两虫检测

一、方法原理简介标准依据：国家《中华人民共和国生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的微生物指标，要求为1个/10L。该产品运用的检测方法是国标规定的“两虫”IFA 检测方法，采样淘洗及 IMS 系统均符合国标及美国 EPA1623 的标准方法。具体步骤如下：过滤采样→淘洗浓缩→ IMS 磁分离→ IFA 染色→显微镜检 二、主要特点及技术先进性说明 （一）、两虫系统设计的标准性、合理性、适用性1、 美国UniBest公司Compact 型两虫检测仪 IFA 染色系统符合并优于中国国标。2、 美国UniBest公司Compact 型两虫检测仪 IMS 免疫磁分离系统采用国标 GB/T 5750.12-2006 方法。3、 美国UniBest公司Compact 型两虫检测仪过滤系统采用符合国际技术规范规定的一次性滤囊。 （二）、两虫系统的可靠性、稳定性1、 过滤步骤回收率 ≥12、 淘洗步骤回收率 ≥80%3、 IMS 免疫磁分离步骤回收率 ≥90%4、 总回收率（过滤、淘洗、磁珠分离、染色）≥ 35%5、 检测结果相对标准差 ≤10%6、 镜检率：贾第鞭毛虫孢囊 1检出，隐孢子虫卵囊 准确检出7、 检测可处理高浊度水样：可达 100（NTU）8、 试剂盒配备预制的阳性对照玻片，确保试剂盒的有效活性；完全避免误检，确保检测的准确性和权威性。9、 保质期长：美国 UniBest 优佰达公司 ClearScan 系列两虫 IFA 染色试剂保质期长达 24 个月，是业内保质期最长、性能最稳定的 IFA 试剂。 （三）、两虫系统的先进性、准确性、经济性1、 标记单克隆抗体：包括抗隐孢子虫抗体和抗贾第鞭毛虫单克隆抗体的异硫氰酸荧光素（FITC），系一种的免疫球蛋白M五聚体，由5 个FITC结合点位同时标记一个抗体，具有显著的明亮荧光效果，该抗体是国标推荐的染色试剂。2、 提供固色液：固色液使显色更稳定，几天后仍不褪色镜检效果依然清晰。3、 美国 UniBest 优佰达公司 ClearScan 系列 IFA 染色试剂已添加专用复染液，可使聚焦更准确，计数更清晰准确。4、 提供阳性对照玻片：试剂盒（25 次测试量）中含一个预制的载玻片供随时自检，使测试更便捷更省时。5、 采样过滤系统采用美国 EPA1623 标准推荐的一次性滤囊，完全杜绝样品交叉污染；可以在不更改所有实验仪器、试剂及器具的情况下完全替代其它品牌的一次性或多次使用的过滤器具。6、 美国 UniBest 公司 ClearScan 系列两虫检测系统，日常检测运行成本与市场同类产品相比具有明显优势。 三、系统概述（一）、采样淘洗浓缩系统采用符合中国国标及美国 EPA 要求的囊式过滤器对水样进行过滤，将孢囊、卵囊及其他物质收集在过滤器上，该过滤器可用于实验室及野外现场水样过滤。滤囊利用两虫专用淘洗缓冲液将拦截在滤囊上的两虫振荡洗脱下来，之后进行离心收集。 （二）、免疫磁分离系统（IMS）IMS 过程使用美国 UniBest 优佰达公司的 ClearScan 系列两虫专用免疫磁分离试剂盒，利用带有特异性抗体的磁珠与样品中的贾第鞭毛虫和隐孢子虫特异性抗原相结合，在磁场中高效选择性分离，该步骤可保证检测的特异性。 （三）、IFA（间接免疫荧光）染色系统使用美国 UniBest 优佰达公司的 Cellabs 型检测贾第鞭毛虫和隐孢子虫诊断专用试剂盒（内含的免疫球蛋白 M 五聚体 FITC 单克隆抗体）对水样中的两虫（抗原）进行荧光标记，同时利用细胞核染色剂 DAPI（4，6-二脒基-2-苯基吲哚）与细胞核中的双链 DNA 结合发出荧光，排除假阳性反应，从而提高镜检准确性。 （四）、显微镜检系统使用两虫专用高级荧光显微镜对着色样本进行检测，观察样本，对符合孢囊和卵囊大小、外形、荧光特性的被观察物依据国标 GB/T 5750.12-2006 中贾第鞭毛虫孢囊与隐孢子虫卵囊的特征（见尾页）进行定性、定量分析。 四、技术参数 系统设备主要性能技术标设备的应用和特点 过滤采样及淘洗浓缩系统 UniBest 公司囊式过滤器1、 此方法比其他方法更快更简单，可以对多样个样品同时进行处理；2、 一次性的设计杜绝交叉污染，避免造成假阳性误判3、 囊式滤器采用特制的0.45μm孔径的改良滤膜能截留两虫，排除了假阴性。 该方法符合中国国标 GB5750.12-2006 及美国 EPA 两虫过滤采样方法；专用于水源水与自来水的隐孢子虫及贾第鞭毛虫的浓缩与回收；使用简单，滤器无需安装和清洗。 UniBest 公司洗脱振荡器1、 电源：230V 50HZ 50W2、 工作振幅：1.5mm3、 速度范围：0-1000 振幅/分钟4、 载重：3kg5、 净重：8kg该产品可同时洗脱 12 个样品，有效地节省了大量的人力及样品前处理时间。 专用蠕动泵1、 适用电源：AC220V/50Hz2、 消耗功率：140W3、 流量范围：0.7-6000ml/min4、 转速 10-600rpm5、 液晶显示屏6、 工作环境：环境温度 0~40°C，相对湿度80%专用蠕动泵因水样只接触泵管，维护清洗简单。可选双通道，同时采样两个样品。 专用离心机1、 适配器：4x250ml2、 转速：5300rpm3、 定时范围：0-99min4、 电源：AC220V 50Hz 20A5、 相对离心力：5000g（注：g 为重力加速度）6、 噪声（转速）： ≤ 60Db(A)7、 净重：30kg特有的安全保护设计：1、 超速停止、门盖自锁、误操作保护2、 紧急情况开门3、 防爆门盖4、 蜂鸣器报警系统5、 具有 10个程序升降速率曲线 五、备注按照国标 GB 5750 12-2006《生活饮用水标准检验方法》规定，“两虫”检测系统大致分为以下五个步骤，分别是：过滤采样→ 淘洗浓缩→ IMS 磁分离→ IFA 染色→ 显微镜检，其中过滤采样仅仅是“两虫”检测环节中的一个非核心步骤，实验方法中所提到的过滤器的型号并不能断章取义地代表两虫检测的采样方法实质，更不能以偏概全地代表两虫检测全过程的检测方法；过滤采样器只是收集样品的工具，而并非两虫检测的关键技术，并且随着两虫采样技术的进步，只要使用的两虫采样器达到样本采集的目的即可；如果仅仅用一个过滤采样器的型号来自称是国标甚至国际标准的实验方法，就会混淆了两虫检测方法以及国家标准的本来实质。美国 UniBest 优佰达集团的“两虫”检测系统，采用的是一次性滤囊的过滤采样方法，且性能指标不仅满足而且优于国标（国标要求滤囊的孔径为 1μm，我们的孔径为0.45μm，更小的孔径，更能, 保证两虫的 完全截留, ）。“两虫”检测的核心步骤在于 IFA（间接免疫荧光）染色，美国 UniBest 优佰达集团“两虫”染色试剂是国标核心步骤指定的染色试剂。上海中联发 4008803698

最具成本效益的贾第鞭毛虫/隐孢子虫全自动富集浓缩系统滤膜浓缩/沉淀两种富集模式。丙酮作为浓缩溶液，极大的降低了试剂成本。 无需昂贵的免疫磁分离（IMS）环节。饮用水检测方法扩项最优选择，提供完备的技术支持。优势 功能强大 快仕达Quicstar-Filter超高效富集过滤系统是为实验室-野外采样设计的，更轻便的可更换的滤器，可携带至野外工作的，使您的富集流程更具效率。快仕达Quicstar-1000全自动沉淀富集系统是为实验室实现自动化完成高浊度原水富集设计的，进样-加液-搅拌-静止-抽取上清液一机自动完成，无需人员值守；并可根据实际情况并联多个主机，最大可实现10通道样本一台控制屏操作。 效率根据使用场景可并联多个主机，批量处理样本，最多可增加至10通道。沉淀法自动完成原水的预处理和12~16小时静置沉淀，无需人员值守，可内置真空系统，完成染色工作，减少使用空间。检测结果相对标准差≤20%。综合回收率＞35%。结果相对标准差≤20%。操作简单10英寸屏幕引导式操作，容易上手。中控平台可自定义工作流程。可自定义处理样本体积，实时提醒/停止。方法适用GB/T 5750.12- 2023《生活饮用水标准检测方法》适用CJ /T 141-2018 《城镇供水水质标准检测方法》原理微孔滤膜拦截两虫样本快仕达*Quicstar Filter采用1um孔径的混合纤维素脂微孔滤膜作为拦截处理水中两虫的载体，混合纤维素脂微孔滤膜(MCE)孔径1um，亲水性材质设计，对低浊度的处理水样本，保持高通量，可连续过滤100L，减少手动操作。MCE-Filter 碟式微孔滤器耐压设计的外壳利用自动化的程控技术，通过压力监测和流速控制，对50L处理水中的两虫卵囊和孢囊进行更有效的拦截效果。工作原理完全满足GB/T 5750.12中滤膜浓缩的技术要求。自动沉淀富集两虫样本快仕达*Quicstar-1000 跟据GB/T 5750.12中针对高浊度原水样本需要进行沉淀富集，设计完全无需人员值守的全自动富集单元。碱性物质使得样本中的两虫卵囊和孢囊在经过16小时的静置后，沉淀至桶底部，再通过离心分离纯化的方式实现富集两虫样本的目的。流程滤膜富集：步骤1 快仕达*Quicstar-Filter完成富集50L水样。步骤2 将混合纤维素脂滤膜折叠后转移至50mL离心瓶，加入有机溶剂溶解。沉淀富集：步骤1快仕达*Quicstar-1000自动完成高浊度水样的沉淀，保留200mL沉淀物。步骤2加入酸性溶液溶解沉淀物，转移至500mL离心瓶。技术参数滤膜富集单元沉淀富集单元参数描述参数描述压力传感器0.1～9999 L沉淀水量2-10L滤膜法处理水量0.1～2 L/min静置定时范围0～16小时富集流速0~2MPa搅拌转速量程60～1200 rpm/minpH传感器0～14其他参数参数描述操作屏幕10英寸彩色触摸屏 90Hz刷新率、工业级ARM控制、耐磨防爆玻璃材质功率100 W电源220V 50Hz尺寸305mm x 410mm x 310mm/300mm x 450mm x 310mm

简介水是生命之源，饮用水水质安全是国家公共卫生安全体系的重要组成部分，与人民身体健康和社会稳定息息相关。但是说起饮用水的监测，人们往往想到的只有物理、化学以及细菌等指标，却忽略了被认为世界上最容易导致人体腹泻的水源性耐氯人畜共患原生动物寄生虫——贾第鞭毛虫（Giardia）和隐孢子虫（Cryptosporidium），简称“两虫”。 “两虫”传播影响面大，容易暴发感染。隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫包囊在外界环境中能较长时间保持感染性。 人或动物通经水源性或食源性感染“两虫”后，主要症状为腹痛、腹泻、腹胀、呕吐、发热和厌食等，典型病人表现为以腹泻为主的吸收不良综合征，腹泻呈水样粪便，量大、恶息、无脓血。儿童患者可由于腹泻，引起贫血等营养不良，导致生长滞缓。对于患有AIDS等免疫功能缺陷者，临床表现为持续性难以控制的腹泻，若不及时对症治疗，将有70%的患者将因此脱水而死。“两虫”目前常规水处理工艺难以杀灭，只能依赖自身免疫。 北京华科仪科技股份有限公司与中国科学院生态环境研究中心通过长期开展深入合作，参照国内外研究进展及国内水质检测的实际情况，以降低设备和检测成本为目标，围绕“两虫”检测方法、仪器研制、自动识别系统等方面开展了系统的研发，开发出基于“滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法”和人工智能技术的两虫检测自动识别系统，解决了我国饮用水“两虫”检测过程中检测成本高昂、人工识别主观性和技术性、依赖进口技术和设备等诸多问题。 应用领域：疾控中心 供水系统 第三方检测 环境监测站 科研院所 其他水质监测/检测单位两虫样品富集前处理装置主要特点：1.设备包含微孔滤膜法和碳酸钙沉淀法双重通路2.支持过滤法和沉淀法同时处理水样3.使用滤膜法，设备支持用户自行设置处理样品体积，达到设定阈值后，设备实时提醒并自动停止4.使用滤膜法，试剂使滤膜完全溶解，无需淘洗，确保高回收率 5.使用沉淀法，设备自动处理样品，无需人员现场值守6.使用沉淀法，内置蠕动泵，辅助吸取上清液7.设备能够将样品体积由10L富集至200mL多通道两虫样品富集前处理装置主要特点：1.设备包含微孔滤膜过滤法和碳酸钙沉淀法（五通道）双重通路2.配有大尺寸触摸屏，内置微孔滤膜过滤法和碳酸钙沉淀法操作指导，引导用户使用3.支持样品浊度检测，能引导用户选择合适的方法处理不同类型样品 4.使用过滤法，设备包含两组过滤器，达到设定换膜压力后设备实时提醒并自动切换至第二组过滤器5.使用过滤法，设备支持用户自行设置处理样品体积，达到设定阈值后，设备实时提醒并自动停止6.使用滤膜法，试剂使滤膜完全溶解，无需淘洗，确保高回收率7.使用沉淀法，设备包含5个10L反应器，可同时自动处理50L水样，且无需人员现场值守8.使用沉淀法，内置蠕动泵，辅助吸取上清液9.内置真空系统，为染色阶段提供真空抽滤环境10.能够将样品体积由10L富集至200mL基于人工智能技术的两虫自动识别系统 主要特点:1.显微镜操作遵照国家标准要求2.自动扫描全片，自动拍照3.发现两虫存在，系统自动拍照并记录坐标并进行数据库存档4.系统自动出具检测结果报告5.显微镜运动控制程序：定义扫描区域，控制电动载物台三轴运动，切换物镜，控制相机拍照，记录目标物坐标和镜头信息，能自动还原记录状态辅助人工复核6.两虫图像识别系统：采用嵌套循环逐像素扫描识别图片，采用DBSCAN聚类技术实现两虫标记，基于大数据利用积卷神经网络技术识别两虫类别 技术指标两虫样品富集前处理装置技术参数：外形尺寸760*670*753mm输入电压220VAC 50HZ设备功率≤180W触摸屏7寸工业触摸屏传感器量程PH传感器0-14滤膜法样品处理量设置范围0-9999L滤膜法泵流量参数 1.2L/min沉淀法一个样品处理时间 （除静置时间）≤15min回收率≥30% 多通道两虫样品富集前处理装置技术参数：外形尺寸1540*560*1360mm输入电压220VAC 50HZ设备功率≤300W触摸屏10寸工业触摸屏传感器量程浊度0-100NTU 压力0-1.6MPa；PH传感器0-14滤膜法样品处理量设置范围0-9999L滤膜法泵流量参数1.2L/min沉淀法一个样品处理时间 （除静置时间）≤15min真空泵真空速度0-12L/min,极限真空度24KPa回收率≥30% 基于人工智能技术的两虫自动识别系统技术参数：光学系统VIS60无限远光学系统，齐焦距离≥60mm 聚光镜DIC转盘万能聚光镜高精度电动载物平台行程125*75mm,最小步长0.1μm调焦系统 低手位同轴调焦机构（带上限位及松紧调节环），符合人机工程学设计，给予用户最大程度的舒适感；调焦范围35mm,微调格值1μmECO照明系统100WHBO超高压球型汞灯微分干涉系统配置了转盘DIC聚光镜和DIC模块和附件显微镜扩展性可扩展暗视野、相差、偏光光观察，可扩展多人共览装置最大分辨率2448 * 2048灰度定标功能可保证非连续拍摄图像明暗程度的一致性和连贯性图像水印功能可快速对比相似图像图像标记功能比例尺、放大倍率、日期时间戳、辅助对焦清晰度因子、视频数字十字线动态显示刻线、网格、虚拟计数池、水印模版功能