本研究提出了一个 ICP-MS 辅助的蛋白质组学方法,用于鉴定富硒酵母中的含硒蛋白。采用双向凝胶电泳分离不溶性含硒蛋白。使用 LA-ICP-MS 找出分离后的含硒蛋白斑点,经切割后,用胰蛋白酶消化;所得多肽通过毛细管HPLC-ICP-MS 进行分析,然后用电喷雾离子化 (ESI-)MS/MS进行表征,鉴定出富硒酵母中主要的含硒蛋白——甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶-3。由于胰蛋白酶裂解产物量非常少,所以需要使用毛细管色谱。
方案
应用一种新的毛细管 HPLC-ICP-MS 接口进行富硒酵母中含硒蛋白的鉴定