病毒载量检测

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病毒载量检测相关的仪器

  • 详细介绍产品简介ZR-1000A型口罩病毒过滤效率(VFE)检测仪的主要性能指标符合YY/T1497-2016医用防护口罩材料病毒过滤效率评价Phi-x174噬菌体测试方法,采用双气路同时对比采样方法,提高了采样的准确性,适用于计量检定部门、科研院所、口罩生产企业以及其它相关部门对口罩病毒过滤效率的性能测试。 执行标准YY/T1497-2016 医用防护口罩材料病毒过滤效率评价Phi-X174噬菌体测试方法 技术特点负压实验系统,保证操作人员安全;负压柜内置蠕动泵,A、B两路液体冲击式采样器;蠕动泵流量大小可设定;专用微生物气溶胶发生器喷雾流量大小可设定,雾化效果好;嵌入式高速工业微电脑控制;10.4寸工业级高亮度彩色触摸显示屏;USB接口,支持U盘数据转存;柜体内置高亮度照明灯;柜体内置紫外线消毒杀菌灯;内置漏电保护开关,保护操作人员安全;柜体内层不锈钢整体加工成型,外层喷塑冷轧板,内外层之间保温、阻燃设计;前置开关式玻璃门,便于实验人员观察操作;可拆卸式支架,支架高度可调;支撑、移动两用脚轮。
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  • Viresolve NFR过滤器可快速有效地从重组蛋白溶液或血制品中去除逆转录病毒。Viresolve NFR过滤器是纯化单克隆抗体的理想选择,并提供易于实施的技术,可消除基础培养基和蛋白质料液中的逆转录病毒污染物。Viresolve NFR过滤器用于生物反应器的下游时,可帮助您将哺乳动物细胞表达系统常见病毒引起的产品风险和工艺风险降至最低。优势:- 快速、可靠的清除Viresolve NFR过滤器采用Retropore无空隙膜,是聚醚砜膜制造,其无空隙结构已获得专利,具备出众的清除能力和高流速特点。不对称膜核心的内部比表面更紧密,能够有效截留大病毒并使较小的蛋白质通过。Viresolve NFR过滤器快速且可靠的清除能力能够提高产品安全性并保护下游工艺。- 高产品收率和高产品质量与病毒灭活不同,除病毒过滤器基于物理截留的原理,不会降解蛋白质。高蛋白通过和低蛋白吸附可达到98%的蛋白产品收率,而低提取物可确保高产品质量。Retropore膜技术可通过高达700 kDa的蛋白质,并清除对数减少值 6 LRV的逆转录病毒。- 合规性所有Viresolve NFR过滤器的设计、开发和生产均根据质量管理体系进行,符合相应的ISO 9001质量体系标准。Viresolve NFR囊式和筒式过滤器在生产过程中进行了完整性测试,并提供对应的验证指南的支持,符合法规要求。- 可润湿的快速完整性测试滤器类型:- OptiScale-25一次性过滤器用于对原料要求少的小批量应用,过滤面积3.5 cm2,是杂质研究、蛋白质通过研究、膜面积确定和病毒验证的有效评估工具。 OptiScale-25过滤器作为评估套件出售,每个套件包括9个囊式过滤器(3个不同的膜批次,每个批次各有三个过滤器)。该套件非常适合与默克的低残留体积VmaxTM测试套件一起用于验证和放大研究。- Opticap XL囊式过滤器能够节省装配、清洁和验证不锈钢外壳的时间和费用。Opticap XL囊式过滤器是独立和一次性的,可以选择进口和出口连接方式以优化您的过滤工艺,包括提供高流速的卫生及法兰和倒刺接口。具备非常好的热应力、液压压力、良好的抗腐蚀性。其独特的设计能够使残留体积达到最小,减少生产损失。每个囊式过滤器在生产过程中均通过完整性测试,能够在工艺处理过程中确保可靠的性能表现。可选10英寸的滤器。- Opticap XLT囊式过滤器能够节省装配、清洁和验证不锈钢外壳的时间和费用。Opticap XLT囊式过滤器是独立和一次性的,可以选择进口和出口连接方式以优化您的过滤工艺,包括提供高流速的卫生及法兰和倒刺接口。具备非常好的热应力、液压压力、良好的抗腐蚀性。提供T型设计,可兼容串联或并联过滤。专门设计的支架可实现快速简便的操作。每个囊式过滤器在生产过程中均通过完整性测试,能够在工艺处理过程中确保可靠的性能表现。可选Opticap XLT10,XLT20,XLT30囊式尺寸。- Opticap一次性囊式过滤器囊式过滤器的独特结构和折叠膜使残留体积最小,减少了生产损失。Opticap外壳设计获得了专利,可以承受高热应力和液压压力,从而确保灭菌兼容性和最清洁的工艺。可选4英寸和10英寸的滤器。- 筒式过滤器Viresolve NFR 10英寸,20英寸和30英寸过滤器非常适合于要求最大压差的工艺过程。每个筒式过滤器在制造过程中均通过完整性测试。提供多种过滤面积,以适应中、大体积的工艺要求。了解更多:更多信息,e.g., 详细参数列表,可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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  • Viresolve预过滤器可保护Viresolve Pro病毒清除过滤器,降低料液变化对过滤器性能的影响,提高了病毒清除工艺的稳定性和过滤经济性。预过滤器与除病毒过滤器一起使用能够提高载量并延长除病毒过滤器的寿命。预过滤器规格可放大,适用于现有的开发和生产工艺过程。优势:- 提高除病毒过滤器载量,降低总体过滤成本预过滤器与Viresolve Pro过滤器串联使用,能够更好的适配Viresolve Pro的高流速和高产量特点。预过滤器有效去除了料液中的堵塞成分,从而显著提高Viresolve Pro过滤器截留性能。过滤器载量的提高能够大大降低病毒清除步骤的成本- 降低料液变化对Viresolve Pro过滤器的性能影响,以提高过程稳定性预过滤器可降低料液微小变化对于过滤工艺的影响(例如:批间变化,保持时间影响,和冻融等),从而提高过滤工艺的稳定性- 保持高产量- 简单,可预测的线性放大和缩小- 合规性Viresolve预过滤器是根据ISO 9001质量管理体系的良好生产规范设计、开发和生产的滤器类型:- OptiScale - 40小规模一次性囊式过滤器OptiScale - 40一次性囊式过滤器的有效过滤面积为5 cm2。这些小型过滤器可用于工艺开发和优化以及病毒清除研究,适用于原料需求较少的小规模应用。Luer母头/Luer公头确保快速、安全的设置。- Pod一次性过滤器Pod预过滤器提供0.11 m2,0.55 m2和1.1 m2过滤面积,可从试验应用放大至生产,实现工艺灵活性和线性放大。有中试规模夹具(可配置扩展杆,最多可容纳五个1.1 m2 Pod)和工艺规模夹具(可扩展以安装5至30 Pod过滤器)可用。不锈钢夹具不会被产品弄湿,连接器是一次性塑料。借助默克新型POD系统的紧凑模块化设计,您可以提高生产率,缩短周期时间并降低成本。了解更多:更多信息,e.g., 滤器表现,详细参数列表等,可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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病毒载量检测相关的方案

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  • 3094万!云南省传染病医院2022年全省HIV病毒载量检测试剂采购项目

    [table][tr][td]项目概况 云南省传染病医院2022年全省HIV病毒载量检测试剂采购项目招标项目的潜在投标人应在云南省政府采购网(http://www.ccgp-yunnan.gov.cn/)网上获取。获取招标文件,并于2022-11-21 09:00(北京时间)前递交投标文件。[/td][/tr][/table][b]一、项目基本情况[/b]项目编号:YNJH2022190项目名称:云南省传染病医院2022年全省HIV病毒载量检测试剂采购项目预算金额(万元):3094.56最高限价(万元):3094.56采购需求:标段 是否允许进口 采购内容 数量 单位 技术需求 交货地点A 是 HIV病毒载量检测试剂-1 34000 人份 具体详见《招标文件》 云南省传染病医院 (具体地点由采购人指定)B 是 HIV病毒载量检测试剂-2 39680 人份合同履行期限:按采购人需求分批送货,在接到计划后10个工作日内交货本项目(否)接受联合体投标。

  • 病毒细菌检测仪如何评估检测数据

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]  病毒细菌检测仪如何评估检测数据,病毒细菌检测仪评估检测数据的方法涉及多个方面,主要包括数据的准确性、灵敏度、特异性、重复性以及与标准方法的对比等。以下是对这些方面的详细分析:  一、数据的准确性  与传统方法的对比:病毒细菌检测仪的检测结果应当与传统微生物培养方法或其他准确的微生物检测方法具有一致性。这是评估数据准确性的重要标准。通过对比两种方法的结果,可以判断检测仪的准确度。  标准物质检测:使用已知浓度的标准物质(如特定种类的病毒或细菌)进行检测,将检测结果与标准物质的浓度进行对比,以评估检测仪的准确性。  二、灵敏度与特异性  灵敏度:病毒细菌检测仪应能够在低微生物含量下进行可靠的检测。这要求检测仪具有较高的灵敏度,能够检测到微量的微生物。  特异性:检测仪的检测结果应主要受到目标微生物的影响,而不受其他物质的干扰。特异性是评估检测仪在复杂环境中准确识别目标微生物的能力。  三、重复性  多次检测:在相同条件下对同一样本进行多次检测,观察检测结果的稳定性。如果多次检测结果基本一致,说明检测仪的重复性良好。  变异系数:计算多次检测结果的变异系数,以量化检测结果的稳定性。变异系数越小,说明检测仪的重复性越好。  四、检测标准与范围  检测标准:参考相关国家标准或行业标准,如《GB/T 4789.2-2022 食品微生物学检验 菌落总数测定》等,评估检测仪的检测结果是否符合标准要求。  检测范围:了解检测仪的检测范围,确保其在预定范围内进行检测。超出检测范围的结果可能不准确或无法解释。  五、数据分析与解读  数据分析:使用统计软件对检测数据进行处理和分析,如计算平均值、标准差、置信区间等,以量化检测结果的不确定性。  结果解读:根据数据分析结果和检测仪的说明书或操作手册,对检测结果进行解读。注意区分合格、警告和不合格等不同的结果等级。  六、实际应用中的注意事项  样品前处理:确保样品在检测前经过适当的前处理,如稀释、培养等,以提高检测的准确性和灵敏度。  操作规范:遵循检测仪的操作规程和注意事项,确保操作过程规范、准确。  维护保养:定期对检测仪进行维护保养,如清洁、校准等,以保证其性能和稳定性。  综上所述,评估病毒细菌检测仪的检测数据需要从多个方面进行综合考量。在实际应用中,应结合具体情况选择合适的评估方法和标准。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407171141238127_4767_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 什么是中和抗体?如何检测假病毒中和抗体?

    [font='calibri'][size=13px]什么是中和抗体?如何检测[/size][/font][font='calibri'][size=13px]假病毒[/size][/font][font='calibri'][size=13px]中和抗体?[/size][/font]什么是中和抗体?中和抗体是一类与病毒结合并使病毒失去传染性的抗体。当病毒侵入人体时,浆细胞会产生病毒特异性抗体,但只有少数是中和抗体。中和机制如下:(1)改变病毒表面的构象;(2)与吸附相关的病毒表位结合,阻断其与宿主细胞受体的相互作用;(3)与病毒形成免疫复合物,易于被巨噬细胞清除;(4)当病毒表面抗原与中和抗体结合时会激活补体,从而导致病毒裂解。S蛋白(spike protein)是SARS-CoV-2病毒的主要包膜蛋白,由S1和S2亚基组成的三聚体跨膜糖蛋白,负责识别宿主细胞受体即血管紧张素转换酶2(ACE2)并介导膜融合。S1亚基上的受体结合域(RBD)直接参与宿主受体识别并介导病毒入侵。S蛋白上的受体结合结构域(RBD),被认为是病毒感染宿主细胞的关键位点和大多数中和抗体的靶标。中和抗体可阻止S1或RBD与ACE2结合,从而防止病毒侵入宿主细胞并最终阻止病毒感染(图1)。因此,S1或RBD的突变可能会导致SARS-CoV-2有较强的传染性。如何检测假病毒中和抗体?中和抗体检测试验包括病毒中和试验、假病毒中和试验和替代病毒中和试验。病毒中和试验中和抗体检测的金标准是病毒中和试验,主要包括空斑减少中和试验和微量中和试验。两种方法都使用定量的活病毒与不同稀释度的等量血清混合,并接种预先准备好的单层细胞。最后,根据空斑形成单位或细胞病变效应来评估中和抗体的效价。由于涉及到活病毒的操作,这些检测只能在生物安全三级实验室进行,极大地限制了空斑减少中和试验和微量中和试验的使用。假病毒中和试验目前,越来越多的实验室使用假病毒中和试验进行中和抗体检测。SARS-CoV-2假病毒以非致病性病毒(如复制缺陷型HIV-1)为载体,将载体病毒的包膜蛋白替换为SARS-CoV-2的S蛋白,并引入检测信号分子,例如GFP和荧光素酶。假病毒利用S蛋白的RBD结构域与ACE2结合,模拟病毒入侵的过程。中和抗体可有效抑制SARS-CoV-2假病毒感染宿主细胞(图2),并通过信号检测评估中和抗体效价。由于假病毒为一次性感染病毒,不具备自我复制能力,无生物安全危险,所以这种方法可以在生物安全二级实验室进行。替代病毒中和试验替代病毒中和试验是基于竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理,利用重组RBD蛋白与重组ACE2蛋白的结合作用来模拟病毒-细胞相互作用。样品中的中和抗体可有效阻断RBD蛋白与ACE2蛋白的结合。与病毒和假病毒中和试验相比,替代病毒中和试验更安全、更容易执行且耗时更少。中和检测服务信息由北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)为您提供,如您想了解更多关于SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒中和检测服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。具体详情可点击:https://cn.sinobiological.com/services/pseudovirus-neutralization-assay-service

病毒载量检测相关的耗材

  • 艾普拜 新型冠状病毒核酸检测 试剂盒
    新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒 (数字PCR法)—一步法反转录-digital PCR-TaqMan探针法a) 三重检测区段(同一管中,同时检测): * 新型冠状病毒的开放读码框1ab(open reading frame,ORF1ab) * 核壳蛋白(nucleoprotein,N)基因区域 * 人源内参基因 b) 试剂盒组成: * 引物和探针* 扩增预混液1 p * 扩增预混液2 p * 新冠病毒阴性质控* 新冠病毒阳性质控c) 产品特性:* 判读直接直观——结果为拷贝数* 灵敏度更高——可进行疑似阴性样本的 * 严格的质控——含样本量质控基因和实验质控品* 不限制样本来源——对抑制剂的耐受力强d) 结果展示(图1和图2):同一反应孔检测新型冠状病毒ORF1ab、N基因和人内源基因同时进行三色检测: * Blue通道检测ORF1ab基因* Green通道检测N基因 * Red通道检测人内参(样本量质控)图1:Blue-Red检测二维图(ORF1ab-人内源)图2:Green-Red检测二维图(N基因-人内源)
  • 抗病毒药物 洛匹那韦利托那韦的检测
    抗病毒药物 洛匹那韦利托那韦的检测,USP官方推荐L1色谱柱为YMC J' Sphere ODS- H80 4.6*250mm 4um;有机杂质分析L26色谱柱 YMC Pack C4 4.6*150mm 3um;洛匹那韦利托那韦中乙醇含量测定采用气相柱G16,推荐RESTEK Stabilwax-DB 0.53 mm x 30 m, 10 μm。 利巴韦林又名病毒唑、三氮唑核苷、尼斯可等,是广谱强效的抗病毒药物,可适用于呼吸道合胞病毒引起的病毒性肺炎与支气管炎,皮肤疱疹病毒感染等。常用剂型有注射剂、片剂、口服液、气雾剂等。利巴韦林副作用少,不良反应发生率低,曾在2003年抗击非典期间广泛应用,本次新冠肺炎疫情中成为轻、中度患者的治疗入选药物。参照中国药典2015版第二部P486:照高效液相色谱法,采用磺化交联的苯乙烯一二乙烯基共聚物的氢型阳离子交换树脂为填充剂,对利巴韦林含量进行测定。可参考USP标准,采用L1色谱柱YMC-PackODS-AQ(4.6*250mm,5um)对利巴韦林有机杂质进行测试。北京绿百草科技助力新型冠状病毒药物的研发,需要色谱柱的老师请联系北京绿百草科技!众志成城、抗击疫情、武汉加油!中国加油
  • 兰花病毒检测试纸条
    可以同时检测CyMV,ORSV两种病毒,详情请咨询13810167620 可以同时检测CyMV,ORSV两种病毒,详情请咨询13810167620 可以同时检测CyMV,ORSV两种病毒,详情请咨询13810167620

病毒载量检测相关的资料

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  • 【热点应用】高级多检测器SEC表征腺相关病毒载体的方法
    #本文由马尔文帕纳科应用专家冯慧庆供稿# 基因治疗是生物制药行业中一个快速增长的领域,通过基因治疗可实现疾病的治疗或预防。其中,重组腺相关病毒(rAAV)是目前基因治疗领域研究较多的一类病毒载体。腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是微小病毒科(Parvoviridae)家族的成员之一,一般,研究中采用的重组腺相关病毒载体(Recombination adeno-associated virus, rAAV)是在非致病的野生型AAV基础上改造而成的基因载体,由于其种类多样、免疫原性极低、安全性高、宿主细胞范围广、扩散能力强、体内表达基因时间长等,rAAV被视为最有前途的基因研究和基因治疗载体之一。目前,rAAV的准确定量分析和表征的难度是阻碍基因治疗快速发展的关键因素。我们常常需要对rAAV进行综合全面表征,比如衣壳数量、实心率、颗粒尺寸、聚集体比例等。传统情况,rAAV滴度和病毒载量采用ELISA、ddPCR、AUC和EM等技术进行测量。但这些方法通常费时费力,而且精确度不高。本文通过GPC/SEC和多角度动态光散射(MADLS)两种分析技术分析rAAV5样品,展示了快速、准确和可靠地定量测量AAV的病毒滴度(AAV Titer)和实心率(% full AAV)的方法。 01仪器参数OMNISEC GPC/SEC多检测器系统非常适合于生物医药行业,可用于全面表征rAAV样品。OMNISEC包含一个示差折光检测器(RI),紫外线全波长阵列检测器(UV-Vis 190-900 nm)和光散射检测器,仅需一次进样,可精确测量绝对分子量、聚集体比例、病毒滴度和实心率。与传统HPLC不同,测量过程不依赖柱保留体积,也不需要一系列标样进行色谱柱校正。图1显示了使用OMNISEC测量的CQA关键质量参数。02检测方法我们采用Empty和Full rAAV5两个样品作为分析案例。Full rAAV5 载有已知分子量为785 kg/mol的PFB-GFP ssDNA。经qPCR和ELISA测量方式可知,该样本的病毒滴度为2.5x1013。采用色谱柱P4000和P3000串联,对rAAV样品的进行色谱分离。由OMNISEC软件采集分析测试结果,其中硬件系统包含OMNISEC RESOLVE(包含泵、自动进样器和柱温箱)和OMNISEC REVEAL(包含示差、UV/PDA和直角90°/小角7°光散射检测器)。样品经过分离洗脱后,使用共聚物分析方法确定样品两种不同组分的浓度和分子量。计算方法如下:其中,ConcCapsid是衣壳浓度(mg/mL),NA是阿伏伽德罗数,Mwcapsid是衣壳的分子量(g/mol),ConcDNA是DNA浓度(mg/mL),MwSeqDNA是来自序列的ssDNA的分子量。因此,通过计算出的颗粒浓度,可以很容易地得出样品实心率的百分比。 03检测结果案例一:图2显示了Empty rAAV5的三检测色谱图。RI信号由红色曲线表示,260 nm紫外信号由紫色曲线表示,直角光散射(RALS)信号由绿色曲线表示。样品包含四个部分:单体峰保留体积(RV)在12.5ml,碎片在16ml ,二聚体在10.5ml ,聚集体在8.5ml 。使用共聚物分析方法,可以得到表1结果。单体的分子量为3.84×106g/mol。衣壳的理论分子量为3.8×106g/mol,证实分析结果与预期相符。MW/Mn为分子量分布,描述了样品的分散性,单体和二聚体的值接近1,而聚集体和片段均显着高于1,表明在同一峰内有多个不同分子量的组分。Fraction of Sample表示样品组分百分含量,单体所占百分比为84.7%。Fraction of Protein显示了样品中衣壳的百分比,单体包含99.8%的衣壳。这证实了样本确实是Empty rAAV5。最后Empty rAAV5样品总滴度为5.91x1013Vp/ml。 案例二:第二个样品Full rAAV5的三检测器色谱图如图3所示。图中显示了与Empty rAAV5截然不同的色谱峰。分析色谱图可以看出,只包含两个不同的组分,其中单体峰,大概12.5ml RV处,包含Full 和Empty rAAV5的混合物,而聚集体出现在8ml RV处。测试结果见表2。对于主体的单体峰,计算出其混合物分子量为4.49×106g/mol,其中86%为衣壳。rAAV5的蛋白质组分的分子量为3.89×106g/mol,这与表1中Empty rAAV5 的数据一致。单体是总体的93.2%,样本的总滴度为7.48x1013VP/ml。其中单体包含78% Full rAAV5,22% Empty rAAV5。需要注意的是,这种分析方法假设样品要么是Full ,要么是Empty ,忽略部分装载或过度装载情况。Zetasizer Ultra纳米粒度及电位仪可以使用MADLS方式快速确定病毒滴度。从OMNISEC获得的数据与Zetasizer Ultra的粒子滴度进行了比较,两种技术之间有很好的相关性,见图4。另外,本文将Full rAAV5和Empty rAAV5以确定比例混合,来对Full rAAV5样品进行分析。表3显示了每个样品的预期值和实际值Full rAAV百分比。图5显示了期望值和实际值之间有很强的相关性,证实了OMNISEC确定样品实心率结果的可靠性。为了进一步评估OMNISEC对rAAV样品准确表征能力,我们进行了rAAV5样品的热应力稳定性研究,同时,基于ZS Ultra对聚集体的极高灵敏度,我们利用了ZS Ultra表征rAAV5聚集体的微小变化。测试条件是将rAAV5样品置于25oC到80oC之间进行测试。在不断加热过程中,在每个温度下测量rAAV5样品的粒径。在25oC和35oC之间,没有观察到粒径的变化。从35oC开始,可以观察到粒径开始增大,这表明样品开始发生变化(图6A)。30oC和45oC下的数据比较清楚地显示了这些样品之间的大小差异(图6B)。我们选择45oC条件,对OMNISEC进行进一步稳定性研究。将rAAV5样品在稳定在45oC,分别在2min 、5min、10min和15min后,取样品到OMNISEC上测试。图7色谱叠加图显示样品发生了明显的变化,聚集体百分含量增加,单体浓度含量降低。表4显示MW在此潜伏期内保持稳定,单体峰中的AAV百分比也保持稳定。结论:在这项研究中,我们展示了OMNISEC和Zetasizer Ultra在综合分析表征rAAV5样品的能力,以及将两者联合使用的应用价值。 OMNISEC多检测SEC系统将示差折光检测器、紫外全波长检测器、光散射检测器集成一体化设计,具有更高的灵敏度和准确度,通过一次进样分析,可提供各种血清型AAV样品的绝对分子量、衣壳大小、滴度、实心率、聚集体、片段和样品稳定性等关键质量属性。虽然这些参数中很多都可以使用传统的生物化学方法来确定,但OMNISEC提供了更为简单、可靠的方法,正逐渐成为一种表征分析AAV通用的技术工具。
  • naica® 微滴芯片数字PCR助力华盛顿大学科学家在同时监测HIV病毒载量和检测SARS-CoV-2感染研究
    COVID-19大流行中断了对艾滋病病毒感染者的常规护理,严重影响了对艾滋病病毒感染者的诊断和治疗。如果感染SARS-CoV-2, 艾滋病病毒感染者的发病率和死亡率会增加。据报道,近日在南非发现新冠新型变异毒株Omicron可能由艾滋患者体内进化而来。因此密切监测HIV血浆病毒载量(VL)并筛查SARS-COV-2感染就显得尤为迫切。近日,来自华盛顿大学的Gaurav K Gulati和Nuttada Panpradist等科学家在medRxiv平台上提交文章《Inexpensive workflow for simultaneous monitoring of HIV viral load and detection of SARS-CoV-2 infection》的预印本。通过开发一种新的工作流程,同时定量艾滋病毒载量和检测SARS-CoV-2。文中使用naica微滴芯片数字PCR系统对RNA浓度进行精准定量,用于新方案的评估。文章中作者基于Boom方法开发了一种内部RNA提取方法,从血浆、鼻腔分泌物(NS)或二者混合物中进行RNA提取,对HIV长末端重复序列(LTR) 、SARS-CoV-2核衣壳基因区域(N1、N2)和人类核糖核酸酶 P(RP)进行RT-qPCR分析,估计血浆病毒载量并对HIV/SARS-CoV-2状态进行分类(HIV为病毒学失败或抑制,SARS-CoV-2为阳性、假定阳性、阴性或不确定)。首先,作者将包含HIV LTR检测扩增区域或N1/N2检测的DNA片段作为RNA生成的起始DNA构建体。使用 T7 RNA聚合酶将DNA构建体转化为RNA。为了对体外转录的RNA浓度进行精准定量,作者使用naica微滴芯片数字PCR系统对RNA浓度进行绝对定量(图1)。从图中可以看出通过检测OD值并不能对RNA浓度进行精准定量,因此最终利用数字PCR的结果对RNA的浓度进行了校正。图1:数字PCR量化体外转录的RNA标准浓度随后将合成的不同浓度的HIV RNA与血浆样本进行混合构成人造血浆样本,合成的不同浓度的SARS-CoV-2 RNA与NS进行混合构成人造NS样本,分别采用内部提取方法和标准提取方法对血浆样本中HIV、NS样本中SARS-CoV-2和血浆和NS混合样本中HIV和SARS-CoV-2进行灵敏度检测。同时采用133个临床样本,其中40个血浆样本(30个HIV血清阳性),67个NS样本(31个SARS-CoV-2阳性)和26个血浆和NS混合样本(26个HIV阳性,10个SARS-CoV-2阳性)进行评价(图2)。结果表明:内部提取对HIV的检测限为200拷贝/mL,对SARS-CoV-2的检测限为100拷贝/mL。对于血浆样本,两种方法测量的HIV病毒载量水平呈正相关(人造样本的R2:0.98, 临床样本R2: 0.81)。在对NS样本使用内部提取方法时,排除不确定结果,与标准提取方法相比,95%的一致性(25个阳性,6个假定阳性和31个阴性)。对于血浆和NS混合样本,两种方法测量的HIV病毒载量水平呈正相关(人造样本的R2:0.98, 临床样本R2: 0.71)。SARS-CoV-2检测结果显示阳性和阴性分类是100%一致性。图2:使用两种不同提取方法从血浆和NS混合样本中共同提取的RNA中获得的HIV LTR 和SARS-CoV-2 Cq值的比较.(a)比较标准与内部提取方法性能的实验设计方案。(b)来自内部提取方法的SARS-CoV-2 LTR、N1、N2和人 RP (阴性样本的对照)测定的Cq值。(c)基于两种提取方法的结果对样本进行分类。通过两种方法提取的样本中测得的(d)LTR、(e)N1和(f)N2的散点图。综上所述,作者开发的内部提取方法可以从单独的血浆或血浆和NS混合样本提取RNA来确定艾滋病病毒感染者是否存在SARS-CoV-2感染,从而有可能简化HIV管理和SARS-CoV-2检测。将这两种病毒的检测结合起来可以有效的减少COVID-19对艾滋病毒治疗的影响。medRxiv是由耶鲁大学(Yale University)、非营利研究和教育机构冷泉港实验室(The Cold Spring Harbor Laboratory,CSHL)和BMJ出版集团(英国医学会下属专业医学出版机构,British Medical Journal)创建的,服务器由CSHL拥有和操作。medRxiv为研究人员在期刊出版前分享、评论和接收有关其工作的反馈提供了一个平台。medRxiv旨在提高科学发现的开放性和可及性,加强研究人员之间的协作,记录想法的来源,并通过更及时地报告已完成的研究,为正在进行和计划的研究提供信息。原文:https://doi.org/10.1101/2021.08.18.21256786naica六通道微滴芯片数字PCR系统法国Stilla Technologies公司naica六通道微滴芯片数字PCR系统,源于Crystal微滴芯片式数字PCR技术,自动化微滴生成和扩增,每个样本孔可实现6荧光通道的检测,智能化识别微滴并进行质控,3小时内即可获得至少6个靶标基因的绝对拷贝数浓度。
  • 793万!新疆维吾尔自治区疾控中心艾滋病检测试剂-病毒载量检测试剂项目
    一、项目基本情况项目编号:XJHY-JKZX-BDSJ-01项目名称:新疆维吾尔自治区疾控中心艾滋病检测试剂-病毒载量检测试剂项目采购方式:公开招标预算金额(元):7934400最高限价(元):/采购需求: 标项名称:新疆维吾尔自治区疾控中心艾滋病检测试剂-病毒载量检测试剂项目 数量:1 预算金额(元):7934400 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:采购病毒载量检测试剂一批,具体详见采购文件。 备注:合同履约期限:标项 1,具体详见采购文件。本项目(否)接受联合体投标。二、获取招标文件时间:2024年02月22日至2024年02月29日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59(北京时间,法定节假日除外)地点:政采云平台线上方式:供应商登录政采云平台https://www.zcygov.cn/在线申请获取采购文件(进入“项目采购”应用,在获取采购文件菜单中选择项目,申请获取采购文件)售价(元):0三、对本次采购提出询问,请按以下方式联系1.采购人信息名 称:新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心地 址:碱泉一街380号联系方式:0991-26230102.采购代理机构信息名 称:新疆华域建设工程项目管理咨询有限公司地 址:乌鲁木齐市五星北路194号联系方式:18899517090、176909709993.项目联系方式项目联系人:张伟、杨猛、马成武电 话:18899517090、17690970999

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