芽孢杆菌电转化实验

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芽孢杆菌电转化实验流程如下1、接种芽孢杆菌(B . subtilis)于5ml LB培养基中，过夜培养。2、取2.5ml过夜培养物接入40ml (LB + 0.5M山梨醇)中，37°C, 200rpm振荡培养至0D6oo为0.85~0.95之间。3、将菌液冰水浴10 min,然后5000g，4°C离心5 min,收集菌体。4、用50ml预冷的电转培养基(0.5M山梨醇，0.5M甘露醇，10%葡萄糖) 重悬菌体，5000g， 4°C离心5min,去上清，如此漂洗4次。5、将洗涤后的菌体重悬于1ml电转培养基中，分装于EP管，每管分装6oul。.6、将5ong质粒DNA (1~8μl)加入到6oμl感受态细胞中，冰上孵育2min,加入预冷的电转杯(1mm)中，电击。电转化参数设置: 2.0kv、 1mm、电击1次。(电击结果: 时间常数=4.5~5.0ms，如果时间常数<4.2,则需要增加电转培养基的漂洗次数或者提高感受态的稀释倍数来获得更高的转化效率)。7、电击完毕后，取出杯子并立即加入1ml RM (LB + 0.5M山梨醇+0.38M甘露醇)，37°C，20orpm振荡复苏培养3h后，涂板。37°C电热恒温培养箱培养过夜。上海喆图科学仪器有限公司 用 途概 述 ZDP电热恒温培养箱，其 试 验 常 用于在37℃±1，主 要用于发 酵 以及 菌 类 培 养 等恒温试 验。恒 温培养 箱 是 生 物 遗 传 工程、医药、农、林、环 境 科学、畜牧、水 产 等 生 产 、科 研、教 育 部门的理想设备 。可适 用 于医疗卫生、医药 工 业、 生物化 学和 农业 科 学等科 研 和工业生产部 门 做细 菌 培养、发酵及 恒 温试验用 。 产 品特 点 ※彩 色 液晶显示屏，按 键触摸式 操 作界面，简 单易 懂 ，便 于 操作； ※采用自主 研 制的风道循 环 系统 ，结构合 理 ，确保工作 室 温度均匀性 ； ※双层门结构，隔 热 性 能 好 ，观 察箱内 情 况时不 影 响箱内温度； ※采用拉丝不锈钢内胆，四 角 半 圆弧设计易清洁，箱 内 搁板间 距 可调 ； ※可 根 据实验需要设定 报警 温度点，温度偏高或超过 设 定温度将自动 报警 ； ※具有因停电，死 机状 态造成数据丢失而保护的参数 记 忆，来 电恢 复 功 能；※内 胆采用镜面不锈钢材质 ，四角 半圆 弧 设计 易 清洁 ，箱内搁板间距可调；※外观造型美观，箱壳采用优质冷轧钢板制造，表面静电喷塑，经久耐用； ZDP电热式：采 用电热膜加热方式，在 箱体与内胆之间安装电热 膜 ，使用 热传递 方 式加热，加热速度快； ZGP隔水 式：使用时需通过箱体侧面注水口加入适量蒸馏水，由 电热管加 热箱体独 立 隔间内水源，水源被加热 后，独 立隔间 内水源会通过自然对 流 在 箱体独立隔间内 循环 流动，热 量通过辐射传递到箱体内部从而保持了温 度的恒定，既保证工作室温度均匀性，又可在断 电 情况下保持较长时 间 恒 温 ； 技 术 参数 型号 ZDP-9012 ZDP-9602 ZDP-9902 电源电压 AC220V 50Hz AC220V 50Hz 控温范围 RT(室温)+5-65℃ RT(室温)+5-65℃ 恒温波动度 ±0.5℃ ±0.5℃ 温度均匀性 ±1℃(温度测试点37℃时) ±2℃(温度测试点37℃时) 温度分辨率 0.1℃ 0.1℃ 工作环境温度 RT(室温)+5℃~35℃ RT(室温)+5℃~35℃ 输入功率 180W 200W 250W 350W 550W 700W 1300W 1500W 2200W 内胆尺寸 W*D*H(mm) 250*260*250 340*320*320 345*355*410 400*400*500 500*500*650 600*600*750 600*550*1300 800*640*1300 1000*600*1600 外形尺寸 W*D*H(mm) 380*365*540 470*425*600 475*460695 530*505*785 630*605“940 730*705*1035 780*750*1750 980*750*1750 1180*800*2150 公称容积 16L 35L 50L 80L 160L 270L 420L 620L 1000L 载物托架 1块 2块 3块 4块 定时范围 1~9999min 1~9999min