蛋清中溶菌酶检测方案(紫外分光光度)

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科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com 溶菌酶的紫外分光光度法检测 溶菌酶又称胞壁质酶，是一种碱性蛋白质，它在自然界中广泛存在于哺乳动物乳汁、体液，禽类的蛋白、微生物体内及木瓜、卷心菜、大麦等植物中。其中以蛋清中的溶菌酶的含量最为丰富，可达0.3%。溶菌酶具有溶菌、杀菌、抗病毒、抗肿瘤细胞的作用，而且对人体无任何毒副作用。因此它在食品工业、医疗、生物学等领域有着广泛的应用，溶菌酶含量的检测就具有了现实意义。 传统的对溶菌酶的定量分析方法是显色法。即根据溶菌酶通过水解细菌细胞壁中的粘多糖而使之裂解这一特性，将待测样品和一定量的染色小球菌在适宜的条件件反应，染色小球菌被样品中的溶菌酶溶解，而释放出颜色，其颜色的深浅与溶菌酶的含量呈正比，再利用可见分光光度计绘制标准曲线来确定溶菌酶的含量。传统方法存在一定的缺点，其一是因为要用染色小球菌，这种小球菌造价比较昂贵；其二此方法的操作比较麻烦，要求在无菌的条件下进行操作，这对工业生产来说即不经济又不方便。本文尝试用紫外分光光度法对溶菌酶的含量进行分析检测。 仪器准备 UV1700 系列紫外可见分光光度计 UV1700PC UV Visible Spectrophotometer 简介：本产品采用全新设计的比例监测双光束学系统，具有优良的光学性能，使用方便，是实验室分析必备的基本仪器之一。 应用领域： 各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水、饮用水、加工过程用水、地表水、冷却水和锅炉补给水等。 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 试剂准备： 图3 温度的影响 Fig.3 Effeet of temperature on the A(A636/A5) of system 图2 溶菌酶溶液的标准曲线 测定结果： 表2检出限实验 样品标号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 吸光度A 0.0142 0.0143 0.0145 0.0145 0.0144 0.0143 0.0144 0.0142 0.0145 0.0144 溶酶浓度pg/ml 0.5168 0.5212 0.5301 0.5212 0.5258 0.5212 0.5258 0.5168 0.5301 0.5258 传真：025-83738955南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 溶菌酶又称胞壁质酶，是一种碱性蛋白质，它在自然界中广泛存在于哺乳动物乳汁、体液，禽类的蛋白、微生物体内及木瓜、卷心菜、大麦等植物中。其中以蛋清中的溶菌酶的含量最为丰富，可达0.3%。溶菌酶具有溶菌、杀菌、抗病毒、抗肿瘤细胞的作用，而且对人体无任何毒副作用。因此它在食品工业、医疗、生物学等领域有着广泛的应用，溶菌酶含量的检测就具有了现实意义。传统的对溶菌酶的定量分析方法是显色法。即根据溶菌酶通过水解细菌细胞壁中的粘多糖而使之裂解这一特性，将待测样品和一定量的染色小球菌在适宜的条件下反应，染色小球菌被样品中的溶菌酶溶解，而释放出颜色，其颜色的深浅与溶菌酶的含量呈正比，再利用可见分光光度计绘制标准曲线来确定溶菌酶的含量。传统方法存在一定的缺点，其一是因为要用染色小球菌，这种小球菌造价比较昂贵；其二此方法的操作比较麻烦，要求在无菌的条件下进行操作，这对工业生产来说即不经济又不方便。本文尝试用紫外分光光度法对溶菌酶的含量进行分析检测。