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我们知道噬斑法和TCID50法检测的是感染性病毒的浓度，并不体现病毒的总浓度（总颗粒数）。现在有越来越多的研究显示，很多病毒在包装过程中由于缺失基因组，形成空心病毒。或者在合成过程中，基因的突变或者缺陷导致蛋白的突变，造成病毒没有感染性。而这些非感染性病毒的数量在总病毒数量中所占的比例意义重大，能影响体内和体外的研究结果。所以快速的病毒总浓度定量方法是非常必要的。流感疫苗的生产中，从鸡胚培养来源的流感疫苗在使用专门的试剂裂解后，收获免疫原蛋白HA。非传染性的流感病毒（被证实含有衣壳蛋白和部分的基因组）在裂解后同样能贡献免疫原蛋白HA。所以总病毒浓度的评估对流感疫苗的生产意义重大。此外，总病毒浓度的定量也有助于减毒疫苗的生产。减毒疫苗是复制缺陷的非感染性的但是能引发机体免疫反应的一种疫苗。减毒疫苗既然不能复制，所以就不会引起细胞病变反应，而CCID50法则以细胞病变反应为判断基准。在某种意义上来说，所有的减毒疫苗是由非感染的病毒颗粒构成，因此，采用总病毒浓度定量的方法是减毒疫苗唯一可靠的方法。在动物疾病的预防和治疗中，采用感染性方法测得病毒滴度来决定注射的剂量，往往忽视了非感染性病毒颗粒在动物免疫反应中的作用以及最终的药剂效果。比如噬斑法测得病毒滴度为1E6 pfu,但是总病毒浓度是1E8 vp/ml，在每一个感染颗粒中，有100个颗粒没有被计数，最终可能影响动物治疗结果。考虑到非感染性病毒颗粒的生物学作用以及在疫苗生产的作用，感染性病毒颗粒和总病毒颗粒的定量对于病毒疫苗的生产和研究都至关重要，而病毒计数仪在10min内能快速获得病毒总浓度，所以能广泛应用于在病毒的研究和生产中。
一、消毒原理 漂白粉、液氯、次氯酸钠消毒原理相同，均是通过生成次氯酸进行消毒。HOCl分子比较小且不带电荷，较容易渗入细胞壁，氯与细菌酶系统发生不可逆反应，细菌由于酶的钝化而被灭活。次氯酸具有氧化性，对水体中污染物有一定的去除作用。 二氧化氯的有效氯含量为263％，是强氧化剂，与其他氯系消毒剂作用机理不同，对水体中污染物有很强的去除作用。ClO2对细胞壁有较强的吸附穿透能力，可有效地氧化细胞内含琉基的酶，还可以快速地抑制微生物蛋白质的合成来破坏微生物。 臭氧也是强氧化剂，其杀菌机理是破坏和氧化微生物的细胞膜、细胞质、酶系统和核酸，从而使细菌和病毒迅速灭活。二、消毒剂使用特点比较 (1)漂白粉：有效氯含量为65～70％，价格昂贵，定比投加困难，易造成二次污染。(2)液氯：含有l00％的有效氯，杀菌力强，价格便宜，是一种较为成熟的消毒剂。但使用液氯作为消毒剂，不同的水质、水温、pH值、菌种以及接触时间对消毒效果均有影响，而且必须保证定比投加，否则投量不足时不能保证处理效果，投量过多则造成二次污染。在使用方面液氯存在较大的潜在危险性，必须有一套完整的监控系统，氯瓶在贮存、运输、保养上也不方便，使其在城市及人口稠密地区受到限制。(3)臭氧：消毒效率高，基本不受pH值和温度的影响、杀菌力强、对降解各种有机毒物、除色除嗅、除味，改善水质效果较好。但在消毒处理之前需要对原污水进行较严格的预处理，处理成本高，因此较难推广应用。(4)次氯酸钠：在适宜的浓度时，消毒效果与液氯相同。(5)二氧化氯：是新一代水消毒剂，具有广谱的强氧化能力和杀菌消毒效果，杀菌快速，消毒效力持久，且不会生成氯代有机物。使用化学法发生器现场制备使用，处理成本低。 当然在投放消毒剂的过程中为了避免消毒剂投放过量对人体造成伤害，就需要安装余氯在线检测仪对水中余氯值进行实时检测。根据不同的消毒剂成分和安装需求的不同可选用CL-8000、CL-8100、CL-7600和DOZ-7600等余氯在线检测仪表进行余氯值的实时检测和加药控制，并可以通过上海诺博仪器仪表的云平台，实现远程查看实时数据和历史记录。[img=,690,340]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806301521244374_8144_3088089_3.png!w690x340.jpg[/img][img=,690,451]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806301521375287_7888_3088089_3.png!w690x451.jpg[/img]
常用化学消毒剂的选择化学消毒剂种类繁多，人们在消毒实践中，总要选择比较理想的化学消毒剂来使用。作为一个理想的化学消毒剂，应具备以下几个特点：（1）杀菌谱广；（2）使用有效浓度低；（3）杀菌作用速度快；（4）性能稳定；（5）易溶于水；（6）可在低温下使用；（7）不易受各种物理化学因素影响；（8）对物品无腐蚀性；（9）无臭无味，无色；（10）毒性低，消毒后无残留毒害；（11）使用安全，不易燃烧；（12）价格低廉；（13）运输方便；（14）可大量生产供应。目前的化学消毒剂中，没有一种能够完全符合上述要求的。因此在使用中，只能根据被消毒物品性质、工作需要及化学消毒剂的性能来选择使用某种消毒剂。 1 戊二醛 戊二醛属高效消毒剂，具有广谱、高效、低毒、对金属腐蚀性小、受有机物影响小、稳定性好等特点。适用于医疗器械和耐湿忌热的精密仪器的消毒与灭菌。其灭菌浓度为2%，市售戊二醛主要有：2%碱性戊二醛和2%强化酸性戊二醛两种。碱性戊二醛常用于医疗器械灭菌，使用前应加入适量碳酸氢钠，摇匀后，静置1小时，测定pH值。PH在7.5-8.5时，戊二醛的杀菌作用最强。戊二醛杀菌是其单体的作用，当溶液的pH达到6时，这些单体有聚合的趋势，随pH上升这种聚合作用极迅速，溶液中即可出现沉淀，形成聚合体后会失去杀菌作用。因此碱性戊二醛是一种相对不稳定的消毒液，2%强化酸性戊二醛是以聚氧乙烯脂肪醇醚为强化剂，有增强戊二醛杀菌的作用。它的pH低于5，对细菌芽胞的杀灭作用较碱性戊二醛弱，但对病毒的灭活作用较碱性戊二醛强，稳定性较碱性戊二醛好，可连续使用28天。 （1）杀菌原理：醛类消毒剂对微生物的杀灭作用主要依靠醛基，此类药物主要作用于菌体蛋白的疏基、羟基、羧基和氨基，可使之烷基化，引起蛋白质凝固造成细菌死亡。 （2）主要优缺点：优点： ①戊二醛属广谱、高效消毒剂，可以杀灭一切微生物； ②可用于不耐热的医疗器械的灭菌； ③戊二醛在使用浓度下，具有刺激性小、腐蚀性低、安全低毒； ④受有机物的影响小，20%的有机物对杀菌效果影响不大。缺点： ①灭菌时间长，灭菌一般要达到10个小时； ②戊二醛有一定的毒性，可引起支气管炎及肺水肿； ③灭菌后的医疗器械需用馏水充分冲洗后才能使用。 （3）杀菌作用 碱性戊二醛属广谱、高效消毒剂，可有效杀灭各种微生物，因而可用作灭菌剂，但强化酸性戊二醛杀芽胞效果稍弱（表1）表1 2%戊二醛对杀芽孢的杀灭效果（4）戊二醛的应用 ①医疗器械的消毒与灭菌2%戊二醛（碱性、酸性、中性）可用于各种不怕湿的医疗器械消毒与灭菌。在常温下把清洁干燥的器械完全浸入戊二醛水溶液中，30分钟可达到消毒10小时以上可达到灭菌。无论哪种制剂，在使用时均需先加入0.5%亚硝酸钠作为防腐剂，但一经加入防腐剂只可保存1个月，碱性戊二醛只可连续使用1-2周。 ②内窥镜的消毒与灭菌 戊二醛是内窥镜消毒的首选药品。目前，内窥镜应用广泛、种类之繁多，制造之精密都达到了一个新水平，但对消毒灭菌要求亦愈来愈高。现代内窥镜的很多种部件不耐高温而怕腐蚀，所以，大多内窥镜都用戊二醛进行消毒或灭菌。戊二醛消毒或灭菌的正确操作程序是：先将污染的物品进行无害化处理（内窥镜可直接清洗），可用0.2%有效氯清洗消毒剂清洗内窥镜，冲洗后再用中性或加酶洗涤剂仔细刷洗；冲洗，用清水将洗涤剂冲洗干净；干燥，洗涤后的器械需经过干燥处理；灭菌，将干燥的器械完全浸泡在2％戊二醛溶液内，作用到规定的时间，取出用无菌蒸馏水将残余戊二醛冲洗干净即可使用或干燥保存。表2列举了国外用戊二醛消毒内窥镜的要求。（5）使用方法：灭菌处理：只有浸泡法一种。 将清洗、晾干待灭菌处理的物品浸入2%的戊二醛溶液中，加盖，浸泡10h，无菌操作取出，用灭菌水冲洗干净，并无菌手续擦干后备用，碱性戊二醛使用14天。消毒处理：浸泡法。 将被消毒处理的物品浸入2%戊二醛溶液中，加盖。一般为细菌繁殖体污染，浸泡10min，肝炎病毒污染浸泡30min，取出后用灭菌馏水冲洗干净并擦干。 擦拭法：用2%的戊二醛溶液擦拭细菌繁殖体污染的表面，消毒作用10min，肝炎病毒污染表面，消毒作用30min。（6）注意事项： ①2%酸性戊二醛对金属有腐蚀性；2%中性戊二醛对手术刀片等碳钢制品有腐蚀性，使用前应先加入0.5%亚硝酸钠防锈。 ②戊二醛杀菌效果受pH影响大，用酸性或强化酸性戊二醛浸泡医疗器械时，应先用0.3%碳酸氢钠调pH7.5-8.8。pH超过9.0时，戊二醛迅速聚合则失去杀菌能力。 ③2%碱性戊二醛室温只可保存2周，其余剂型可保存4周。 ④戊二醛对皮肤粘膜有刺激性，接触溶液时应戴手套，防止溅入眼内或吸入体内。 ⑤配制戊二醛要用蒸馏水，盛放戊二醛溶液的容器要干净。 ⑥用戊二醛消毒或灭菌后的器械一定要用灭菌蒸馏水充分冲洗后再使用。2 过氧乙酸 过氧乙酸又叫过醋酸，它是目前所有化学消毒剂中比较突出的一种消毒剂。属高效消毒剂、市售浓度为16-20%。（1）杀菌原理：过氧乙酸的杀菌原理有两点： ①依靠强大的氧化作用使酶失去活性，造成微生物死亡； ②通过改变细胞内的pH值，而损伤微生物。（2）主要优缺点：优点： ①高效广谱能杀灭一切微生物、杀菌效果可靠； ②杀菌快速、彻底； ③可用于低温消毒； ④毒性低、消毒后物品上无残余毒性，分解产物对人体无害； ⑤合成工艺简单，价格低廉，便于推广应用。缺点： ①易挥发，不稳定，贮存过程中易分解，遇有机物、强碱、金属离子或加热分解更快； ②高浓度稳定但浓度超过45%时，剧烈振荡或加热可引起爆炸； ③有腐蚀和漂白作用； ④有强烈酸味，对皮肤粘膜有明显的刺激。（3）适用范围： 适用于耐腐蚀物品、环境、皮肤等的消毒与灭菌。（4）使用方法 ①浸泡法将被消毒或灭菌物品放入过氧乙酸溶液中加盖。细菌繁殖体 用0.1%（1000mg/L）浸泡15min。肝炎病毒、TB菌用：0.5%（1500mg/L）浸泡30min。细菌芽胞：用1%（10000mg/L）消毒5min，灭菌30min。诊疗用品或器材，用无菌蒸馏水冲洗干净并擦干后使用。 ②擦试法：用于大件物品，用法同浸泡法。 ③喷洒法：对一般污染表面的消毒用0.2-0.4%（2000-4000mg/L）喷洒作用30-60min。肝炎病毒和TB菌的污染用0.5%（5000mg/L）的过氧乙酸喷洒作用30-60min。（5） 过氧乙酸消毒用剂量（表3）。（6）使用注意事项应贮存于通风阴凉处。稀释液临用前配制： 用前应测定有效含量，根据测定结果配制消毒溶液。配制溶液时，忌与碱或有机物相混合。为防止过氧乙酸对消毒物品的损害。对金属制品与织物浸泡消毒后，应及时用清水冲洗干净。谨防溅入眼内或皮肤粘膜上，一旦溅上，及时用清水冲洗，消毒被血液、脓液等污染的物品时，需适当延长作用时间。
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