小鼠胚胎成纤维细胞

[ 产品简介 ]蔡司全自动活细胞成像平台Celldiscoverer 7 ，是一个高度集成的研究及成像系统，将操作简便的自动化箱式显微镜与研究级倒置显微镜的成像质量和灵活性相结合，在调节光学元件的同时可进行自动校正、检测和聚焦样品。无论是对细胞培养、组织切片，或是小的模式生物体进行 2D 或 3D分析，都能通过这个可靠的自动化活细胞成像平台在更短的时间内采集更多的数据。自动校准程序确保可重复的结果。[ 产品特点 ]&bull 灵活的全自动显微镜&bull 自动校准、自动聚焦样品，提供可重复实验结果&bull 适配不同厚度、材质培养皿&bull 独特的暗室和箱式结构，自动加水装置，长时间稳定培养活细胞&bull 可扩展性强[ 应用领域 ]&bull 细胞生物学，细胞器运动&bull 药理学，药物筛选&bull 模式生物，机体精细结构动态观察&bull 发育生物学，胚胎发育长时间观察&bull 基因/遗传学，荧光蛋白动态过程等生命科学领域研究HeLa Kyoto 细胞表达 H2B-mCherry Tubulin eGFP（Neumann et al., Nature 2010 Apr.1. 464(7289):721-7），每 15 分钟拍摄一次，连续拍摄 72 小时，使用自动加水 （Autoimmersion）功能；绿色（eGFP）单通道、红色（mCherry）荧光，phase-gradient-contrast（PGC，梯度相衬成像），以及三通道的叠加图像。样本由德国海德堡 EMBL 化学生物中心实验室的 I. Charapitsa 提供使用 Celldiscoverer 7 对 348 孔板培养的细胞进行高通量扫描。SH-SY5Y 细胞，Plan-Apo 5x/0.25 物镜搭配 0.5x 变倍体（相当于 2.5x/0.12 物镜）进 行大视野高分辨扫描。高效率成像，每孔一次性成像，无需拼图。成像分辨率高，放大图像可清晰分辨单个细胞。样品由德国波恩神经退行性疾 病中心核心研究实验室 P.Denner 提供。小鼠脑膨胀显微成像，上图：全脑，左下图：轴突束，右下图：锥体细胞。样品置于底部厚度为 1.2 mm 聚苯乙烯上， 使用 2.5× 物镜拍摄 Z 轴序列的景深扩展图 像。染色：YFP 表达神经元。样品由美国麻省理工学院 Boyden 实验室的 S. Asano 提供。用 mitotracker 红色（线粒体）和 DNA 标记（细胞核）的原代肺成纤维细胞，利用共聚焦荧光通道和相机梯度衬度通道混合成像。样品由德国柏林夏里特医院的 A.C. Hocke 提供。

BLS产品中国总代理,任何其他公司在中国销售该品牌的任何产品都须经过香港友诚生物科技有限公司许可并授权欧盟生物实验室设备与维护集团（BiologicalLaboratoryEquipment,MaintenanceandServiceLtd.简称：BLS）,BLS公司是欧洲一家专业生产电融合设备的厂家，尤其在胚胎干细胞的电融合上面更具有全球独一无二的技术。BLS产品的用户遍布全球，用我们的设备发表的文章每年多达数百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等专业杂志上经常可以见到BLS矫健的身影。其提供的大量文献与PROTOCOL给用户的科研工作带来极大的方便。核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体安全出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。IanWilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆——多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPLTherapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。细胞融合仪CF-150B胚胎细胞融合仪和相关电极槽(GSS-250)专为哺乳动物胚胎分裂球电融合而设计，可在电解液或非电解液中运用。一个适当导向的短电脉冲施加在早期胚胎可以溶解细胞膜，从而完成细胞质和细胞核融合。此仪器的主要应用是产生小鼠四倍体胚胎产生和体细胞核转移克隆。标准的双细胞分裂期胚胎能够迅速地融入单个细胞（单细胞分裂期四倍体胚胎）。这种四倍体胚胎可用于与遗传控制小鼠胚胎干细胞（ES）聚合，从而产生完全的ES衍生细胞胎儿(Nagyetal.,1990 NagyandRossant 1993).随着ES细胞遗传控制技术的发展，ES衍生细胞胚胎有了更广阔的应用空间：1 　应用于测试新衍生的或遗传控制的胚胎干细胞的发育潜能(Nagy et al., 1993).2　 完全ES衍生细胞胎儿为不同功能或遗传研究提供丰富的组织和器官前身资源(Forrester et al. 1991).3　最近，gene-trap战略用于完全衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍体细胞胚胎产生，从而获取基因表达模式的直接信息CF-150B细胞融合仪和专业设计的高精度电极槽一起使用。槽有三种不同的缝间隙，250μm,500μm和1000μm，型号名分别为GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做双细胞期分裂球融合时，任何一种槽均可使用。如果用于克隆目的，我们推荐GSS-250。电极材料是高品质不锈钢的，并将其安置在一种厚玻璃中。所有这些材料具有生物安全性，无毒。CF-150B细胞融合仪和专业设计的电极夹GSH-1一起使用．此“快速夹”设计使得电极牢固夹在组织培养板（或其盖上）。在融合过程中绝对不会有偶然的滑动，并且给电极线提供了永久的良好接触。电极夹可用于三种里任何一种电极GSS-250,GSS-500orGSS-1000。CF-150B细胞融合仪和新型设计的聚合针DN-10一起使用．在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES细胞块以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，这些针头更符合人体动力学，在使用中减少手指和手的压力。CF-150B细胞融合仪和聚合针头DN-09一起使用．聚合针DN-09是最初设计的聚合针头，在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干细胞以及移植早期的鼠胚胎。如果所有参数都选择最佳(完全按照BLS的protocol)，融合率将高于90%，胚胎在融合过程中死亡率低于10%，并且24小时内至少80%成功融合的胚胎将成长为健康的四细胞期胚胎。

美国著名BTX是专业的细胞融合、多功能细胞电穿孔仪 的生产厂家。自从1983年起，苛求的科研工作者就已经把BTX多功能细胞电穿孔仪作为电融合、电穿孔等应用领域的首选仪器。ECM多功能细胞电穿孔仪在转基因的应用领域中得以广泛的应用，其无以伦比的高性能得到了全球同行的厚爱。BTX的多功能细胞电穿孔仪系列产品适用于动植物、细菌、酵母、哺乳动物、人类细胞（包括活体细胞）的转基因等操作，BTX还在网站建立了技术数据库，提供超过5000份的参考目录和600多份的protocols供科研工作者免费查阅。多功能细胞电穿孔仪应用举例&bull 动物细胞转染（系统：ECM630/830）对真核细胞的转染可以通过多种方法获得，例如磷酸钙沉淀、脂质体转染、病毒方法以及电穿孔。电穿孔已经被正式对传统的转染方法不灵的细胞有很好的效果，因此被选为最佳的分子传递系统。电穿孔的好处有可重复性、更高的效率、大量样本处理、无毒性以及容易使用（不需要孵育时间）。Lofin等人（1999）对NIH/3T3细胞进行电穿孔使mRNA进入，以研究细胞周期及细胞分化过程中mRNA对基因表达调节、控制。Bodwell等人（1999）在对COS-7细胞进行电穿孔是使用较长的脉冲时间后获得了较高水平的表达。Warner等人（1997）使用电穿孔方法成功转化了淋巴细胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX电穿孔仪转染了ES细胞进行转基因小鼠的生产。BTX ECM399\630\830型仪器、电穿孔杯以及多种特用的电极都用于动物细胞转染用途。&bull 蛋白质电整合/电插入 （系统：ECM630/830）将蛋白质导入细胞以及将蛋白质插入至细胞膜中也可以通过电穿孔来实现。不光肽段，而且包括抗体的多种蛋白，也可以进行导入。Ushio-Fukai等人（1998）对电穿孔插入哺乳动物细胞中的外源蛋白进行了定量。对于这些用途可以使用多种BTX电极。&bull 植物细胞转化（系统：ECM630/830）对植物原生质（玉米、烟草等）及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品质及产量增加的作物。Lin等人（1997）优化了多种植物上用于GUS表达的电穿孔条件，结果显示完整植物细胞以及原生质都可以进行有效转化。Diaz等人（1994）针对小麦及燕麦的叶和根的原生质进行了相似的优化试验，证明了电穿孔对于植物工作的有效性。这些作者也比较了电穿孔与PEG的差别，结果发现电穿孔更有效、更有重复性、更经济。BTX是世界上体内转染用特殊电极的领先者。对于这些用途可以使用多种BTX电极，例如2针阵列、游标尺电极、以及Tweezertrodes。&bull 贴壁细胞的转染----ACT （系统：ECM630/830）除了对盛在普通样品杯的悬浮细胞进行电穿孔外，还可以对多种培养板上的贴壁细胞进行原位电穿孔。这样可以避免用胰酶消化细胞，有助于保持细胞的活性及细胞数目。Lewis等人（1999）使用培养皿电极将基因转染入人类及静脉内皮细胞。Paptis等人（1998）通过对长在导电载玻片的NIH/3T3细胞进行原位电穿孔研究信号转导。Teruel等人（1999）也对位于载玻片上的海马神经细胞转入DNA、RNA以及多种大分子。BTX为贴壁细胞的转染（ACT）提供了PP35-2、366、747、840及Epizap电极系统。请关注不久后为这些用途开发的新产品&bull 高通量筛检----HTS （系统：ECM630/830）高通量筛检及cDNA文库的建立，需要一次处理多个样本的能力。使用传统样品杯花费很大而且有时间限制。然而，96孔板里使用的电极对于这些类型的应用肯定有用。Hoffma-Tsay等人（1994）使用96孔共轴电极在植物融合实验中检测8种化学物质。Peterfy等人（1995）比较了多种类型的多孔电极，将DNA传递入COS-7细胞。Marrero等人（1997）使用多孔电极将抗体电导入血管平滑肌细胞，以诱导细胞增值。BTX目前提供747和840用于这样的用途，并且不断开发新的产品。体内基因导入（IVGD）（系统：ECM830）在体内基因转移的非病毒技术中，直接将质粒DNA注射进入肌肉内是简单、廉价及安全的。Aihara及Miyazaki（1998）第一次指出通过在肌肉内将DNA注射与电穿孔相结合，可以将表达增强100倍。Mir等人（1999）使用多种类型的电极将基因传递进入多种种属的骨骼肌（大鼠、小鼠、兔、猴）。他们的结果显示通过使用电穿孔以及DNA注射：（1）基因转移的效率大大增加了，只是表达增强2-4倍；（2）不同实验之间的差别缩小了，而这正是单独DNA注射的主要缺点；（3）表达持续时间很长（数月），这对于长期临床应用非常重要；（4）不同种属的不同的肌肉都有阳性的反应，说明广泛的可用性；（5）基因表达非常特异仅在局部，而周围组织则没有影响到。这种技术成功用于其他组织，例如肝、睾丸、以及皮肤。最近Vicat等人（1999）通过体内电穿孔仪将基因传递如小鼠脑组织。与被称为有力的脑组织基因转移的非病毒载体的pCMV-luc与PolyEthylenlmine联合的方法相比，电穿孔的效率要高50倍。Nishi等人证明使用电穿孔可以获得有效的神经胶质瘤基因转移。Nishi还显示对实体瘤进行电基因治疗后肿瘤生长阻滞了50-90%。Dean等人将基因电导入完整的肠系膜动脉获得了成功。电穿孔已经被证实确实是进行体基因/药物转移方面一项有前途的技术，有许多新奇的用途。BTX公司特制的2针阵列电极、Genetrodes、卡钳电极、Tweezertrodes提供将基因侵入性以及侵入性转移入组织的方法。卵内基因转移（IOGD） （系统：ECM830）Muramatsu等人（1997）比较了3种转染方法用于将外源基因转入早期鸡胚进行表达。他发现与脂质体转染及基因枪相比，电穿孔是最有效的方法。Takeuchi等人（1999）使用电穿孔技术将早期鸡胚转染了tbx5及tbx4基因，以确定肢芽的翅/腿标志。对于这种用途已经开发出特用的电极。Genetrodes、L形状针电极，被用于测定鸡胚及靶向组织的特定区域。许多研究人员已经转染了眼、心或者肢体组织，方便了发育生物学方法的进一步研究。刚上市的足控开关具有遥控功能，是ECM830可以在不需要手操作的情况下进行激活，这对于卵内、体内以及体外胚胎用途非常重要。体外胚胎基因转移（IVEGD）（系统：ECM830）Tasaki等人（1999）讨论了使用电穿孔在体外小鼠胚胎方面的运用。小鼠胚胎有柱状的结构而且有比家禽更多胚胎培养基操作需求。有可能对胚胎进行电穿孔用于异位表达研究。在小鼠中后脑部的基因表达已经被观察。这个技术也用在交配后9.5天小鼠胚胎，以研究Hu基因在神经分化中的功能。BTX为这些目的提供一种全新的电极：Genepaddles。&bull 胚胎操作/核移植/动物克隆 （系统：ECM2001/830）核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体安全出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆&mdash &mdash 多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPL Therapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。