阪崎肠杆菌成套生化鉴定管

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  • 【转帖】“大头婴”事件中被忽略的杀手:阪崎肠杆菌

    2007年7月下旬,国家质量监督检验检疫 总局公布了今年4月入境的不合格食品、化妆品信息,其中全球最大的乳品原料供应商新西兰恒天然多个批次的全脂奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。这些有问题的全脂奶粉,总数达277.9吨,分别是今年1月和3月进口的。 恒天然公司表示,尊重中国政府的相关考虑和规定,已对被检验出阪崎肠杆菌的产品按规定做了处理。 阪崎肠杆菌是寄生于人和动物肠道的“条件性肠道致病菌”。也许,阪崎肠杆菌目前只引起了专业人员的高度重视,并未吸引普通公众的目光,原因在于它不仅对公众是陌生的,且现在造成的危害似乎并不算重。回顾近年来国内的食品安全问题,阪崎肠杆菌也确实被忽略了。 2004年安徽阜阳出现著名的“大头婴儿”事件。据该市县级以上医疗机构核查统计,从2003年5月以来,因食用劣质奶粉出现营养不良综合征共171例,死亡13例,病死率7.6%。婴儿发病和死亡的主因是由于劣质奶粉导致的营养不良,但是现在回过头来看,有一个可能的致病因素在当时被忽略了——这些劣质奶粉中含有阪崎肠杆菌。 阜阳劣质奶粉事件发生后,中国疾控中心营养与食品安全研究所的刘秀梅等人运用来自美国和加拿大的方法,建立了婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分离鉴定技术。从87份阜阳劣质奶粉样品中,他们检测到11份阪崎肠杆菌阳性样品,污染阳性率为12.6%。 这是国内首次从婴儿配方奶粉中分离到阪崎肠杆菌菌株。固然,劣质奶粉导致婴幼儿死亡是因其中蛋白质含量极低,不能满足婴儿的生长需要。比如,按照3-6个月婴儿的生长需要,蛋白质每日摄取量为3g / kg,而劣质奶粉每日只能提供0.07g / kg的蛋白质。所以,长期食用这种几乎没有营养的伪劣奶粉的婴儿,会产生四肢短小,身体瘦弱,头部尤显偏大的症状。 阪崎肠杆菌的污染是否会对当地婴幼儿造成雪上加霜的伤害呢?事过境迁,要得出确切的结论已经很难。不过事后查出阜阳劣质奶粉含有阪崎肠杆菌,对今天的食品安全不啻是敲响了一次警钟。 对婴幼儿最具杀伤力 早在2004年,广州检验检疫局就率先提出,在进口婴幼儿配方奶粉和奶制品中,对阪崎肠杆菌进行监测,并首次从进口奶粉中检查出阪崎肠杆菌。2007年以来,广州、中山、汕头检验检疫部门在进口奶粉中已多次检出阪崎肠杆菌。因此国内的专业人员多次呼吁,要重视阪崎肠杆菌对食品污染和对人健康的危害。

  • 【基础知识】阪崎肠杆菌

    一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种,1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症,死亡率高达50% 以上。目前,微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源,但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。例如,味全配方奶粉2008年年10月份被检出含有致病菌阪崎肠杆菌。  阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下,由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%~80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后,2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉,阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点。但是国内企业鲜有自查能力,原因是国内以前还没有专门的检测手段,而去买一套以前国内从未有过的检测设备也不是马上就可办到的。目前,国外 奶粉(乳)制品巨头却拥有检测手段,惠氏中国宣称保证在中国销售的每一个产品都经过了阪崎肠杆菌的检测才上市。同样宣称设有此检测设备的企业还有美赞臣中国公司。  在国外发现的奶粉中的阪崎肠杆菌并非有其特定的区域局限性,中国奶粉企业又面临一项大难题。  2005年5月20日,由中国检验检疫科学研究院和天津出入境检验检疫局牵头完成的《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准在京通过了审定。这项标准的出台,解决了我国检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无标准、无检测方法的问题。10月该标准被实施。  该标准建立了阪崎肠杆菌的改进的传统检测方法、普通[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法和荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法。  据了解,阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”,已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌,可导致任何年龄层人群的疾病,尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大,严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。  继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后,2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉,此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定,对奶粉严查此菌。  今年以来,广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。  二、控制阪崎肠杆菌危险的几点建议   (1)制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准,建立有效控制措施,将其危险性降低到最低。  (2)制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则,研究降低阪崎肠杆菌污染水平的方法,在生产环境和配方奶粉中降低阪崎肠杆菌的浓度和流行的危险性;为高危人群生产较大比例的商业无菌配方替代产品。  (3)制定有效的环境监测计划,将肠杆菌科而不是大肠杆菌作为工业生产线的卫生指标菌。  (4)建立实验室监测网络,对阪崎肠杆菌的来源、传播途径等进行调查研究;加强相关学科的基础研究,包括生态学、分类学、菌株毒力等。  (5)用商业无菌液体或开水冲调配方食品,喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存,并在食用前再加热。我国应根据实际情况制定相应管理办法,加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制技术研究,进一步完善婴幼儿配方食品标准,以保证我国广大婴幼儿群体的健康与安全。  三、阪崎肠杆菌检测必备仪器--荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪:  实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统(英文全名是Real-time Quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Detection System),简称实时荧光q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url],q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]的核心是实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪及与其配套的检测分析软件系统。  聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction简称[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势,因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快,成为分子生物学诊断的主流,至今仍处于学术和应用前沿,发展至今已有三代产品:第一代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪(DNA Thermal Cycler)+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成;第二代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA终点定量技术及设备(End-point quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] detection)由基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂构成,其又分为终点酶免定量(End-point ELISA-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])和终点荧光定量(End-point Flour-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url])两种;第三代产品为Real-time q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA/RNA实时荧光定量检测。  q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测灵敏度高,检测线性范围宽,检测精度和重复性好等突出优势,因此被公认为目前世界用于临床及科研的最先进核酸分子诊断技术,被美国FDA承认并推崇。检测项目包括:食物等病原菌以及疾病病毒等病原体如:乙肝病毒HBV DNA,丙肝病毒HCV RNA,艾滋病病毒HIV RNA,沙眼衣原体CT,淋病双球菌NG,巨细胞病毒CMV,结核分支杆菌Mtb、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等。  [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的应用范围广,几乎所有的生命科学领域都要涉及:食品检测、临床检验、疾病控制、检验检疫、科研实验室、食品安全、化妆品检测、环境卫生等。国内多家试剂厂商生产了包括肝炎、性病、优生优育、呼吸道疾病、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒,购买方便,价格便宜,并获得了国家相关认证。  值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术的实际应用,国内外已将实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如:  SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法  GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法  GB/T 19438.2-2004 H5 亚型禽流感病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法  ISO22174-2005 食物病原体[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法  相对于价格十分昂贵的进口仪器,选择质量性能与进口仪器相当而售价只有进口仪器三分之一甚至五分之一的优质国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪是国内绝大多数用户的必要选择,也是国家卫生主管部门、国家卫生部临床检验中心以及国家食品药品监督管理局提倡的;使用质量性能与进口仪器相当的国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪能为国家节省大量外汇,使更多的用户能够拥有先进的实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术和设备,同时还能促进国产仪器的技术进步、民族产业的发展,利国利民。  西安天隆科技有限公司生产的TL988型实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪经过国家药监局指定的、具有国家质量检验检疫局认定的具有CNAL全球互认检测资质的检测中心检测合格,性能达到同类产品国际先进水平,并通过两家国家药物临床基地临床试验,获得了国家食品药品监督管理局SFDA核发的医疗器械注册证,并符合国家卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理规范》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》。  2005年至今我国科研人员围绕着阪崎氏肠杆菌的分类、致病机理、危害评估、减少污染措施、检测方法仪器和标准等进行了研究,相关研究论文包括:  阪崎肠杆菌的生物学性状与健康危害,裴晓燕,刘秀梅, 中国疾控制中心营养与食品安全所   乳制品中的阪崎肠杆菌可致婴儿死亡,中国食品产业网 2008年5月28日10:56   乳品检测中实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的研制,彭年才,苏明权,张镇西,中国乳品工业,CN23-1177/TS200705:62-64;  乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测,彭年才,李明,食品安全导刊,CN11-5478/R 2008.07;  婴儿奶粉中阪崎肠杆菌及其检测,彭年才,张镇西,苏明权,中国乳业,CN 11-4768/S,2008.08。  浅析乳品中高危害食品源性致病菌阪崎肠杆菌的快速检测,彭年才 内蒙古乳业 P18-20, 2008,03

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  • “嗜血”的质谱——关于流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的鉴定问题
    p   卫生部临检中心组织的2018年第一次临床微生物室间质评已经结束,但关于流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的鉴定问题,在微信朋友圈里谈得正热烈 (见文《溶血 or 流感?傻傻分不清?》)[1]。主要是因为在这次质评中,生化鉴定仪和有些品牌的质谱仪的鉴定结果出错了。令小布自豪的是,布鲁克MALDI Biotyper质谱的鉴定结果与标准答案完全相符!所以小布在这里来一段点评。 /p p   流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌虽然同属,但属于两个不同的种,致病性和临床意义也大不相同,前者是上呼吸道感染的常见致病菌,而后者是上呼吸道的正常定植菌。小布认为要认真、仔细地把它们区分开,千万不要混淆! /p p   可是这两种菌的亲缘关系很近,用传统的形态学和生化方法难以区分。虽然产荚膜的流感嗜血杆菌可以通过荚膜肿胀实验区别于溶血嗜血杆菌,但有些流感嗜血杆菌是不产荚膜的,通常被认为是无法分型的。同样,虽然有的溶血嗜血杆菌能够通过卫星试验观察到溶血环,但不是所有的溶血嗜血杆菌都能观察到明显的溶血环。 /p p   难道就没有好办法了吗?当然不是! /p p    span style=" color: rgb(31, 73, 125) " strong 质谱是区分流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的好方法 /strong /span /p p   早在2013年中国CDC的研究人员就通过质谱图的聚类分析,发现质谱可以把流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌清楚地分成两类,甚至可以把不同地区来源的菌株进一步细分(见图1)[2]。 /p p style=" text-align: center" strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/dfbc448c-6829-4363-bbc8-eb80e5161d6e.jpg" title=" 1.jpg" width=" 450" height=" 409" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 450px height: 409px " / /strong /p p strong   ▲图1. 流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的聚类分析树状图(MALDI Biotyper结果) /strong /p p   2014年荷兰公共卫生区域实验室、荷兰医学中心与布鲁克微生物研发中心共同发表了MALDI Biotyper能够正确鉴定流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的文章 [2],专家们通过分析不同来源的277个菌株,发现质谱法与测序法鉴定流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的结果几乎完全一致(见表1)。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/5e7cf664-5cee-4464-b1b3-ac63e6d76a51.jpg" title=" 2.jpg" / /p p    strong ▼表1.流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的MALDI Biotyper质谱法与测序法鉴定结果比较 /strong /p p   另外,布鲁克公司在美国FDA注册进行临床试验的结果显示:通过对74个流感嗜血杆菌和31个溶血嗜血杆菌的检测MALDI Biotyper质谱法鉴定100%正确!(结果摘自布鲁克公司提交美国FDA的报告) /p p   可见,质谱是区分流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌可以信赖的方法!有些老师不免心生疑问:既然布鲁克质谱的鉴定结果都是正确的,那为什么其它品牌的质谱鉴定错了呢? /p p    strong span style=" color: rgb(31, 73, 125) " 质谱法的数据库和鉴定结果的算法非常重要 /span /strong /p p   原来呀,质谱鉴定微生物时,需要通过软件拿采集到的样品“蛋白指纹图”到数据库里进行逐个比对,因此,数据库建立与比对时所采用的理念与算法,以及数据库的容量,是影响鉴定结果非常重要的因素。 /p p   布鲁克MALDI Biotyper的建库理念是以菌株为单位,数据库中每个条目都是一个独立的菌株。它的比对算法是采用指纹识别中的“模式识别”算法,就是把样品的“蛋白指纹图”与数据库中所有菌株的“蛋白指纹图”快速自动地进行逐个图逐个峰的比较,看看每对比对的“蛋白指纹图”之间有哪些峰是匹配的,哪些峰是不匹配的,以及匹配的谱峰之间相对强度的相关性,从而得到一个综合的匹配分数,并根据分数值告诉我们鉴定的可信程度。 /p p   MALDI Biotyper的算法看上去通俗、简单,正可谓“大道至简”吧,不仅非常实用!而且最大程度上避免了误判!就像警察通过指纹比对来识别罪犯一样,只要数据库里有罪犯的指纹,它就能正确地识别出罪犯 即使数据库里没有罪犯的指纹,它也不会找错,只是告诉我们当前数据库里没有匹配的指纹,只要扩大搜索数据库的范围,定会让罪犯无以循形,不会造成冤假错案! /p p   有些老师可能会问:我们是做菌种鉴定,MALDI Biotyper的数据库为什么不以菌种为单位,而是以菌株为单位建立的呢?难道它能鉴定到菌株吗? /p p   大家知道,微生物种类繁多,每种微生物又包含丰富多样的不同菌株,而同一菌种内不同菌株之间的差异是天然存在的,并和微生物的种类有关,有的种内差异大,有的种内差异小。所以,布鲁克决定在菌株水平上建库,并在选择每个菌种的建库菌株时,尽可能包含差异大的菌株,而剔除差异小的菌株。MALDI Biotyper在菌株水平建库,具有以下优势: /p p    span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 给代表性菌株预留了充分的覆盖范围 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   避免了数据库不必要的冗余 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   容易实现数据库的扩充和更新 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   能快速适应分类学的改变 /span /p p   充分发挥了质谱技术分辨能力远远高于传统方法(如生 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " /span 化方法)的特点,不丢失种水平之内菌株之间的差异。 /p p   正是由于上述优势,美国CDC、加拿大国家微生物实验室和美国NIH等多家机构也在采用布鲁克的仪器和理念建立数据库并对外开放。 /p p   通过以上对布鲁克MALDI Biotyper质谱的数据库与软件算法的简单介绍,相信各位老师就能理解为什么这次卫生部的质评中,布鲁克质谱的鉴定结果是正确的,也就很好理解为什么美国FDA批准Bruker MALDI Biotyper CA系统作为首个鉴定新型致病菌耳念珠菌(C. auris) 的新方法了[4-6]。 /p p   参考文献 /p p   1. 溶血 or 流感?傻傻分不清? /p p   2. B. Q. Zhu, D Xiao et al. MALDI-TOF MS Distinctly Differentiates Nontypable Haemophilus influenzae from Haemophilus haemolyticus.PLoS One. 2013 8(2): e56139 /p p   3. J. P. Bruin, M. Kostrzewa et al. Identification of Haemophilus influenzae and Haemophilus haemolyticus by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2014, 33:279–284 /p p   4. https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm605336.htm /p p   5. FDA首次批准质谱方法鉴定新型致病菌耳念珠菌 (Candida auris) /p p   6. “布”下天罗地网,防止“耳念”侵袭 /p
  • 绿脓杆菌或引起眼药水致盲,MALDI-TOF助力快速鉴定
    导读据中国经济网近日报道,美国FDA针对印度某药企生产的眼药水发出警告,该眼药水可能导致细菌感染,造成失明甚至死亡。该款眼药水是人工泪液,用于润滑眼球。美国疾控中心已确认共有55名患者感染了一种罕见绿脓杆菌耐药菌株,其中5名患者永久性失明,1名患者因血液感染死亡。绿脓杆菌又称铜绿假单胞菌,是比较常见的一种致病菌,常引发呼吸道、胃肠道、尿道等感染。专家认为,本次感染是由于眼睛可以通过泪管与鼻腔相连,致病菌可以从眼睛进入鼻腔,再进入血液等其他体液或组织,从而导致疾病。使用岛津MALDI-TOF微生物鉴定系统,可以快速鉴定绿脓杆菌,守护明亮双眸。认识绿脓杆菌绿脓杆菌又称铜绿假单胞菌( Pseudomonas aeruginosa) ,是一种革兰阴性条件致病菌,抗药性较强,是一种重要的食源性和水源性致病菌,如蔬菜、水果、瓶装水、桶装水中均较常见。同时也是医院内常见的引发慢性感染和急性感染的致病菌之一,严重者可引发患者肺部功能衰竭以及纤维化囊肿。其引起的感染具有进展快、易耐药、病死率高等特点,所以快速准确的鉴定铜绿假单胞菌显得尤为重要。常见检测方法目前,传统的微生物检测方法有生化反应法和16S rRNA序列分析法。生化反应法主要依靠铜绿假单胞菌的生物学特征,通过分离培养结合生化检测等方法对细菌进行鉴定,需经过增菌、选择性分离培养、鉴定等步骤,不仅操作繁琐、检测时间长、费时费力,且容易延误诊断,难以满足快速诊断及治疗的需要。因此,致病菌的快速鉴定仍是临床微生物检验工作者面临的重要问题。MALDI-TOF质谱法是近年来广泛用于微生物快速鉴定的方法,微生物都有自身独特的蛋白组成, 因而拥有独特的蛋白质图谱。细菌蛋白主要取决于细菌自身的遗传因素, 受培养基、培养时间以及其他培养条件等外部因素的影响较小, 因而具有很好的稳定性和可重复性。常见检测方法比较表岛津解决方案MALDI-TOF微生物鉴定系统优势&bull 数据库使用岛津MALDI-TOF iDPlus Assurance、Confidence、Performance等多款仪器,采集待测微生物的核糖体蛋白质谱图,与数据库中的标准谱图进行匹配检索,可以快速的进行致病菌鉴定。数据库中含有3400种以上微生物的标准图谱,涵盖大部分常见细菌及真菌。同时还支持用户自行追加新的标准谱图,以满足数据库中未收录菌种的鉴定需要。自建库流程图(以绿脓杆菌为例)&bull MALDI-TOF质谱法检测速度快从质谱数据采集到给出鉴定结果最快只需数十秒。日常使用只需要基质、纯水及少量有机试剂,成本低廉。使用MALDI-TOF专用384孔靶板,可以单次高通量检测384个样品,同时靶板可重复使用。鉴定流程图微生物鉴定流程图绿脓杆菌鉴定案例使用MALDI-TOF采集绿脓杆菌质谱图,导入微生物鉴定数据库匹配检索,可以快速检测绿脓杆菌。绿脓杆菌质谱图绿脓杆菌数据库检索结果结语使用岛津MALDI-TOF iDPlus微生物鉴定系统采集菌株的核糖体蛋白质谱图, 与数据库比对后, 可以快速获得绿脓杆菌的鉴定结果,为科研分析或临床筛查提供依据。MALDI-TOF质谱法快捷、准确、成本低,将在致病菌快速鉴定与分析中, 发挥着越来越大的作用。本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。
  • 恒天然三批全脂奶粉被检出含阪崎肠杆菌
    日前,国家质量监督检验检疫总局进出口食品安全局公布了今年4月进境的不合格食品、化妆品信息,其中,全球最大的乳品原料供应商新西兰恒天然(前译名方塔拉)多个批次的全脂奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。   不合格产品国家已按规定处理   据公布的数据显示,被检出阪崎肠杆菌的三批全脂奶粉,总数达277.9吨,分别是今年1月和3月进口的,被上海检验检疫局和广东检验检疫局截获。   对此,记者联系了恒天然商贸(上海)有限公司,该公司给记者发回传真表示,恒天然确有进口到中国的食品工业用乳品原料在4月份被相关地方的出入境检验检疫局检出阪崎肠杆菌。尊重中国政府的相关考虑和规定,已对被检测出阪崎肠杆菌的产品按规定作出了相应的处理。   在这份4月份进境不合格食品、化妆品信息的表格里,记者看到国家已经按相关的规定对这些批次的产品进行处理。   恒天然中国进口产品抽检频出问题   同时,记者在查阅相关的资料发现,去年9月恒天然同样有两批全脂奶粉,共计231吨被广东检验检疫局检出含有阪崎肠杆菌。   记者还了解到,这两年来,恒天然进口中国多个批次的产品均存在水分检测不合格、标签不合格等问题而被处理。仅某国内奶粉品牌这两年从方塔拉进口的奶粉当中,就有5个批次,超过650多吨原料被检验出了水分检测不合格、标签不合格等问题。最近一次是今年3月从方塔拉进口的119.95吨速溶脱脂奶粉被检出水分检测值与外包装标示不符。   对此,恒天然表示,恒天然公司一向极为重视标签问题,并利用国际日恩克的方法在经认证的实验室中进行检验。食品工业用原料奶粉的水分含量问题,差距可能来自于检测的可变性。如利用同一个方法多次重复检测,其结果可能不同 而当使用不同的检测方法时,其结果也可能产生差异。   恒天然中国战线在收缩?   据悉,恒天然作为世界上最大的乳品原料供应商,每年乳品原料的全球销量超过200万吨,出口到120多个国家。在中国,包括国内乳业巨头蒙牛、伊利、三鹿等都是恒天然的客户。而雅培等国际品牌的基粉都是来自恒天然。达能、益力多等乳制品企业都在用恒天然的脱脂奶粉作为原料,也会用到其全脂奶粉做增稠剂。 业内人士介绍,恒天然在中国的战线已经在逐渐收缩,减少了对中国的出口配额。其对中国的年出口量以前有20~30万吨,但现在逐步缩小到原来的1/3。 而恒天然媒体事务的相关负责人也表示,今年恒天然出口中国的原料确实会大幅缩减,一方面处于原加料价格成本的飞速上涨,另一方面则是产品供应的紧张。该人士表示,这种情况在日本、东南亚等国家也同时存在。   各方反应恒天然:中国标准与国际惯例有差别   对于此次恒天然的进口全脂奶粉也被检出阪崎肠杆菌,恒天然商贸(上海)有限公司方面表示,按照国际惯例通常只有应用于 0~6个月婴儿、早产儿、低体重婴儿的配方食品或原料将阪崎肠杆菌作为常规检测项目。国际上对于成人的食品原料和产品检测通常不将阪崎肠杆菌列为常规检测对象。而中国的标准是全部都要检查。 恒天然方面表示,此次被检验出的产品为食品工业用的全脂奶粉,供中国的乳品企业进行再加工或生产,如乳饮料、酸奶、酸奶饮料的生产等。国际上应用于生产酸奶、UHT酸奶饮料等产品的全脂乳粉常规上一般也不检测阪崎肠杆菌。由于在热处理参数为 68℃,16秒的条件下,能确保阪崎肠杆菌以10万级数减少。所有在UHT、酸奶等产品的生产过程中,其加工工艺均高于该热处理参数,并且酸奶类产品的 PH值都很低,因此阪崎肠杆菌不会存活于高温热处理和低PH值的工艺中,从而在终产品中也不存在。   业界:在华产品都要遵守中国标准   对此,有业内人士就认为,任何产品要进入中国市场,都要遵守中国市场的相关标准,对于恒天然来说也是如此。 “方塔拉的产品出口到120多个国家,产品均符合国际的标准。当在进口中国的某些批次产品后,公司也在积极与新西兰方面协调,希望能比较好地与中国的相关检测标准契合。恒天然公司已经实施了一个风险管理战略以宰加工环境中尽可能减少肠杆菌的水平,进而确保可能的阪崎场杆菌的污染降到一个非常低的水平,并与国际上认可的食品要求相一致”恒天然表示。   乳制品客户:目前并不受影响   那么世界最大的乳品原料供应商再次在“阪崎肠杆菌“和水分检测、标签等问题上触礁。是否会影响其众多乳制品客户的信心?   记者了解到,已经有牛初乳品牌为保证产品的质量,转换了其他的供应商。而部分乳品企业在接受记者采访时则表示,每一批进口奶粉包括恒天然在内,在进入中国之前一定要经过国家检验检疫部门的抽检,抽检过关后企业才会用。而且进入中国后,企业内部仍会进行抽检。因此部分批次产品被抽检出阪崎肠杆菌超标并不代表恒天然所有产品都是有问题的。   背景资料:阪崎肠杆菌对婴儿具有威胁   据了解,阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的引起广泛关注的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”,已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌,可导致任何年龄层人群的疾病,尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大,严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。   继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后,2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉,此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定,对奶粉严查此菌。   今年以来,广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。

阪崎肠杆菌成套生化鉴定管相关的仪器

  • 【产品名称】:Microgen革兰氏阴性杆菌鉴定系统A(MID-64)【产品说明】: MICROGEN™ 细菌生化鉴定系统下MID GN-ID鉴定系统(也称MID革兰氏阴性杆菌鉴定系统)产品组合之一。HK-MID革兰氏阴性杆菌鉴定系统是一种可用于鉴定目前所有已知的肠杆菌科细菌以及广泛的氧化酶阳性杆菌的细菌生化鉴定系统,其革兰氏阴性杆菌鉴定系统A(MID-64 GN A )用于鉴定需氧及兼性厌氧革兰氏阴性细菌(肠杆菌科和其他各种革兰氏阴性细菌),并且经过AOAC认证! GN-ID鉴定系统包括两种独立的鉴定条,即GN A和GN B,GN A是用来鉴定氧化酶阴性、硝酸盐阳性、发酵葡萄糖的大多数肠杆菌科细菌,而GN B需要与GN A共同使用,而非单独使用,GN A+B主要用来鉴定非苛养革兰氏阴性杆菌(包括氧化酶阴性和阳性菌),共包括28个属(参照名录表)。【产品使用原理】:GN A和GN B鉴定条均分别由12个含干燥培养基的小管组成。这些测定管用细菌悬浮液接种,培养一定时间后,通过代谢作用产生颜色的变化,或是加入配套试剂后变色,从而来判定结果。GN-ID系统鉴定试剂MID-64 GN A 包括:30个鉴定条(每个鉴定条包含用于鉴定GNA微生物的12种生化底物),结果记录报告单,培养槽,使用说明书。MID-65 GN B包括:12个鉴定条(每个鉴定条包含用于与GNA结合鉴定GNB 微生物的12种生化底物)其它必备品:a) 鉴定分析软件(MID-60)将提供菌种鉴定结果的可能性,可能几率以及对鉴定结果的评价。b) 氧化酶试纸c) 无菌液体石蜡d) 硝酸盐试剂甲、乙液e) VPⅠ和VPⅡ试剂f) TDA试剂g) Kovac试剂h) 结果对照卡(彩图)i) 无菌生理盐水j) 无菌滴管和接菌环k) 无风扇培养箱(35-37℃)l) 动力测定培养基m) 无菌马血清(如果为放线杆菌属或巴斯德氏菌属的可疑培养物)n) 酒精灯储存和保质期:GN A和GN B鉴定条应储存于2-8℃条件,当没有打开铝箔袋时,鉴定条可储存至标签上所标的有效期;若已经打开铝箔袋,可在袋内放置干燥剂,在2-8℃下可保存14天。使用Microgen革兰氏阴性杆菌鉴定系统A(MID-64)的GN A鉴定条可鉴定化酶阴性、硝酸盐阳性、发酵葡萄糖的大多数常见的肠杆菌科细菌(菌种目录有44个种)
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  • 阪崎肠杆菌快速检测仪深芬仪器厂家生产的阪崎肠杆菌快速检测仪适用于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、志贺氏菌、李斯特菌、副溶血性弧菌、溶藻性弧菌、阪崎肠杆菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的快速定量检测;可检测食品、饮用水、表面等样品中食源性微生物致病菌(支持检测项目定制)在致病菌微生物检测领域,测量准确性和测量速度之间的矛盾一直没有解决,针对这一现状深圳市芬析仪器制造有限公司研制了一款集温控技术、生物技术、光谱分析技术于一体的阪崎肠杆菌快速检测仪,阪崎肠杆菌快速检测仪操作简单,无需增菌,缩短了检测时间,测试时间不超过1小时,是一种新型快速检测微生物致病菌含量的仪器。阪崎肠杆菌快速检测仪技术参数:1、显示屏幕:7寸彩色中文液晶触摸显示屏2、操作系统:Android 9.0操作系统,芯片A53 联发科 2G+16G(外置TF内存支持扩展128G)3、样品信息:检测通道可独立设置样品名称、样品来源单位名称、单位地址(三级联动)、责任人、联系方式、信用代码等信息4、智能检测: 无需增菌,兼容单通道独立检测或多通道同时检测测试时间(前处理+测试)不超过1小时5、用户信息:可设置检测单位名称、单位地址(三级联动)、联系电话、责任人、检测人员、审核员等,可多账户设置6、数据分析:对检测结果进行圆饼图、柱状图、折线图进行统计、汇总、分析;7、数据导出:支持USB数据导出,格式可选(TXT、Excel)8、GPS定位:支持卫星定位功能9、系统更新:支持远程更新、新版本自动更新10、通讯接口:外置SIM卡插口(支持2G/3G/4G全网通)、外置存储TF内存插口、RS232、USB A型、USB B型、网口、wifi、蓝牙11、打印功能:内置热敏打印机,可通过USB B型外链打印机,单条或多条数据合并打印,可打印检测结果检测报告可打印检测项目、样品名称、检测结果、结果判断、检测日期 、检测单位、检验人员、被检测单位等信息;USB B型接口可连接A4打印机打印结果。12、数据上传:支持SIM(2G/3G/4G全网通)、网口、wifi进行数据传输及对接各地监管平台13、检测通道:16通道检测14、检测结果:定性定量分析15、检测时间:60分钟16、样品类别:可检测固体、液体、表面17、仪器尺寸:385*330*170mm【自主知识产权产品】1、水分测定仪2、固含量检测仪3、农药残留检测仪4、多功能食品安全检测仪5、多参数食品安全检测仪6、ATP荧光检测仪7、胶体金读卡仪8、荧光免疫层读卡仪9、真菌毒素检测仪10、动物源性检测仪11、微生物致病菌检测仪12、非洲猪瘟快速检测仪13、瘦肉精快速检测仪14、水产品药物残留检测仪15、抗生素残留检测仪16、兽药(药物)残留检测仪17、重金属快速检测仪18、水质检测仪19、恒温荧光PCR仪20、恒温孵育器21、食品安全速测试剂【OEM/ODM定制服务】一、ODM合作:1、支持一台发货2、标签LOGO说明书全套服务二、OEM合作:1、知识产权输出2、外观专利输出3、计算机软件著作权输出4、PC端电脑驱动软件输出5、模具制造6、线路板贴片生产7、高新技术企业规划8、不同方案满足您不同需求以上是阪崎肠杆菌快速检测仪技术参数,如果您想了解有关于阪崎肠杆菌快速检测仪操作说明书以及其他问题,请致电深圳市芬析仪器制造有限公司。
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  • 产品简介 水质安全微生物(大肠杆菌)检测套件将取样、接种、培养的过程高度集成化,实现在取样现场即可进行操作,不仅大大缩短微生物指标检测用时,且大限度避免用于水样运输导致检测偏差:配备两台可移动式数字控温培养箱,实现对大肠杆菌、粪大肠杆菌的同时培养;支持多种预制式培养基,使用方便。产品配置 含数控培养箱2个、铝制培养盘40个及培养盘支架、供电套餐、水样过滤组件1套、供200次大肠杆菌/粪大肠菌检测用粉末培养基1瓶、滤膜及培养基吸收垫200套以及其他配件。所有组件置于硬质防水便携箱中提供。技术参数数字控温培养箱(1)培养条件:可选37℃、44℃或最多6组自定义培养温度,可选温度范围20-50℃,培养时长自定义,支持微生物复苏模式;(2)温度控制:控温稳定性:±0.5℃;(3)控温方式:采用激光平衡热敏电阻对配合自动温度识别功能,支持降温冷却功能;(4)培养基 可匹配干粉培养基或预制式营养品使用;(5)用户交互:屏幕提示符或语音提示,支持中、英文等多种语言;(6)数据记录:可查阅最近5组培养条件记录;(7)连接:可通过微型USB端口与电脑或移动设备连接,通过应用软件实现数据下载或语音提示上传;(8)尺寸和重量:宽X长X高,110X123X145mm;690g;(9)供电方式:可通过充电电池、汽车点烟器或外接交流电源供电。2.套件(1)外箱材质:高强度工程塑料箱提供;(2)外箱尺寸:宽X长X高,555X428X211mm;(3)总重:12kg。
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阪崎肠杆菌成套生化鉴定管相关的耗材

  • 阪崎肠杆菌测试片
    阪崎肠杆菌的测试片检测方法方法编号:5045 1 适用范围:可用于各类食品和原料中阪崎肠杆菌菌的检测以及突发事件应急需要。2 方法原理:测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,由阪崎肠杆菌选择性培养基、吸水凝胶和特异性酶显色剂等组成,一步培养15~24小时就可确定出目标菌的存在。3操作方法3.1样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。3.2 接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。3.3 培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3.4 结果判别: 对测试片进行观察,呈蓝绿色的菌落为阪崎肠杆菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。4 附加说明4.1阪崎肠杆菌纯菌株产生典型的蓝绿色点,接种一些肠道菌如大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等时,一加样下去就会出现有紫色的点或晕状,此为产品本身显色剂的原因,不影响产品的使用和结果判读;而金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157和副溶血性弧菌等均被抑制。4.2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。4.3注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。
  • 大肠杆菌大肠菌群测试片(ECC)
    大肠杆菌大肠菌群测试片(ECC)使用说明方法编号:50211 原理及适用范围:大肠杆菌( Escherichia coli )和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群测试片(E.coli / Coliform Count Plate)是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。2 操作方法2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,振摇后成为1:100的稀释液。2.2 接种:一般食品选1~2个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片(BE203)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下,每个稀释度接种两片。2.3 培养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3 结果判读: 培养后大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升(克)含有大肠菌群数。4 附加说明4.1我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群( Coliform )作为检测指标,而欧盟等许多国家则以大肠杆菌(E.coli)作为检测对象,因此,本产品对于出口食品和国际航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。4.2 如果样品的酸碱度pH 7.0以下时,应先用灭过菌的碱性溶液(如1mol/LNaOH)调节到pH7.0-~8.0。4.3大肠杆菌大肠菌群测试片对纯菌的检测灵敏度可达0.15 cfu/mL。 4.4一般食品对于大肠菌群的要求都比较严格,如果测试片上有成片的红点,或者中央没有红点,但边缘有很多红点,一定是已经严重超标,建议按多不可计来报告。
  • 大肠杆菌测试片(美国3M)
    7.Petrifilm&trade 大肠菌群/大肠杆菌测试片 &bull 一个测试片同时检测大肠杆菌和大肠菌群 &bull 24-48小时确认大肠杆菌数,节省时间2-3天 &bull 大肠杆菌显示为蓝色带气泡 &bull 其他大肠菌群为红色带气泡 AOAC OMA标准:991.14, 998.08 SN行业标准: SN/T 1896-2007 编号:6414 规格:25片/包,20包/箱 大肠杆菌和大肠菌群快速检验测试片 一、操作方法 二、判读手册 Petrifilm ColiformTM Coliform测试片含有VRB培养剂 (Violet Red Bile),一种冷水可溶性的凝胶剂和四唑翁(tetrazollium)指示剂,可增强菌落计数效果。绝大多数E .coli(约占97%)能产生-葡萄糖甘酸酶与培养基中的指示剂反应,产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌落周围,表面覆盖的胶膜,可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体,约有95%的大肠杆菌产生,形成蓝色或深蓝上菌落并有气泡相连接,气泡大小约为1个菌落直径。 AOAC和FDA细菌学分析手册(RAM)规定大肠菌群为革兰氏阴性杆菌,发酵乳糖产酸产气。大肠菌群菌落在Petrifilm EC测试片上生长产酸,PH指示剂使培养基颜色变深,在红色菌落周围有气泡者,为大肠菌群细菌。大肠杆菌鉴定,在不同国家可以有变更(见培养时间和温度部分指示)。 样品制备 4、制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内. 5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水. 但不可用含有枸橼酸盐、bisulfite or thiosulfate的缓冲液. 因为它能抑止菌生长。 6、搅拌或均质样品,酸性样品的稀释液用INNaoH调PH6.5-7.5,对碱性样品的稀释液用IN HCL调PH6.5-7.5。

阪崎肠杆菌成套生化鉴定管相关的试剂

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