电转染仪原理

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电转染仪原理相关的仪器

  • Neon NxT 电转染系统:可靠的转染性能使用高效、快速、简单、灵活的紧凑型电转染系统,节省宝贵的研究时间,并保护珍贵的样本。Invitrogen Neon NxT 电转染系统采用专有移液器吸头技术,再结合经过简化的工作流程和灵活操作,有助于减少样本损失,降低污染风险,减少操作步骤,让您全方位管控各种实验。Neon NxT 电转染系统的优势极高的转染效率和细胞活率—可转染具有挑战性的细胞株,转染效率高、细胞活率高 提高基因编辑效率—专有的Neon NxT基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能根据需要灵活变通—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数节省宝贵的研究时间—利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞节省珍贵样本—尽量减少样本输送造成损失和污染的风险使用该转染系统对多种细胞株进行转染时,均可实现极高的转染效率和细胞存活率Neon NxT 电转染系统是一款电转仪,在极难转染的细胞(包括免疫细胞、原代细胞和干细胞)中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞存活率测试。 图1 .Neon NxT 电转染系统的转染效率。 使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。报告的转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比 (n = 3) 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应中进行电转染。图 2.Neon NxT 系统进行电转染后的细胞存活率。 在使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。转染细胞使用 Invitrogen SYTO Red 死细胞染色剂染色,并通过 Invitrogen ATTUNE NxT 流式细胞仪评估细胞存活率。报告的细胞存活率 (%) 为 3 次测量的平均值。 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应液中进行电转染。图 3. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。. 在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。提高基因编辑效率基因编辑在进一步了解人类健康和疾病方面大有可为。在基因编辑工作流程中,一个关键而又具有挑战性的步骤是将 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP)、DNA 和 RNA 分子有效地递送到所选择的细胞系中,也就是所谓的转染。如上所述,电转是最广泛使用的递送方法,因为它能够实现高转染效率,即使是难以转染的细胞也不例外。与 Neon NxT 电转染系统配合使用时,我们的基因编辑试剂和 Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能,使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞(包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞)的基因敲除或基因敲入实验 (图 3)。为什么 Neon NxT 电转染系统可以很好地替代电转比色皿?与标准比色皿电转染腔室不同,Neon NxT 电转染系统使用专有的生物兼容移液器吸头腔,可产生更均匀的电场。这一设计可以更好地维持生理状态,与常规电转染相比,细胞存活率更高。形成更加均匀的电场在整个电转染腔室内维持稳定的 pH 值产生极少热量生成较少离子减少细胞遇到的剪切力图 3.Neon NxT 移液器吸头相对于标准电转比色皿的优势。 专有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸头展示了成熟可靠的毛细管电转染技术,与(B) 电转比色皿相比具有重要优势。针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数电转染参数可定制使用 Neon NxT 电转染系统,您可以精确控制对实验至关重要的参数,而不会将宝贵的时间浪费在调整不准确的参数上。您可以利用该转染系统修改以下参数:脉冲电压脉冲宽度脉冲次数细胞类型缓冲液类型递送物质类型对各种递送物质、细胞类型和细胞密度均可通用将 DNA、RNA 或蛋白质递送到多种哺乳动物细胞中,每次反应可灵活转染 2 x 10⁴ 至 6 x 10⁶ 个细胞。使用 TransfectionLab 云端 APP 轻松制定计划Invitrogen TransfectionLab 是一款云端 APP,可以通过Thermo Fisher Connect平台进行访问,能够根据每个电穿孔实验,从设计阶段开始量身定制分步指南。您可以远程设置多达 384 个样本的多个孔板布局,通过已经连接网络的 Neon NxT 系统,您可以直接访问 APP 中保存的任何方案或孔板布局。利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞经简化的电转染工作流程Neon NxT 电转染系统的工作流程经过简化,易于操作和执行,用户几乎不需要进行培训,提高了结果的一致性和可再现性。使用该转染系统可轻松完成电转染过程:首先,将细胞和质粒混合物加入 Neon NxT 移液管吸头中。其次,插入移液器架,按下“电穿孔”。最后,将转染细胞转移至培养皿中。由于转染在移液器吸头内进行,所以 3 个简单的步骤即可完成转染操作:吸液、电转染、分液。该电转染系统能够缩短处理时间除了简化工作流程外,与常规电转染系统相比,我们专有的电转染技术可将总处理时间缩短至 10-15 分钟,因为转染在 Neon NxT 移液器吸头内进行。一个缓冲液试剂盒即可用于多种哺乳动物细胞类型解决了根据细胞株寻找缓冲液试剂盒的问题。我们使用一个缓冲液试剂盒简化了这一过程,该试剂盒可适配 150 多个哺乳动物细胞株。我们建议使用电压低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 R 和电压较高的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 T。节省时间的孔板设置使用 Neon NxT 电转染系统的直观用户界面,提前设置整个孔板,而不用“快速启动 (Quick Start)”功能调整不同样本之间的电转参数。在每个样本进行电转染时,可监测屏幕上的进展情况,在 20 分钟内最多可完成 24 个样本的电转染。
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  • NEPA21高效基因转染仪------适用于体外(In Vitro)和活体(In Vivo)类器官转染,让转染更简单、更高效! NEPA21高效基因电转染仪 采用全新设计的电转程序,专门针对难转染细胞、微藻、受精卵、离体组织、动物活体等的高效转染利器,配合专利的电压衰减(Voltage Decay)设计,NEPA21可在获得高转染效率的同时,提高细胞存活率。具有高转染效率及高细胞存活率的优点。 NEPA21电转染仪主要特点:全新设计的电转程序特别适用于难转染细胞、离体组织、动物活体的转染适用于胚胎基因编辑高转染效率、高细胞存活率电转程序各项参数可见、可调,适用性广不需要特殊的转染试剂盒辅助,运维成本低 NEPA21电转染仪应用范围:悬浮转染适用范围:原代细胞、干细胞、以及各种难转染细胞(如免疫细胞、血液细胞等)贴壁转染适用范围:可以直接对贴壁细胞进行转染,省去了细胞消化、再贴壁的步骤(对提高某些种类细胞的存活率十分重要)! 离体组织转染 适用范围:组织切片、脑切片、器官、胚胎等活体转染适用范围:大脑、视网膜、肌肉、皮肤、肝脏、肾脏、睾丸等
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  • 电转染仪X-Porator H1 400-860-5168转4279
    X-Porator H1 电转染仪产品特点*改进升级,质量性能大提升历经一年,完成电子及结构硬件改进21项,软件升级17版,改进41项*高转染率和高细胞活率自主专利钵铂合金电极杯和HIDEN针电极技术,低压转染*钛铂合金电极杯稳定耐用,不易产生金属离子,降低细胞毒性*采用HiDEN技术针电极高密度矩阵针电极,实现细胞培养多孔板直接转染*参数可见可调可配合壹达流式电转仪进行参数优化与验证*无线操控使整个转染过程无需离开超净台,有效降低样品污染的风险*优质售后短货期,专业技术团队,完善售后服务*高性价比的设备和耗材技术参数钛铂合金材质电极杯惰性贵金属材质电极,耐腐蚀性强,电化学性质稳定,可重复性好,可反复使用30-50次;在电转染过程中,电极不易产生金属离子而影响细胞活性。高精度控制电路采用微电子技术以及改进升级后的电控系统,输出更稳定、准确的电压波形。HiDEN技术壹达自主研发的高密度矩阵针电极专利技术,在较低电压时即可产生足够强度的均匀电场,提高转染效率。此外,HiDEN技术基本消除了传统电极的阴极效应,避免产生大量氢氧根离子,进一步减小对细胞的损伤,显著提高细胞活率。结果节选设备耗材
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电转染仪原理相关的方案

  • 细胞转染实验
    外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。?利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性,因此脂质体与质粒的比例,细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题,通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
  • 细胞转染的常见问题及解决方案
    影响转染效率因素很多,主要因素有细胞培养物、血清、载体构建、DNA质量以及转染技术等。
  • 聚乙烯亚胺转染人神经母细胞瘤细胞效果的影响因素
    探讨聚乙 烯亚胺( P E I ) 转染人神经母细 胞瘤细 胞 ( S H— S Y S Y ) 效果的影响因素。方法 利用 电泳 阻滞 实验测定 P E I 与 D N A形成 复合 物时所需的 比例 , 通 过 M r r 法测定 P E I 对 s H— S Y 5 Y细胞 的毒 性 , 采用流式细胞术检测细胞 转染效率 , 探 索转基 因次数 对 P E I 转基 因效率的影 响。 结论: P E I 是 有效的体外真核细胞转 染剂 , 可作为 S H— S Y 5 Y的基 因载体。

电转染仪原理相关的论坛

  • 电转染影响因素5

    6、电转染试剂的选择电击会对细胞造成一定程度的伤害,在转染试剂的选择上要注意,应选择具有细胞膜修复成分的电转染试剂,如Entranster-E,将电击对细胞的损伤降到最低。

  • 电转染影响因素1

    1、 电场参数电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以采取较为简便的间接法。文献显示存活率在50%左右的电场参数为理想参数,故可间接测定存活率来确定最佳场强值。

  • 电转染影响因素2

    2、脉冲过程1)脉冲波形脉冲波形主要分为两种:1、方波脉冲;2、指数递减波脉冲。方波脉冲是指:电压瞬间升至预设电压,保持电压放电,然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲,有较高的转染效率和细胞存活率。指数递减波脉冲是指:先对电容充电,然后让电容完全放电,其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。2)脉冲时间脉冲时间的选定主要取决与脉冲波形。在方波脉冲中,脉冲时间可直接设定。在指数递减波脉冲中,脉冲时间是指电压衰减至初始电压1/3时所用的时间,等于电容(C)与电阻(R)的乘积,单位是ms。在参数优化中,增加电压应当降低脉冲时间,而减小电压则应当增大脉冲时间。3)脉冲次数一般而言,对于大多数细胞类型都选择单次脉冲。而在有些情况下可能会用到多次脉冲,因为低电压、短脉冲时间、多次脉冲可有效避免细胞损伤。多次脉冲建议中间间隔1min。

电转染仪原理相关的耗材

  • PEI转染试剂
    本产品为阳离子聚合物类型转染试剂,具有安全性高、细胞毒性小、操作简单、转染效率高等特点。产品特点►操作简单、转染效率高►安全性高、细胞毒性小使用说明(下述步骤以6孔板为例) 1.提前一天进行细胞铺板,使转染时细胞密度达到80%左右 2.转染前1-4小时去除原有培养基,每孔加入2.4ml新鲜完全培养基(37℃预热,抗生素和血清不影响转染效率) 3.根据下表体系,在不含血清和抗生素的培养基中配制A/B液,充分吹打混匀:ABDNA3μgPEI9μl培养基127μl培养基127μl 4.将B液加入A液中,轻轻吹打混匀,室温静置30min 5.将混合液逐滴加入到细胞中,前后左右轻轻摇晃混匀,放入37℃培养箱培养 6.转染后16-20h,去除原有培养基,每孔加入2-3ml新鲜完全培养基(37℃预热) 7.若质粒可表达荧光蛋白,转染后24h可观察到荧光信号,大部分细胞在72h表达达到高峰数据展示图:所示细胞按照本说明书进行GFP质粒转染,质粒转染16小时后荧光显微镜下拍照记录转染效果
  • BTX电极杯
    BTX 专业电极杯,专为您的电转化/电转染实验设计,带给您最佳实验效果和实验安全性。 产品特点: 电极间距为1mm, 2mm和4mm的三种型号 附赠移液管一只,方便取样 电击杯帽采用不同颜色设计,便于区分gamma射线消毒灭菌医用等级聚碳酸酯制成可匹配绝大多数电穿孔仪使用方便单手脱卸的圆帽设计电极经过精细抛光制成
  • 化工原理实验仿真软件CES (以北化装置为原型)
    流程简述: 化工原理是化工、生物、食品、制药等专业必修课。化工原理实验是大部分学校必做的实验。因此化工原理实验被列为重点实验内容之一。东方仿真使用自主开发平台,利用动态数学模型实时模拟真实实验现象和过程,通过3D仿真实验装置交互式操作,产生和真实实验一致的实验现象和结果。每位学生都能亲自动手做实验,观察实验现象,记录实验数据,验证公式、原理定理。另外,该系统还配备开放的标准实验思考题生成器。该系统分为教师站和学生站。通过网络,教师站上的监控和管理程序方便地对学生站运行的实验仿真软件进行实时的监控和管理。本仿真软件以北京化工大学实验装置为主,兼顾华东理工大学的实验装置。包括了所有典型的化工原理实验装置。培训工艺:1.1 、离心泵特性曲线测定1.2 、流量计的认识和校核1.3 、流体阻力系数测定1.4 、传热(水-蒸汽)实验1.5 、传热(空气-蒸汽)实验1.6 、精馏(乙醇-水)实验1.7 、精馏(乙醇-丙醇)实验1.8 、吸收(氨-水)实验一1.9 、吸收(氨-水)实验二1.10 、丙酮吸收实验1.11 、干燥实验1.12 、板框过滤实验建议配置:学员站:CPU:奔腾E2140或更强的CPU(或AMD Athlon X2 4000)内存:1G以上显卡和显示器:分辨率1024x768以上硬盘空间:至少1G剩余空间操作系统:Windows XP SP2/SP3教师站:CPU:奔腾E5200或更强的CPU(或AMD Athlon X2 5000)内存:1G以上(推荐2G以上)显卡和显示器:分辨率1024x768以上硬盘空间:至少1G剩余空间操作系统:Windows Server 2003 SP2网络要求:网络必须稳定通畅(统一式激活)

电转染仪原理相关的资料

电转染仪原理相关的资讯

  • 华粤行金秋十月将在京举办基因转染技术研讨会
    NEPA21高效基因转染系统技术研讨会【北京站】 经过近30年的发展革新,电转染已成为基因的功能研究领域中不可或缺的技术手段。华粤行仪器有限公司作为中国独家代理商,携手来自日本的NEPA GENE公司举办巡回技术研讨会,介绍该领域的最新进展。诚邀各位专家学者莅临指导! NEPA GENE公司专业研发、生产细胞电转染仪及电融合仪等,其生产CUY21系列电转染仪在研究领域中久负盛名,已被数百篇文献引用,其中不乏高水平杂志的文章,如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。 2011年,NEPA GENE推出新一代全能型高效基因转染系统NEPA21。其特点有: 全新设计的电转程序, 特别适用于难转染细胞、离体组织或动物活体的转染, 高转染效率、高细胞存活率 电转程序各项参数可见、可调,适用性广 不需要特殊的转染试剂盒辅助,运维成本低 时间:2011年10月10日下午13点 地点:北京外国专家大厦二层第5会议室(朝阳区北四环中路华严北里8号院) 演讲人:早川靖彦 先生(NEPA GENE株式会社社长 暨首席技术专家 ) 宫村敦 先生(NEPA GENE 海外营业部经理 暨产品应用专家) 主持人:罗菁 博士(华粤行仪器有限公司 产品经理) 举办方:华粤企业集团有限公司&mdash 北京分公司 联系电话:总部 020-34821111 北京 010-58772915
  • Invitrogen转染新技术产品"新品半价优惠"
    Invitrogen&trade 转染新技术产品"新品半价优惠" 您正在做转染实验吗? 您还在为转染实验的细胞毒性大、转染效率过低、蛋白表达受限而苦恼吗? 作为全球转染技术的领导者,Invitrogen公司为您准备了转染实验全套解决方案,除了Lipofectamine&trade 2000、293fection 等经典转染试剂,我们还带来了最创新的技术及产品,快来试一试心仪的产品吧!!! Invitrogen&trade 转染新技术产品介绍: Lipofectamine&trade LTX & PLUS&trade 试剂&mdash 贴壁细胞推荐转染试剂 Lipofectamine&trade RNAiMAX 转染试剂&mdash 专用于siRNA 转导的转染试剂 Neon&trade 电转染系统&mdash 高效介导质粒 及siRNA转染入原代细胞、干细胞及其他难转染细胞 转染实验相关技术及产品选择指南 Invitrogen新技术转染产品 半价优惠 促销时间:即日起至2011年6月30日 购买新新技术转染产品-Lipofectamine LTX及RNAIMAX的新品小包装产品,即可享受半价优惠,(每个实验室限购2支)促销列表: 货号 产品描述 Size 报价(元) 促销价(元) 13778100 LIPOFECTAMINE RNAIMAXh 0.1ml 702 351 A12621 LIPOFECTAMINE LTX AND PLUS SAM 0.1ml 515 258 注: 每种产品,每个实验室限购两支,您还可以通过填写Invitrogen转染产品试用&Demo申请表,获取免费试用新技术转染产品的机会(截至日期2011年7月30日)。
  • NEPA21进行细胞悬浮/贴壁(原位)转染均获高效
    2012年1月,华粤行仪器有限公司(我司)与合作实验室(陕西东澳生物科技有限公司)联合对NEPA21高效转染系统进行测试,成功进行了Hela细胞悬浮转染及U87细胞悬浮和贴壁转染,均获得很好的效果,客户对NEPA21给予了较高的评价。 实验证明,在国内实验条件下,可重复获得NEPA GENE公司(日本)细胞数据库中提供的高转染效率及高细胞存活率结果。 实验亦证明,细胞在悬浮和贴壁状态下使用NEPA21进行转染,均可获得高转染效率。 技术资料: 1. 关于悬浮转染: 使用电转染仪进行细胞转染时,常用的转染方式是用电转杯转染,此时细胞处于悬浮转染下,细胞可与DNA溶液360度接触,转染效率最好。 2. 关于贴壁转染 有些原代细胞是终末分化的,如原代神经元细胞、乳鼠心肌细胞等。这些细胞一旦从活体组织中分离出来贴壁培养,便不可消化传代,也就无法实现悬浮状态的转染。针对这种情况,NEPA GENE开发了适用于普通细胞培养板的贴壁转染电极。 由于贴壁状态下,细胞不能与DNA溶液360度接触,因此通常认为,细胞在悬浮状态下转染,容易获得更好的转染效率。但实际上,NEPA的贴壁(原位)转染电极效果也很显著。

电转染仪原理相关的试剂

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