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[color=#444444]我的基础液是磷酸盐缓冲液,在里面添加了透明质酸,如何测量该液体当中透明质酸的含量?[/color][color=#444444]这个液相色谱可以测吗?[/color]
[font=等线]透明质酸钠是一种天然直链多糖,是由[/font][font=等线]葡萄糖醛酸和[/font][font=等线]乙酰[/font][font=等线]氨基葡萄糖结[/font][font=等线]合而成的双糖结构单元所组成,广泛分布于动物和人体皮肤、皮下组织、眼组织及关节滑膜组织、滑液等结缔组织,无种属差异。根据透明质酸钠结构单元的特性,对其进行深加工后制成的医用透明质酸钠凝胶是一种无种属特异性、无毒、溶解性能好、生物相容性良好的新型生物材料,被广泛用于多种眼科手术、[/font][font=等线]防治外伤性或退变性骨关节炎[/font][font=等线]、[/font][font=等线]普通外科、妇产科等腹、盆腔手术[/font][font=等线]、[/font][font=等线]预防术后肠粘[/font][font=等线]连和盆腔粘连及肌健、关节和神经手术预防组织粘连。[/font][font=等线] [/font][font=等线]注射用修饰透明质酸钠凝胶为目前最受关注的医美产品之一,作用机理为真皮组织填充剂,通过注射填充于真皮组织来修复外形,矫正轮廓以达到满意的效果。适用于面部真皮组织中层至深层注射以纠正中重度鼻唇部皱纹。该产品仅限于在国家正式批准的医疗机构中由具有相关专业医师资格的人员,经生产厂家或其委托的专业培训后,严格按照产品使用说明书的要求进行使用。通常,进行面部皱纹矫正治疗是不需要麻醉的,若患者需要缓解疼痛,可在皮肤表面使用局部麻醉药膏。现在许多产品添加了盐酸利多卡因(中效局麻药),无需麻醉可直接注射。该产品在人体内逐渐降解,随着产品降解,治疗效果逐渐消失,国内完成的临床实验在受试者鼻唇沟处注射,六个月后多数受试者仍保持明显治疗效果。[/font][font=等线][img=,555,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/09/202109031046359296_1919_3237657_3.png!w555x346.jpg[/img][/font][font=等线]透明质酸钠作为一种植人体内的医用生物材料必须严格控制[/font][font=等线]其[/font][font=等线]的含量,以确保产品使用的[/font][font=等线]安全性和有效性。[/font][font=等线]透明质酸酸钠水解后,葡萄糖醛酸与[/font][font=等线]咔唑[/font][font=等线]试剂作用产生红紫色,生成的颜色深浅与葡萄糖醛酸含量[/font][font=等线]成正[/font][font=等线]比[/font][font=等线]。首先配制葡萄糖醛酸[/font][font=等线]标准溶液[/font][font=等线]0,2[/font][font=等线]0[/font][font=等线][font=等线],[/font][font=等线]4[/font][/font][font=等线]0[/font][font=等线],[/font][font=等线]60[/font][font=等线],[/font][font=等线]80[/font][font=等线],[/font][font=等线]100 [/font][font=等线]ug[/font][font=等线]/mL[/font][font=等线]。取医用透明质酸钠凝胶约[/font][font=等线]1 g[/font][font=等线]([/font][font=等线]M1,ug[/font][font=等线])[/font][font=等线][font=等线],加蒸馏水稀释至约[/font]10 g (M2,mg)。充分振荡混匀,使其完[/font][font=等线]全溶解。将标准品和样品各取出[/font][font=等线]1 ml置试管中[/font][font=等线],[/font][font=等线][font=等线]置于冰水浴,用酸式滴定管缓慢地向每管中加人[/font]0.025 mo[/font][font=等线]l[/font][font=等线]/L[/font][font=等线]的四[/font][font=等线][font=等线]硼酸钠硫酸[/font]5 ml,边加边摇匀[/font][font=等线],[/font][font=等线]混匀并置[/font][font=等线]沸水浴中煮沸[/font][font=等线]20 min后取出[/font][font=等线],[/font][font=等线]冷却至室温[/font][font=等线]。[/font][font=等线]各试管内均加人[/font][font=等线]咔唑[/font][font=等线]乙醇溶液[/font][font=等线]0[/font][font=等线].2 m[/font][font=等线]L[/font][font=等线],充分摇匀后,置于[/font][font=等线]室温[/font][font=等线]2 h。[/font][font=等线][font=等线]以[/font][font=等线]0 ug[/font][/font][font=等线]/mL[/font][font=等线]标液作空白,[/font][font=等线][font=等线]用分光光度计测定[/font]550 nm处各标准管和样品管的吸光度。[/font][font=等线][font=等线]用标准管绘制吸光度[/font][font=等线]--浓度曲线,根据样品管的吸光度从标准曲线上[/font][/font][font=等线]查得样品管葡萄糖醛酸[/font][font=等线][font=等线]含量[/font] [font=等线]([/font][/font][font=等线]C,ug/mL )[/font][font=等线][font=等线],透明质酸钠质量浓度为[/font][font=等线]([/font][/font][font=等线]mg/mL)[/font][font=等线][font=等线]:[/font][font=等线]2[/font][/font][font=等线].0907*C*M2/M1[/font][font=等线]。[/font]
透明质酸钠是一种天然直链多糖,是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖结合而成的双糖结构单元所组成,广泛分布于动物和人体皮肤、皮下组织、眼组织及关节滑膜组织、滑液等结缔组织,无种属差异。根据透明质酸钠结构单元的特性,对其进行深加工后制成的医用透明质酸钠凝胶是一种无种属特异性、无毒、溶解性能好、生物相容性良好的新型生物材料,被广泛用于多种眼科手术、防治外伤性或退变性骨关节炎、普通外科、妇产科等腹、盆腔手术、预防术后肠粘连和盆腔粘连及肌健、关节和神经手术预防组织粘连。透明质酸钠作为一种植人体内的医用生物材料,需要有与人体正常注射部位透明质酸钠更接近的分子量,以确保产品使用的安全性和有效性。光散射法是测定高聚物绝对分子量的方法,高分子溶液可视为不均匀介质,当光通过它时,入射光就会发生散射,且其散射光强度远高于纯溶剂,并且与高聚物的分子链形态、溶液浓度、散射光角度和折光指数增量(dn/dc)密切相关。因此由光散射法测得不同浓度的高聚物溶液在不同散射角下的散射光强数据后,即可求得其重均分子量。采用激光散射-凝胶渗透色谱联用法(LLS-GPC)得到分子量分布系数。色谱柱可采用SD805/806、TSK5000pw TSK6000,流动相推荐0.1 mol/L硝酸钠-0.02%叠氮化钠溶液。样品用上述流动相溶解并稀释至适宜浓度,用0.22pm滤膜过滤。折光指数增量(dn/dc)的测定:采用流动相稀释透明质酸钠凝胶至不同浓度梯度,在室温下,用激光检测同一波长测定。将色谱柱与激光散射仪,示差检测器连接,流动相冲洗至基线平稳后,取适量样品溶液进样,在规定流速、色谱柱温度条件下检测样品的分子量及分子量分布。检测完毕后,通过仪器配套的色谱分析软件确定样品的峰面积,输入dn/dc 值,根据软件要求设置其他相关参数,计算分子量及分子量分布系数并输出报告。