高灵敏度定量质谱平台

Amplifex&trade 试剂进一步突破质谱检测极限 马萨诸塞州 弗雷明汉市&ndash 2012年5月21日，全球生命科学分析技术的领导者AB SCIEX，今天宣布推出商业化的 Amplifex&trade 试剂，作为第一个全新的化学试剂家族，专业用于提高质谱分析性能，提高数据精度，超越传统检测灵敏度。该试剂与业界领先的用于蛋白质组学的iTRAQ® 试剂，以及用于农药分析的IDQuant&trade 试剂包整合在一起，，都属于基于质谱分析的化学标记试剂，该创新组合称为SCIEX iChemistry&trade 解决方案。 新型的Amplifex&trade 试剂可以帮助化学家解决一些复杂的技术难题，在很多情况下，即使是在最灵敏的质谱上也难以解决。Amplifex&trade 试剂依据分析样品的不同，灵敏度可提高5~1000倍。在本周于温哥华召开的ASMS会议上，业界科学家将展示其利用这些新试剂所作出的最新结果。 位于威斯康星大学麦迪逊分校的威斯康星国家灵长类动物研究中心以及临床与转化研究所是早期使用Amplifex&trade 试剂的实验室。作为灵长类动物的代谢系统研究工作的一部分，科学家一直在努力寻找可以检测1&alpha ,25-二羟维生素D3的方法。现在使用新型的Amplifex&trade 试剂，这一难题迎刃而解。 &ldquo 使用Amplifex&trade Diene试剂，我们可以在QTRAP® 5500系统上分析1&alpha ,25-二羟维生素D3和1&alpha ,25-二羟维生素D2，仅需200µ L样品，最低检测限达到2 pg/ml&rdquo ，威斯康星大学麦迪逊分校的威斯康星国家灵长类动物研究中心，临床与转化研究所的Toni E. Ziegler博士说，&ldquo 使用最新推出的化学试剂，AB SCIEX进一步提高了现有 LC/MS/MS方法的灵敏度&rdquo 。 今天，全球的科学家都在关注定量分析方法的检测水平，即使是在最高灵敏度和最为强大的质谱系统上也无法实现。虽然质谱仪器对于化合物的检测和定量分析是一个非常强大的技术，在很多情况下质谱的灵敏度也会受到基质效应、高背景噪声水平、低的离子化效率或化合物碎片较少等信息的影响。 受灵敏度和样品体积等因素制约，科学家无法解决一些关键的生物和化学问题，那么新技术的出现是必需的。质量标签技术可以解决这些问题，Amplifex&trade 试剂是唯一一款定制设计、合成和分析的衍生化试剂，能够增加离子化效率，改善化合物裂解水平和色谱性能，可以克服实验室当前方法的制约，如非常少的样品体积等。 在先天脂质代谢异常疾病症研究中，受样品体积和灵敏度限制，俄勒冈健康与科学大学的一位科学家正在寻求一种新的方法来检测低浓度的特定酮类固醇。新的Amplifex&trade Keto试剂帮助她成功实现了这一目标。 &ldquo 新的Amplifex&trade Keto试剂使用起来简单、快捷，仅需5ml血浆，就能够达到2.5-5 pg/ml水平的灵敏度，&rdquo 俄勒冈健康与科学大学生物分析公共平台，生理学及药理学系副主任，研究助理教授Andrea DeBarber博士说。&ldquo 我认为新的Amplifex试剂真正扩展了酮类固醇生物标志物定量的灵敏度范围。&rdquo Amplifex&trade 试剂是 SCIEX iChemistry&trade 解决方案家族的一员，是世界上唯一为质谱应用设计的定制试剂和消耗品。iTRAQ® 试剂就是iChemistry&trade 解决方案家族的一部分，使用iTRAQ® 试剂已经有超过300篇文章发表。 &ldquo 我们既可以通过质谱硬件突破检测极限，也可以借助化学试剂的帮助提高灵敏度，&rdquo AB SCIEX公司耗材研发部门总监Babu Purkayastha说。&ldquo iTRAQ® 试剂，结合新的Amplifex试剂，我们将继续和研究人员一起应对具有挑战性的质谱分析工作，帮助他们解决生命科学面临的关键性问题。展望未来，我们将在先进化学领域继续创新。&rdquo Amplifex系列首先推出以下两款产品： &bull Amplifex&trade - Diene 试剂 是一种可用来衍生化带有顺式二烯类分子的试剂，如维生素D3和维生素D2类似物等化合物，衍生化后信号会提高1000倍。 &bull Amplifex&trade - Keto 试剂 是一种通用试剂，能够与酮或醛类化合物反应，包括酮类固醇，如睾酮等，衍生产物的检测限可以提高500倍。 样品衍生化不再是一个令人恐惧的耗时过程。Amplifex&trade 试剂使样品制备变得快速、简单、重现性好，与传统试剂相比回收率更高。 关于AB SCIEX AB SCIEX 帮助改善我们生活的世界，使科学家和实验室分析人员不断突破其所在领域的研究极限，应对复杂分析的挑战。作为全球质谱行业的领先者和全球顶级的服务支持提供者，AB SCIEX已成为全球基础研究、 药物发现和开发、食品和环境监测、法医和临床研究领域成千上万科学家和实验室分析者们值得信赖的合作伙伴。拥有超过25年行之有效的创新经验，AB SCIEX 擅长听取和了解其客户不断发展的需求，开发可靠、灵敏、直观的解决方案，对常规和复杂分析中什么是可实现的不断进行着重新定义。欲了解更多信息，请访问www.absciex.com.cn。并在 Weibo @ABSCIEX 或者在Youku上了解 AB SCIEX动态。 AB SCIEX仪器仅供研究使用，不用作临床程序。这里所提到的商标是AB SCIEX Pte. Ltd.或它们各自拥有者的资产，AB SCIEXTM商标要在许可后才能使用。

全新的AB SCIEX 6500系列采用创新的IonDrive&trade 技术，灵敏度提高10倍 马萨诸塞州 弗雷明汉市&ndash 2012年5月21日&mdash &mdash 生命科学分析技术的全球领导者AB SCIEX，今日宣布推出AB SCIEX 6500系列质谱仪。AB SCIEX Triple Quad&trade 6500 和 QTRAP® 6500系统是新一代质谱仪，与目前市场上最畅销的高性能三重四极杆系统相比，其灵敏度提高了10倍。这些新仪器可以帮助科学家在保持重现性和耐用性的同时，突破复杂基质定量的局限。新的6500系列将于本周的ASMS会议上亮相。 AB SCIEX 6500系列采用新的IonDrive&trade 技术，能够离子化、传输以及检测更多的离子，实现了无可匹敌的灵敏度。AB SCIEX将新的IonDrive Turbo V离子源，新型的IonDrive&trade QJet 导入技术以及性能提高20倍的IonDrive&trade HED检测器应用于6500系列，显著提高了离子化和离子传输效率。AB SCIEX具备世界一流的研发实验室，对IonDrive&trade 技术拥有自主知识产权（IP），将质谱灵敏度提高到新的水平，并且不牺牲质量范围。 &ldquo AB SCIEX 6500系列代表了质谱在定量方面质的飞跃，&rdquo AB SCIEX总裁Rainer Blair说。&ldquo 在AB SCIEX 6500系统上首次采用IonDrive技术，能够帮助科学家们完成更低浓度化合物的定量分析。这是一种全新的技术，我们希望它有助于加强AB SCIEX的市场领导地位。&rdquo AB SCIEX 6500系列适用于很多领域，包括药物发现和开发，多肽定量以及生物标志物确证，临床分析等。6500平台兼容SelexION&trade 技术，SelexION&trade 是新型的离子淌度差分质谱技术，使定量和定型分析具有更多一维的选择。 &ldquo 选择一台质谱仪进行分析方法开发，最关键的因素就是灵敏度和选择性，&rdquo Algorithme Pharma，生物分析副总裁Fabio Garofolo说。&ldquo 我们已经在AB SCIEX新的6500系统上分析了样品，结果非常好，特别是在治疗性多肽和对蛋白质的分析中，高灵敏度和选择性是必须的。&rdquo AB SCIEX具有全面的、行业领先的质谱系统产品组合，包括TripleTOF 5600系统、不同系列的QTRAP和三重四极杆系统，新的6500系列扩展了质谱产品组合。AB SCIEX公司作为质谱领域的领导者，拥有超过25年的创新经验。公司的产品组合还包括各种应用软件、试剂、服务以及Eksigent家族的纳升LC、微升LC和分析级流速LC等液相色谱产品。 关于AB SCIEX AB SCIEX 帮助改善我们生活的世界，使科学家和实验室分析人员不断突破其所在领域的研究极限，应对复杂分析的挑战。作为全球质谱行业的领先者和全球顶级的服务支持提供者，AB SCIEX已成为全球基础研究、 药物发现和开发、食品和环境监测、法医和临床研究领域成千上万科学家和实验室分析人员值得信赖的合作伙伴。拥有超过20年行之有效的创新经验，AB SCIEX 擅长听取和了解其客户不断发展的需求，开发可靠、灵敏、直观的解决方案，对常规和复杂分析中什么是可实现的不断进行着重新定义。欲了解更多信息， 请访问www.absciex.com.cn。并在Weibo@ABSCIEX 或者在Youku上了解 AB SCIEX动态。 AB SCIEX仪器仅供研究使用，不用作临床程序。。

Argonaute 蛋白的特点是高效的指导 DNA/RNA 定向结合目标核酸。 2022年2月22日，河北科技大学韩春雨团队在预印版bioRxiv 在线发表未经同行评审的题为“Introducing an argonaute-facilitated PCR platform”的研究论文，该研究设计了一个 argonaute 促进的 PCR 平台，利用源自 Mesorhizobium japonicum的 argonaute (MejAgo) ，该平台不携带核酸酶活性并在结合时暴露引导 DNA 的 3' 端。 MejAgo-PCR 平台的每个反应循环都由变性步骤和聚合酶介导的延伸步骤组成，省略了传统 PCR 所需的退火步骤。更重要的是，MejAgo-PCR 可以显著提高 PCR 在模板检测中的灵敏度，这是由于向导 DNA/引物和模板之间的 argonaute 促进配对。因此，argonaute 促进的 PCR 具有发展为具有更高灵敏度和效率的PCR 平台的潜力。另外，2022年1月21日，河北科技大学韩春雨团队在Nucleic Acids Research（IF=17）在线发表题为“A Cas6-based RNA tracking platform functioning in a fluorescence-activation mode ”的研究论文，该研究利用这一特性设计了一个基于 Cas6 的开关平台，用于在体内检测目标 RNA。将split-Venus片段与内切核糖核酸酶突变的大肠杆菌 Cas6 (dEcCas6) 的两端结合，允许配体 (CBS) 激活分split-Venus互补。该研究将此平台命名为基于 Cas6 的荧光互补 (Cas6FC)。在活细胞中，Cas6FC 可以检测几乎没有背景噪声的目标 RNA。此外，只要在感兴趣的 RNA 中标记一个 CBS (29nt) 副本，就能够打开 Cas6FC 荧光，这大大降低了目标 RNA 构象和定位的潜在改变的可能性。因此，该研究开发了一种新的 RNA 跟踪平台，其固有地具有高灵敏度和特异性聚合酶链式反应（PCR）的发明极大推进了现代生物学研究。此外，鉴于测试追踪和隔离策略 (TETRIS/TTI) 是迄今为止控制传染病的最有效方法，PCR 已广泛用于医疗保健服务。一个明显的例子是在当前 COVID-19 大流行中使用 PCR 检测受感染但无症状的个体。尽管出现了许多核酸检测新技术，但世界卫生组织建议，基于定量 PCR (qPCR)的检测平台仍被认为是 COVID-19 检测的黄金标准。核酸扩增是包括传统PCR在内的所有已开发的核酸检测系统的基础。也不例外，最近开发的SHERLOCK系统利用了重组酶-聚合酶扩增 (RPA)。因此，某个检测系统的灵敏度取决于其依赖扩增策略的灵敏度。从这个意义上说，虽然 SHERLOCK 系统具有混杂 RNAse 活性的“附带效应”，但最初的 RPA 促进的扩增决定了随后的 Cas13a 介导的二级信号放大的可靠性。因此，如果目标模板的滴度低于 RPA 灵敏度的阈值，则 SHERLOCK 声称的优势是不存在的。传统的 PCR 是一种异热反应，使用重复的加热和冷却循环来复制特定区域的 DNA。相比之下，等温扩增发生在稳定的温度下，这显然具有无需设备、省时和便携的许多优点。RPA 促进的 PCR 是一种等温反应，其中 UvsX 重组酶携带引物并促进其与双链 DNA (dsDNA) 模板的配对。RPA 采用重组酶-引物复合物扫描双链 DNA 并促进同源位点的链交换，省去了传统 PCR 所需的高温变性过程，从而可以进行等温扩增。然而，RPA 平台还需要单链 DNA 结合蛋白，该蛋白相互作用并防止移位的模板链通过分支迁移弹出引物。此外，重组酶反应需要 ATP 的存在用于能量输入。此外，重组是一个复杂的过程，其机制尚未完全解决。因此，对于用于 RPA 平台的引物的优化，尚未建立明确的规则。因此，在应用RPA时，不可避免地需要额外的引物筛选过程，这显然是费力的。无论扩增过程是异温还是等温，引物与模板的结合是扩增的第一步，结合的效果决定了后续扩增的灵敏度。传统PCR的引物-模板配对过程完全依赖于引物和模板之间的随机物理相互作用。在这种依赖热力学定律的系统中，增加引物浓度肯定会提高与模板配对的效率。然而，由于引物之间以及引物和模板之间的非特异性错配，必须考虑对准确性的权衡影响。Argonaute 蛋白可以高效地引导 DNA/RNA 定向结合到靶核酸。对argonaute促进靶向机制的研究表明，argonaute蛋白可以加速引导与靶核酸的结合。在这项研究中，证明了源自Mesorhizobium japonicum的 argonaute (MejAgo) 可用于增强引物-模板配对。借助此功能，MejAgo 促进的 PCR 系统可以提高核酸检测的灵敏度。参考消息：https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2022.02.22.481407v1