe3O4磁性微球,并加入3-氨丙基三甲氧基硅烷(3-aminopropyltrimethoxysilane,ATPES)对其表面进行改性。最后将α-淀粉酶固定在表面改性的SiO2@Fe3O4磁性微球上。将制得的酶固定化磁性微球用于黄花草中α-淀粉酶抑制剂的筛选,最终得到3种黄酮类化合物对α-淀粉酶具有较好抑制作用。Liu等[35]采用溶剂热法(也称水热法或水热合成法)制备了Fe3O4@TiO2纳米粒子,并通过静电相互作用固定脂肪酶。采用透射电镜、傅里叶变换红外光谱和X射线衍射等方法对磁性纳米粒子进行表征,以确定脂肪酶是否已经被固定。研究中应用脂肪酶固定化Fe3O4@TiO2纳米粒子从6种具有脂肪酶抑制活性的藏药中筛选出脂肪酶抑制剂,获得5种具有与临床常用减肥药物奥利司他活性类似的化合物,其中1种化合物(山柰酚)的抑制活性优于奥利司他。Yi等[16]将谷胱甘肽S-转移酶固定在介孔二氧化硅磁性微球表面筛选紫苏中的酶抑制剂,利用高效液相色谱和四极飞行时间质谱法进行鉴定,筛选出6种具有谷胱甘肽S-转移酶抑制作用的物质,其中,迷迭香酸、(−)表没食子儿茶素-3-没食子酸酯和 (−)-表儿茶素-3-没食子酸酯具有较好的抑制活性。最后利用分子对接技术确定潜在抑制剂与谷胱甘肽S-转移酶的结合方式。首先,用FeCl3与柠檬酸三钠和乙酸钠合成Fe3O4,然后将其分散在含有乙醇、去离子水和氨水的混合溶液中,搅拌均匀后加入TEOS制得SiO2@Fe3O4磁性微球。为进一步合成介孔二氧化硅磁性微球(mSiO2@SiO2@Fe3O4),将SiO2@Fe3O4磁性微球分散在十六烷基三甲基氯化铵、去离子水和三乙醇胺中并滴加TEOS,产物用磁铁分离并清洗除杂后得mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球。最后用PDA对mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球进行表面改性并将谷胱甘肽S-转移酶固定在其表面。1.2 有机载体材料在酶抑制剂的筛选中,有机载体材料相比于无机载体材料应用较少。目前,用于磁性纳米粒子表面修饰的有机载体材料有聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)[36]、共轭-有机骨架[37]和金属-有机骨架[38]等。Jiang等[36]以PAMAM包覆磁性微球为基础,建立了一种筛选和鉴定赤芍提取物中α-Glu抑制剂的方法。首先,采用微修饰法合成了Fe3O4-COOH微球。然后,通过Fe3O4-COOH微球表面羧基与PAMAM氨基的偶联反应,制备了Fe3O4@PAMAM微球。最后,通过GA的交联,成功地将α-Glu连接到其表面。结果表明,没食子酸和(+)-儿茶素对α-Glu均具有较好抑制作用。Zhao等[37]将乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)固定在适配体功能化磁性纳米颗粒共轭有机骨架上构建固定化酶反应器,并将该方法用于酒石酸、(−)-石杉碱A、多奈哌齐和小檗碱4种AchE抑制剂抑制活性的测定,发现酒石酸的IC50与已报道的结果相当,证明了该固定化酶反应器的可行性。Wu等[38]将α-Glu固定在磁性纳米材料Fe3O4@ZIF-67上,构建了快速筛选α-Glu抑制剂的生物微反应器。然后,将酶生物微反应器通过外加磁场固定在连接高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)和微注射泵2端的管中,形成一个磁性在线筛选系统。以信阳毛尖粗茶提取物为实验对象,对该在线筛选方法进行验证,利用该在线筛选系统筛选出3种抑制剂(儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表没食子酸酯)。与传统方法相比,该方法可将筛选、洗脱和分析结合起来,可以简单、高效、直接地从天然来源筛选和鉴定潜在的α-Glu抑制剂。磁珠分散性好,磁分离速度快,酶结合量大,酶活性高,是固定化酶的理想载体,现已广泛应用于酶抑制剂的筛选中。将酶固定在特定的磁珠上,可实现酶抑制剂的分离。此方法操作较稳定,非特异性结合率低。因此,酶固定化磁珠技术因其快速的生物分析、导向性分离和从复杂混合物中直接捕获配体而受到越来越多的关注。2 非磁性载体2.1 无机载体材料2.1.1 石英毛细管 毛细管电泳(capillary electrophoresis
  • 宁夏疾控中心采购大批食品安全监测耗材
    2013年1月31日,中国政府采购网公布了宁夏回族自治区疾病预防控制中心2013年食品安全风险监测试剂耗材采购项目招标公告,此次采购包括微生物培养基、化学试剂及玻璃器皿、生化诊断试剂、仪器配件及专用耗材等,详情如下所示:   一、委托编号:2013NCZ0037 招标编号:HSZB-2013ZC004   二、采购方式:公开招标   三、采 购 人:宁夏回族自治区疾病预防控制中心   联 系 人:李 银 联系电话:0951-4085393   四、招标代理机构:宁夏恒盛招标有限公司   联 系 人:李 慧   电 话:0951- 5031788 传 真:0951-5058301   电子邮箱: nx.hs@163.com   地 址:银川市国际贸易中心C栋12楼008室   户 名:宁夏恒盛招标有限公司   开 户 行:银川市农行开发区支行   账 号:140001040016999   五、评标办法:最低评标价法   六、采购内容简述:   一标段: 微生物培养基 序号 名称 规格 总数 单位 1 平板计数琼脂 250g/瓶 5 瓶 2 LST肉汤 250g/瓶 4 瓶 3 BGLB肉汤 250g/瓶 2 瓶 4 EC肉汤 250g/瓶 2 瓶 5 EMB琼脂 250g/瓶 3 瓶 6 致病性大肠埃希氏菌诊断血清 18瓶/套 2 套 7 产肠毒性大肠埃希氏菌诊断血清 10瓶/盒 2 盒 8 肠侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清 11瓶/盒 2 盒 9 出血性大肠杆菌O157诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 10 出血性大肠杆菌O157:H7诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 11 CN琼脂 250g/瓶 3 瓶 12 CN琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 13 金氏B培养基 250g/瓶 2 瓶 14 乙酰胺肉汤 100g/瓶 2 瓶 15 钠氏试剂 5mL/支×2 2 盒 16 Api 20NE生化条(带配套盐水及试剂) 25条/盒 5 盒 17 BPW 250g/瓶 3 瓶 18 SC增菌液 100g/瓶 2 瓶 19 TTB培养基基础 250g/瓶 2 瓶 20 碘液 20支/盒 3 盒 21 0.1%煌绿 20支/盒 3 盒 22 沙门氏菌显色培养基 1000mL/瓶 5 瓶 23 TSI琼脂 250g/瓶 1 瓶 24 MIU培养基 20支/盒 6 盒 25 靛基质试剂 10mL/瓶 3 瓶 26 软琼脂 250g/瓶 2 瓶 27 Api 20E生化条(带盐水) 25条/盒 15 盒 28 Api 20E配套试剂 7支/套 2 套 29 氧化酶 瓶 2 瓶 30 矿物油 125mL/瓶 2 瓶 31 沙门氏菌A-F多价诊断血清 1mL/瓶 3 瓶 32 沙门氏菌诊断学清 60种/套 2 套 33 志贺氏菌增菌肉汤 250g/瓶 4 瓶 34 志贺氏菌增菌肉汤配套试剂 10支/盒 6 盒 35 志贺氏菌显色琼脂 1000mL/瓶 5 瓶 36 XLD琼脂 250g/瓶 1 瓶 37 克氏双糖琼脂 250g/瓶 3 瓶 38 志贺氏菌属四种多价血清 1mL/支 3 支 39 志贺氏菌属福氏多价血清 1mL/支 3 支 40 志贺氏菌属诊断血清 50种/套 2 套 41 7.5%氯化钠肉汤 250g/瓶 5 瓶 42 Baird-parker基础 500g/瓶 2 瓶 43 脑心浸液500g/瓶 1 瓶 44 冻干血浆 12瓶/盒 3 盒 45 金葡显色培养基 500mL/瓶 3 瓶 46 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶 6 瓶 47 Baird-parker基础 250g/瓶 1 瓶 48 亚蹄酸盐卵黄增菌液 100mL×6瓶/盒 2 盒 49 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤 250g/瓶 4 瓶 50 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤配套试剂 10000IU×10支/盒 3 盒51 MYP琼脂基础 250g/瓶 2 瓶 52 MYP琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 53 50%卵黄乳液 5mL/支×10 6 盒 54 蜡样芽胞杆菌显色琼脂 1000mL/瓶 3 瓶 55 酪蛋白琼脂 100g/瓶 2 瓶 56 蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒 10次/盒 6 盒 57 Api CHB生化条(带培养基及配套试剂)(进口) 10条/盒 6 盒 58 磷酸盐缓冲液 250g/瓶 1 瓶 59 大肠杆菌IMVC生化鉴定盒 10次/盒 3 盒 60 BPW 250g/瓶 3 瓶 61 mLST-Vm基础 250g/瓶 2 瓶 62 mLST-Vm配套试剂 5支/盒 3 盒 63 阪崎显色培养基 1000mL/瓶 3 瓶 64 LB基础 250g/瓶 2 瓶 65 LB1配套试剂 10支/盒 5 盒 66 LB2配套试剂 10支/盒 2 盒 67 单增李斯特菌显色平板 20块/盒 6 盒 68 SIM琼脂 250g/瓶 2 瓶 69 半固体琼脂 250g/瓶 2 瓶 70 Api Listeria生化条(进口) 10条/盒 10 盒 71 木糖生化管 20支/盒 3 盒 72 鼠李糖生化管 20支/盒 3 盒 73 Phoenix阳性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 74 Phoenix阴性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 75 Phoenix鉴定培养液(进口) 100支/盒 2 盒 76 一次性血平板 20块/盒 10 盒 77 百日咳诊断血清 1mL/瓶 1 瓶 78 脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清 11瓶/套 1 套 79 脑膜炎奈瑟氏菌乳胶凝剂试剂盒 25人份/盒 1 盒 80 DR585链球菌分型试剂盒 盒 1 盒 81 亚碲酸钾培养基 500g/瓶 1 瓶 82 3.5%亚碲酸钾溶液 10瓶/盒 1 盒 83 裂解马血 10瓶/盒 1 盒 84 炭琼脂 500g/瓶 1 瓶 85 炭琼脂培养基添加剂 10瓶/盒 1 盒 86 Api NH生化鉴定条(带配套盐水及试剂)(进口) 10条/盒 1 盒 87 Api Staph(带配套试剂)(进口) 25条/盒 1 盒 88 Api 20 Strep(带配套试剂)(进口) 25条/盒 1 盒 89 Api Coryne生化鉴定试剂条(带配套试剂)(进口) 12条/盒 1 盒 90 O157胶体金测试条 10条/包 3 包 91 国产霍乱弧菌O1群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 92 国产霍乱弧菌O139群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 93 肉毒毒素诊断血清 7支/盒 4 盒 94 A型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 95 B型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 96 C型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 97 沙门氏菌抗原快速检测试剂 10条/包 5 包 98 革兰氏染液 套 2 套 99 细菌双向血培养瓶 12瓶/箱 8 箱 100 大肠杆菌 8099 2 株 101 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 2 株 102 铜绿假单胞菌 ATCC 15442 2 株 103 白色念珠菌 ATCC 10231 2 株 104 枯草杆菌黑色变种芽孢 ATCC 9372 2 株 105 藤黄微球菌 CMCC(B)28001 1 株 106 生孢梭菌 CMCC(B)64941 1 株 107 白色念珠菌 CMCC(F)98001 1 株 108 药敏检测试剂盒 12种/盒 50 盒 109 药敏板 套 150 套   第二标段: 化学试剂及玻璃器皿 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 丙酮 500ml/瓶 10 瓶 2 三氯甲烷 500ml/瓶 15 瓶 3 无水乙醇 500ml/瓶 20 瓶 4 三氯醋酸 500g 2 瓶 5 蒽酮 25g 1 瓶 6 硫脲 500g 1 瓶 7 CuSO4 25g 1 瓶 8 NaF 500g 1 瓶 9 钨酸钠 500g 1 瓶 10 对羟基联苯 100g 1 瓶 11 乳酸锂 5g 1 瓶 12 乳酸钙 500g 1 瓶 13 硝酸 500mL 20 瓶 14 硝酸 2500mL 8 瓶 15 抗坏血酸 100g 10 瓶 16 硝酸镁,六水 50g 2 瓶 17 氧化镧 500g 1 瓶 18 甲醇 4L 10 瓶 19 乙腈 4L/瓶 8 瓶 20 正己烷 4L 6 瓶 21 氯化钠 500g 20 瓶 22 无水硫酸钠 500g 20 瓶 23 乙酸乙酯 4L 4 瓶 24 丙酮 4L 4 瓶 25 二氯甲烷 4L 2 瓶 26 磷酸 500mL/瓶 3 瓶 27 硫酸铈铵 25g/瓶 10 瓶 28 次氯酸钠 500mL/瓶 5 瓶 29 环己烷 500mL/瓶 5 瓶 30 三氟乙酸 500mL/瓶 2 瓶 31 Hydrolysis Reagent C47TM CB130(氧化剂) 4×950mL/包 3 包 32 o-Phthalaldehyde DiluentCB910(OPA稀释剂) 4×951mL/包 3 包 33 巯基乙醇 10g 1 瓶 34 邻苯二甲醛OPA 5g 1 瓶 35 2-硝基苯甲醛2-Nitrobenzaldehyde 25g/瓶 1 瓶 36 二甲基亚砜 500ml/瓶 1 瓶 37 甲酸Formic acid 100mL/瓶 1 瓶 38 β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶β-Glucuronidase/sulfatase 5ml,100000单位/mg 3 瓶 39 蛋白酶 100mg 1 瓶 40 高氏淀粉酶 500g 1 瓶 41 β-葡萄糖苷酶/硫酸酯酶 2mL 3 瓶 42 正丙醇 500mL/瓶 1 瓶 43 盐酸羟胺 100g/瓶 2 瓶 44 对甲苯磺酸 101g/瓶 2 瓶 45 乙酸铵 500g 2 瓶 46 石油醚 500ml/瓶 5 瓶 47 乙二胺 500ml/瓶 2 瓶 48 氢氧化钾 500g 4 瓶 49 冰醋酸 500ml/瓶 10 瓶 50 无水乙醇 500mL/瓶 12 瓶51 95%乙醇 500mL/瓶 10 瓶 52 甲基叔丁基醚 500ml/瓶 5 瓶 53 对氨基苯磺酰胺 50g 2 瓶 54 盐酸N-(1-萘)-乙二胺 25g 2 瓶 55 二苯碳酰二肼 25g 2 瓶 56 异烟酸 25g 2 瓶 57 砒唑酮 25g 2 瓶 58 N-二甲基甲酰胺 25g 2 瓶 59 氯胺T 25g 2 瓶 60 安替比林 50g 2 瓶 61 4-氨基安替比林 50g 2 瓶 62 碘化钾晶体 50g 1 瓶 63 次氯酸钠 500ml 2 瓶 64 36%过氧化氢 500ml 2 瓶 65 冰醋酸 500m110 瓶 66 碘化钾 250g 1 瓶 67 无水磷酸氢二钠 500g 1 瓶 68 无水磷酸氢二钾 500g 1 瓶 69 乙二胺四乙酸二钠 250g 1 瓶 70 盐酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 71 硫酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 72 无氯纯水 1000ml 1 瓶 73 亚砷酸钾 1 瓶 74 硫代乙酰铵 250g 1 瓶 75 氯胺T 500g 1 瓶 76 吡啶 500ml 1 瓶 77 巴比妥酸 250g 2 瓶 78 一水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 79 二水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 80 二乙酰一肟 25g 2 瓶 81 二硫化碳 500mL 1 瓶 82 氯化钾 250g 1 瓶 83 20-30目沙子 500g 2 瓶 84 盐酸 500m1 2 瓶 85 三氧化铬 100g 2 瓶 86 对氨基苯磺酸 100g 2 瓶 87 硫酸 500m1 2 瓶 88 氯化汞 500g 3 瓶 89 碘化钾 500g 2 瓶 90 氢氧化钠 500g 3 瓶 91 磷酸 500m1 2 瓶 92 甲醛 501ml 2 瓶 93 环已二胺四乙酸 100g 2 瓶 94 氨基磺酸 100g 2 瓶 95 盐酸副玫瑰苯胺 100g 2 瓶 96 邻苯二甲酸氢钾 500g 2 瓶 97 亚砷酸钠 500g 2 瓶 98 可溶性淀粉 500g 2 瓶 99 硝酸银 250g 2 瓶 100 碳酸铵 500g 2 瓶 101 丙酮 500m1 4 瓶 102 乙酸 500m1 2 瓶103 磷酸二氢钾 500g 2 瓶 104 磷酸氢二钠 500g 2 瓶 105 异烟酸 100g 2 瓶 106 硫氰酸汞 500g 2 瓶 107 乙醇 500m1 2 瓶 108 硫酸铁铵 100g 2 瓶 109 氨水 500m1 2 瓶 110 丙三醇 500m1 2 瓶 111 溴甲酚绿 100g 2 瓶 112 柠檬酸三钠 500g 2 瓶 113 氯化钠 500g 2 瓶 1 比色管 100ml 100 只 2 比色管 25mL 50 只 3 容量瓶 10mL 30 支 4 具塞锥形瓶 250ml 60 支 5分液漏斗 1L 5 支 6 分液漏斗 250mL 30 支 7 玻璃吸管glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 1 盒 8 容量瓶 100mL,5个/盒 4 盒 9 具塞玻璃刻度试管 10mL 300 个 10 具塞玻璃刻度离心管 25mL 200 个 11 玻璃吸管(尖头)glass pasteur pipettes 150mm,250支/盒 5 盒 12 玻璃吸管(尖头)glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 4 盒 13 棕色磨口具塞试剂瓶 500mL 200 个 14 量筒 100mL 5 个 15 棕色容量瓶 100ml 20 个 16 250mL具塞锥形瓶 250mL 30 个 17 圆底烧瓶 100mL 30 个 18 10mL具塞玻璃刻度试管试管架   5 个 19 25mL具塞玻璃刻度离心管试管架   5 个 20 石油醚 500mL 2 瓶 21 定量滤纸 内径12.5 20 盒 22 定量滤纸 内径15 20 盒 23 定量滤纸 内径18 20 盒 24 定性滤纸 内径12.5 20 盒 25 定性滤纸 内径15 20 盒 26 定性滤纸 内径6cm 10 盒 27 定性滤纸 内径18 20盒 28 橡胶手套 中 10 双 29 橡皮塞子 1号-10号 各10 只 30 多孔玻板吸收管 棕色 10 个 31 多孔玻板吸收管 白色 10 个 32 大炮吸收管 白色 30 个 33 具塞比色管 10m1 30 个 34 量筒 20ml 5 个 35 量筒 50ml 3 个 36 量筒 250mL 3 个 37 量筒 500mL 3 个 38 量筒 1000mL 5 个 39 烧杯 25mL 20 个 40 烧杯 50mL 20 个 41 烧杯 100mL 20 个 42 烧杯 100mL 20 个 43 烧杯 1000mL 15 个 44 烧杯 3000ml 20 个 45 烧杯 2000ml 20 个 46 吸管 1mL 20 个 47 吸管 2mL 20 个 48 吸管 5mL 20 个 49 吸管 10mL 20 个 50 移液管 1mL 20 个 51 移液管 2mL 20 个 52 移液管 5mL 20 个 53 移液管 10mL 20 个 54 温度计 360° 10 个 55 大口瓶 2500mL 10 个 56 比色管(具塞) 10ml 20 个 57 棕色容量瓶 50ml 20 个 58 塑料量筒 250ml 2 个 59 标本缸(圆筒型) 高20cmX直径25cm 10 个 60 标本缸 10 个   第三标段: 生化诊断试剂 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 流行性出血热IgG抗体检测试剂盒 96人份/盒 8 盒 2 流行性出血热抗体检测试剂盒(胶体金法) 20人份/盒 2 盒 3 出血热荧光抗体(直接法) 15 ml 4 流行性出血热IgM抗体检测试剂盒 96人份/盒 2 盒 5 登革热IgM抗体检测试剂盒(进口) 96人份/盒 1 盒 6 狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒 20人份/盒 4 盒 7 乙脑IgM抗体检测试剂盒 48人份/盒 2 盒 8 呼吸道病毒15联RT-PCR检测试剂盒(进口) 50人份/盒 1 盒 9 BED新发感染检测试剂盒(进口) 192人份/盒 4 盒 10 丙肝病毒抗体检测试剂盒(酶免法) 48人份/盒 1 盒 11 梅毒螺旋体抗体试剂盒(ELISA) 48人份/盒 1 盒 12 梅毒螺旋体抗体试剂盒(TPPA) 100T/盒 1 盒 13 乙肝表面抗原检测试剂盒(酶免法) 48人份/盒 1 盒 14 风疹IgM抗体检测试剂盒 48人份/盒 20 盒 15 麻疹IgM抗体检测试剂盒 48人份/盒 20 盒 16 麻疹IgM抗体检测试剂盒 96人份/盒 2 盒 17 乙肝DNA检测试剂盒 20人份/盒 1 盒 18 布病IgM ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 19 布病IgG ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 20 甲肝病毒IgM抗体检测试剂盒(酶免法) 96人份/盒 200 盒 21 戊肝病毒IgM抗体检测试剂盒(酶免法) 96人份/盒 200 盒 22 麻疹荧光PCR检测试剂盒 规格:48T/盒 9 盒 23 风疹荧光PCR检测试剂盒 规格:48T/盒 5 盒   第四标段: 仪器配件及专用耗材 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 25mL EPA样品瓶 140×27.5mm,100个/包 1 包 2 色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3(进口) 1.8um 2.1mm*50mm 1 根 3 水相针式滤器 100只/包 4 包 4 水相针式滤器 100只/包 4 包 5 有机相针式滤器 100只/包 4 包 6 有机相针式滤器 100只/包 8 包 7 样品瓶存放盒   2 只 8 Ag-H离子交换树脂柱(进口) 2.5cc,48个/包 2 包 9 玻璃纤维滤纸GF/C 47mm,1.2µ m,100张/盒 5 盒 10 玻璃纤维滤纸GF/C 110mm,1.5µ m,100张/盒 3 盒 11 PriboFast玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25/包 5 包 12 黄曲霉毒素B1B2G1G2M1免疫亲和柱(进口) 25/包 6 包   黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 25/包 8 包 13 固相萃取小柱(中性氧化铝) 30/包 1g/6mL 10 包 14 Oasis MAX固相萃取柱(进口) 6cc/150mg,30/包 5 包 15 Oasis HLB固相萃取柱(进口) 200mg/6cc, 30/盒 5 盒 16 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc,30/盒 5 盒 17 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 60mg/3cc, 100/盒 5 盒 18 Oasis WCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 19 Oasis WAX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 20 塑料巴斯德吸管 2ml 1000/盒 3 盒 21 MycoSep 230-雪腐镰刀菌烯醇多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 22 PriboFast 226-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 23 PriboFast 200-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 24 DONStar R呕吐毒素免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 25 ZearaStar玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 26 SupelMIP® 固相萃取 — 氯霉素 25 mg/10 mL , (LRC), pk of 50 4 盒 27 SILICA/PSA混合玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL,10个/盒 30 盒 28 Florisil玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL,10个/盒 30 盒 29 PSA玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL,30个/盒 30盒 30 LC-Si固相萃取柱 200mg,3mL,30个/包 3 包 31 LiChrolut EN固相萃取柱 200mg,3mL,30个/包 3 包 32 50uL微量进样针 50μL 4 支 33 封口膜   2 卷 34 PTFE针头过滤器 0.22um,13mm,100/pk 10 包 35 BEH-C18色谱柱(进口) 150mm*d2.1mm,1.7um 2 根 36 R95口罩 (20个/盒)防酸碱 4 盒 37 R95口罩 (20个/盒)防有机 4 盒 38 sunfire-C18色谱柱(进口) 150mm*2.1mm,5um 2 根 39 氨基甲酸酯分析柱(进口) 150mm*3.9mm 1 根 40 氨基甲酸酯Sentry保护柱芯(进口) 2个/包 1 包 41 Sentry保护柱套(进口)   1 个 42 PAH C18 分析柱(进口) 250mm*4.6mm,5um 1 根 43 PROTEIN-Pak sp阳离子交换色谱柱(进口) 10mm*100mm,8um 1 根 44 无尘抽纸 200抽/盒 20 盒 45 塑料容量瓶 25mL, 5个/盒 36 盒 46 塑料容量瓶 50mL, 5个/盒 36 盒 47 塑料容量瓶 100mL, 5个/盒 36 盒 48 塑料刻度吸管 2mL 60 支 49 塑料刻度吸管 5mL 60 支 50 塑料刻度吸管 10mL 60 支 51 O型环(进口) 10/包 3 包 52 分流用玻璃衬管(进口) 5个/包 3 包 53 毛细管用压环 (进口) 10/包 3 包 54 惰性处理石英棉(进口) 3g/包 1 包 55 进样针(进口) 10uL 3 支 56 氟离子选择电极   2 支 57 甘汞电极   2 支 58 硅胶管(溶剂解吸型) 6*120mm 5 支 59 硅胶管(溶剂解吸型)

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