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[table=796][tr][td][align=center][b][font=Arial][color=#000080]LIF激光诱导荧光用激光器[/color][/font][/b][/align][/td][/tr][tr][td] [/td][/tr][tr][td][font=Arial][size=12px][b] 激光诱导荧光(Laser Induced Fluorescence)[/b]属于激光光谱学诊断技术,是一种新的流动显示和流动测量的方法,是非介入式的、能实时获得二维甚至三维空间分布信息的实验方法,可以进行浓度场、温度场、压力场以及速度场的定量测量。 [b]LIF技术原理[/b]:根据物质分子吸收光谱和荧光光谱能级跃迁机理,选择合适波长的激光穿过检测区域,检测区域中具有吸收光子能力的物质在特定波长光照射下,跃迁至不稳定的高能态,在一定时间内再从高能态返回基态。在此过程中,分子通过自发辐射释放能量,从而发出荧光。通过探测器检测激光诱导荧光强度及分布,得到激光诱导荧光光谱。通过分析荧光的分布,可以探测样品粒子的种类;分析荧光的强弱,可得知粒子的浓度以及温度;分析其空间分辨性还可以测量粒子的空间浓度和温度分布。 同时,使用CCD相机等图像采集工具记录下流动的荧光物质的图像,即可实现对复杂流场的可视化,进行直观分析。[/size][/font][/td][/tr][/table][size=16px][/size][table=796][tr][td][font=Arial][size=12px][b]IF技术[/b]作为目前灵敏度较高的检测技术,在生物学、化学、医学、农业、环境科学等领域广泛应用。例如:荧光探针检测、毛细血管电泳检测、生物体疾病检测、火焰燃烧检测、环境水质检测、高速气体动力学等等。[/size][/font][/td][/tr][tr][td][table=799][tr][td=1,1,399][/td][td=1,1,400] [/td][/tr][tr][td=1,1,399][align=center][font=Arial][img=上转换应用实例,250,200]http://www.cnilaser.com/picture/LIF_002.jpg[/img][/font][/align][/td][td=1,1,400][align=center][font=Arial][img=上转换应用实例,250,200]http://www.cnilaser.com/picture/LIF_003.jpg[/img][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,399][font=Arial][size=12px]火焰燃烧检测[/size][/font][/td][td=1,1,400][font=Arial][size=12px]荧光探针检测HeLa细胞[/size][/font][/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td] [/td][/tr][tr][td][table=796][tr][td][font=Arial][color=#FFFFFF]◆[/color][b][color=#FFFFFF]系统特点[/color][/b][/font][/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td] [/td][/tr][tr][td][font=Arial][size=12px][color=#000080][b][img=,6,6]http://www.cnilaser.com/picture/p_greenpercent.gif[/img][/b][/color][/size][/font][font=Arial][size=12px] [/size][/font][font=Arial][size=12px]LIF技术具有更高空间分辨率,高灵敏度,高信噪比;[/size][/font][font=Arial][size=12px][color=#000080][b][img=,6,6]http://www.cnilaser.com/picture/p_greenpercent.gif[/img][/b][/color][/size][/font][font=Arial][size=12px] [/size][/font][font=Arial][size=12px]易于安装、拆卸及维护 ;[/size][/font][font=Arial][size=12px][color=#000080][b][img=,6,6]http://www.cnilaser.com/picture/p_greenpercent.gif[/img][/b][/color][/size][/font][font=Arial][size=12px] [/size][/font][font=Arial][size=12px]可提供客户定制的解决方案。[/size][/font][/td][/tr][/table]
1.目的了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。2.原理外源基因克隆在含有lac启动子的表达系统中。先让宿主菌生长,lac I产生的阻遏蛋白与lac操纵基因结合抑制下游的外源基因转录。向培养基中加入诱导物IPTG(异丙基硫代-b-D-半乳糖),解除抑制使外源基因大量表达。表达的蛋白可经SDS-PAGE或Western-blotting检测。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,50ml 微量离心管,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式冷冻离心机,制冰机,恒温摇床,分光光度计,超净工作台,恒温培养箱,摇菌试管,三角烧瓶,接种环。4.试剂LB培养基(加抗菌素),100mg/ml IPTG,20%葡萄糖。5.实验准备无菌ddH2O,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌),牙签(灭菌),摇菌管(灭菌),100mg/ml IPTG (过滤灭菌)(100ml分装,-20°C保存),100mg/ml氨苄青霉素(过滤灭菌)(100ml分装,-20°C保存),配制20%葡萄糖(8磅灭菌20分钟,添加至上述LB中,终浓度为0.2%)。6.操作步骤(1) 晚上9:00接种。在超净工作台中接种含有Pinpoint™xa-3-CHI重组载体的菌株,培养于两个三角烧瓶各20ml LB-葡萄糖培养基(含抗菌素Amp 120μg/ml)的摇菌管中,慢速70~90转/分钟30°C摇菌过夜。(2) 至第二天上午8:30 OD600约为0.5,加IPTG至 100μg/ml,150~170转/分钟37°C诱导1.5-3h。同时做不加IPTG诱导和非转化的空菌诱导的对照培养。(3) 4000rpm离心15min弃掉上清液,收获菌体,用SDS-PAGE电泳分析(表达蛋白分子量为30kDa)。菌体也可放在-20°C以下保存备用。(4) 在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面。
最近在开发GB/T 19466.6-2009氧化诱导期的测试方法,实验室内用LDPE测的氧化诱导期温度偏差大了点,想改善重复性。排除制样后,氧气的纯度没确认,但在空气中的重复性也不好,还可能是什么原因呢?