流式细胞仪检测

在液体活检的研究中，基于表面上皮标志物（EpCAM和CK）的循环肿瘤细胞（CTC）检测策略应用较为广泛，但存在局限性。研究表明，CTC中的肿瘤相关miRNA与癌症的发生和发展具有高度相关性，具有成为肿瘤表征和鉴定标志物的潜力。目前，高通量地针对单个CTC在活细胞水平开展原位分析，并进一步实现多个miRNA的同步分析，是颇具挑战性的工作。然而，新型的二维纳米材料——金属有机框架（MOF）因结构可控、功能多样的特性，为研究人员提供了活细胞探针载体的新思路。 　　近日，中国科学院深圳先进技术研究院陈艳团队联合清华大学深圳国际研究生院谭英团队、香港理工大学杨莫团队，提出了新型的2D MOF纳米传感器集成的液滴微流控流式细胞仪（Nano-DMFC），可应用于CTC单细胞miRNA的原位多重检测。相关研究成果以2D MOF Nanosensor-Integrated Digital Droplet Microfluidic Flow Cytometry for In Situ Detection of Multiple miRNAs in Single CTC Cells为题，发表在Small上。 　　本研究开发了一种新型的2D MOF纳米传感器集成的液滴微流控流式细胞仪（Nano-DMFC），突破了活细胞中核酸原位分析的技术瓶颈，高通量地实现了样本中单个CTC活细胞miRNA的原位、多重、定量分析。该纳米传感方案以金属有机框架MOF为猝灭剂，双色荧光染料标记DNA探针为供体，首次合成了用于双重miRNAs检测的生物功能化MOF荧光共振能量转移（FRET）纳米探针。该2D MOF纳米传感器修饰了两种乳腺癌靶向多肽序列，以增加肿瘤细胞靶向和内体逃逸能力。集成2D MOF纳米传感器的数字液滴微流控流式细胞仪，可实现单个乳腺癌细胞中双重miRNA标志物（miRNA-21和miRNA-10a）的原位检测。 　　纳米传感器集成的液滴微流控流式细胞仪由三部分组成——单细胞液滴发生器、纳米探针微注射单元和液滴荧光检测单元。Nano-DMFC系统首先产生单细胞液滴，然后2D MOF纳米传感器被精确地微注射到每个单细胞液滴中，在活细胞水平实现单个肿瘤细胞中的双重miRNA表征。在单个肿瘤细胞内存在目标miRNA时，MOF纳米片上的染料标记的ssDNA与其靶标形成杂交双链DNA（dsDNA），dsDNA和MOF之间的相互作用减弱，使dsDNA从MOF表面分离，最终触发荧光的恢复。不同类型的miRNA在单个细胞中产生不同的荧光信号。最后，研究使用光纤集成的液滴流式检测装置，在纳米探针孵育后对液滴中的信号进行检测和分析，从而实现对单细胞中双重miRNA的检测。实验结果表明，Nano-DMFC平台能够以双重miRNA为靶标在仿生样本（含有10,000个阴性上皮细胞）中检测出10个阳性CTC细胞，同时在加标血液样本的回收实验中表现出良好的重复性。该平台验证了以miRNA为标志物的CTC检测新策略。Nano-DMFC系统作为小型化、高度集成、操作简易的活细胞miRNA分析平台，为探究肿瘤细胞异质性和鉴定细胞亚型提供了新思路，并在临床研究中具有癌症早期诊断和术后监测的潜力。 　　研究工作得到国家自然科学基金、广东省粤港联合创新领域项目、深圳市科技创新委员会和香港研究资助局等的支持。 　　论文链接 　　A、同时检测miR-21和miR-10a的MOF-PEG-peps纳米复合材料传感器的制备方案；B、Nano-DMFC系统中的样品处理单元和miRNA检测单元，可实现单细胞液滴包裹、纳米传感器微注射、单个CTC细胞多重miRNA荧光检测。 在液体活检的研究中，基于表面上皮标志物（EpCAM和CK）的循环肿瘤细胞（CTC）检测策略应用较为广泛，但存在局限性。研究表明，CTC中的肿瘤相关miRNA与癌症的发生和发展具有高度相关性，具有成为肿瘤表征和鉴定标志物的潜力。目前，高通量地针对单个CTC在活细胞水平开展原位分析，并进一步实现多个miRNA的同步分析，是颇具挑战性的工作。然而，新型的二维纳米材料——金属有机框架（MOF）因结构可控、功能多样的特性，为研究人员提供了活细胞探针载体的新思路。

2023年11月22-23日，第六届（2023）中国医疗器械创新创业大赛人体精密测量专场赛暨2023人体精密测量创新创业大赛决赛在南通海门举行。本届大赛自启动以来，报名参赛项目达百余项，最终，安珀生物的“基于人工智能的流式细胞仪监测平台”项目经过激烈角逐，荣获大赛决赛三等奖。流式细胞术创新安珀“基于人工智能的流式细胞仪监测平台”主要是利用流式细胞术，实现细胞或生物颗粒同时进行多参数、快速定量分析和分选。在“前处理模块”、“鞘液系统的流体控制系统”、“光学聚焦系统及荧光检测系统”、“FPGA芯片高频信号处理及采集系统“核心技术方面做出了创新突破，同时搭载”AI诊断辅助“系统，可快速提高医生工作效率，将精准检测发挥到最大作用。这一系统填补了国内领域的AI检测和处理系统的技术空白。多维安珀 OIR AMBER 流式细胞仪检测平台DWAP-300相较于传统流式受可行性和可重复检测性能的限制，光谱流式细胞术可高灵敏地收集荧光染料的全部光谱信息，然后通过先进的光谱解析算法完成超多色免疫分型。将在肿瘤免疫标志物探索、多细胞因子检测（24甚至更多）、疫苗研发（例如慢性肝病的主要病因丙肝病毒较弱的疫苗应答）、免疫新药研发（检测外周免疫细胞表现出与健康个体不同的细胞亚群分布和活化谱）等医学方面发挥重要作用，为医学检测及研究贡献力量。这一项目不仅彰显了我们在医疗研发领域的专业水平，更将人工智能技术与流式细胞仪相结合，为精准医学的未来奠定了坚实基础。探索前行不止此次获奖，是对我们不懈努力和持续创新的高度认可，也是对安珀生物在生物科技领域研发实力的证明。未来，我们将继续秉承“让健康变简单”的使命，以“科技创新、服务卓越”为发展理念，不断推动生物科技行业的进步。安珀生物将继续积极投入研发领域，不断探索前沿技术，为客户提供更加优质的产品和服务，为生物健康行业的蓬勃发展做出贡献，为全人类的健康生活而努力。山东安珀生物科技有限公司山东安珀生物科技有限公司成立于2015年1月，秉承“爱与科技服务健康生活” 的理念，专注于体外诊断试剂(IVD)、医疗诊断仪器设备的研发、生产和销售，先后取得了“国家高新技术企业”、“山东省‘专精特新’中小企业”、“济南市‘专精特新’中小企业”、“济南市瞪羚企业”、“山东省瞪羚企业”等荣誉称号。已经取得拥有自主知识产权的专利31项，软件著作权13项。公司建有省内最大的体外诊断试剂专用生产场所，经营面积约5000㎡，其中净化生产车间面积约4000㎡、研发实验室面积约1000㎡。公司致力于流式检测技术平台、质谱检测技术平台、分子诊断技术平台、化学发光技术平台、免疫层析技术平台和生化免疫技术平台等六大技术领域，产品涉及病原微生物核酸检测、生化检测、免疫诊断、营养及代谢检测等多项领域。

p style=" text-indent: 2em text-align: justify " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 艾滋病的那些事儿 /span /strong /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 据报道，2019年11万名孩子死于艾滋，每过100秒就有一人被感染。 /span span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 世界卫生组织于1988年将每年的12月1日定为世界艾滋病日，号召世界各国和国际组织在这一天举办相关活动，宣传和普及预防艾滋病的知识。 /span /p script src=" https://p.bokecc.com/player?vid=C5032FDE33AFEC019C33DC5901307461& siteid=D9180EE599D5BD46& autoStart=false& width=600& height=490& playerid=621F7722C6B7BD4E& playertype=1" type=" text/javascript" /script p style=" text-align: justify text-indent: 2em " & nbsp “艾滋病感染者在感染之后，一般有长达8-10年的潜伏期，又称作无症状期。即使在急性期和艾滋病期，也缺乏特异性表征，艾滋病检测是目前唯一能够判断一个人是否被感染的途径。因此，我们大力提倡全民自愿检测，尽可能早发现、早治疗，提高感染者的治疗率和治疗有效率。所以，如果想了解是否感染了艾滋病，只能通过检测，否则会延误最佳治疗时机。”中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心二级研究员马丽英表示。 span style=" text-indent: 2em " br/ /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong span style=" text-indent: 2em " CD4+T淋巴细胞检测——HIV感染分期诊断的主要依据 /span /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " CD4+T淋巴细胞在人体内扮演重要角色，它是机体的主要免疫细胞。CD4+T淋巴细胞也是HIV攻击的靶细胞，HIV感染导致CD4+T淋巴细胞进行性减少，CD4+／CD8+T淋巴细胞比值倒置，机体细胞免疫受损，出现多种机会性感染和恶性肿瘤等艾滋病相关疾病。这使得CD4+T细淋巴细胞检测和临床表现成为了HIV感染分期诊断的主要依据。 br/ br/ & nbsp & nbsp & nbsp 如今在临床上，根据病情和动态监测患者CD4+T淋巴细胞的数量以及CD4+／CD8+T淋巴细胞比值，有助于在治疗过程中监测治疗的效果和判断免疫功能是否重建，治疗前还可以用作疾病的分期。根据《中国艾滋病诊疗指南（2018版）》中艾滋病期的诊断标准：成人及≥15岁青少年HIV感染加CD4+T淋巴细胞数& lt 200个／μL，可诊断为艾滋病。HIV感染的15岁以下儿童只要CD4+T淋巴细胞百分比& lt 25%(& lt 12月龄)或& lt 20%(12~36月龄),或& lt 15%(37~60月龄),或计数& lt 200个／μL都可以诊断为艾滋病。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong 流式细胞仪--HIV检测利器 /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 流式细胞术是一种结合了细胞生物学、流体力学、光学、电学等多种学科的临床检测技术，也是目前检测CD4+T细胞的数量以及CD4+／CD8+T淋巴细胞比值最常用的方法。随着流式细胞仪的发展和试剂的开发，采用单平台法，如利用绝对计数微球、体积法绝对计数可实现对CD4+T淋巴细胞的精确计数，避免不同平台间的误差，减少了计数操作的复杂程度；减少引入误差机会、提高结果的准确性和可重复性；同时，还大大降低报告结果的时间，提高临床检验的时效性。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/8a3491fa-5bdc-4b90-a633-2a056bd59e24.jpg" title=" 微信图片_20201201172943.jpg" alt=" 微信图片_20201201172943.jpg" / /p p style=" text-align: center " 图：使用安捷伦Novocyte流式细胞仪进行HIV病人样本CD4+计数分析 /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C376252.htm" target=" _blank" strong img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/69d80756-b42d-4b54-ac3e-f3e8378247bd.jpg" title=" 5334fe96-ed73-4561-8430-55604ba3e99c.jpg!w300x300.jpg" alt=" 5334fe96-ed73-4561-8430-55604ba3e99c.jpg!w300x300.jpg" / /strong /a /p p style=" text-indent: 0em text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C376252.htm" target=" _blank" strong Agilent NovoCyte 流式细胞仪（点击查看） /strong /a /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 2014年，联合国艾滋病规划署就提出来了三个90%的防治策略：90%的HIV感染者通过检测知晓自己的感染状况，90%已经诊断的HIV感染者接受抗病毒治疗，90%接受抗病毒治疗的HIV感染者病毒抑制。三个90%的策略是重点围绕发现传染源，控制传染源，治疗传染源，通过管好传染源来有效控制艾滋病的传播，从根本上降低新发艾滋病毒感染和相关死亡率，改善艾滋病毒感染者的健康状况。 br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong “携手防疫抗艾共担健康责任” /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 在我国，由于艾滋病漫长而不确定的潜伏期和庞大的人口基数，仍有相当一部分的感染者仍未被发现并未接受有效治疗、实现生命的质量提升和寿命延长，在实现三个90%的道路上还需要全民的积极参与！ br/ /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/4cede4c2-f203-4a88-a5ec-236b0a34d755.jpg" title=" 微信图片_20201201172953.jpg" alt=" 微信图片_20201201172953.jpg" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 今年我国“世界艾滋病日”宣传教育活动主题为“携手防疫抗艾共担健康责任”（Global solidarity, shared responsibility）。旨在强调在全球抗击新冠肺炎疫情背景下，加强团结协作，强化落实政府、部门、社会和个人“四方责任”，携手应对新冠肺炎、艾滋病等全球范围内重大传染病挑战，共同抗击艾滋病，为实现艾滋病防控目标、构建人类卫生健康共同体努力。 span style=" color: rgb(191, 191, 191) font-size: 12px " （文源：安捷伦） /span /p