影响细胞生长的常见因素

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我们在用二氧化碳培养箱培养细胞时观察细胞生长状态就会发现细胞受各种因素的影响，这些因素看似不起眼，若不注意就会导致细胞负伤惨重。那么，这些小细节究竟如何影响细胞生长，在培养细胞时我们又该如何避坑呢？今天带大家学习影响细胞生长的因素。1、细胞之间的接触程度正常细胞（二倍体）存在贴壁接触抑制，长满后细胞生长停止，而肿瘤细胞等非正常细胞，接触抑制作用较弱，可生长至较高的细胞密度，但某些细胞过度生长，其损伤难以逆转，所以培养细胞时不建议细胞密度太高。划重点：一般细胞汇合度达到 70-80% 即可传代，切忌长得太满。2、细胞生长附着物贴壁细胞在正常情况下都会贴壁，但一些细胞本身贴壁不牢或贴壁性差，这个时候包被附着物能够促进细胞的黏附，所以在培养一些特殊细胞时，需要对培养瓶/皿进行包被后使用。常用的基质有多聚赖氨酸（D 型、L 型）、明胶、胶原蛋白、细胞外基质混合物，培养时可根据需要自行选择。划重点：细胞贴壁差时可使用基质包被培养瓶/皿。大多数细胞系在 pH7.4 左右时生长最好，而常规培养基的指示剂为酚红，所以多数情况下，我们所见的培养基都呈红色，但不同培养基的颜色会有差异，例如 DMEM 比 1640 颜色深一点。在培养细胞时，也可以根据培养基的颜色判断细胞状态，如随着细胞生长，培养基颜色会变浅变黄。划重点：培养细胞时关注培养基颜色变化，发现异常及时处理。3、培养温度对于大部分人源细胞和温血动物细胞系来讲，比较适宜的培养温度是 37℃，因为这个温度接近体温，但为了安全可以再稍低一些，高于体温的温度要比低于体温的温度更易产生问题。对于禽类细胞，由于其体温较高，所以培养温度可以设置二氧化碳培养箱为 38.5℃左右。划重点：培养细胞时保持温度稳定，不要长时间敞开培养箱的门，并且不要将培养器皿大量重叠堆放在培养箱中，避免空气不循环。4、气相组分大部分培养基适合于 95% 空气 5%CO2，但有部分培养基例外，如 L15 培养基适合于 100% 空气，CO2 会导致培养液 PH 降低（培养液变黄），严重影响细胞生长；若需要用 L15 培养基培养细胞，但没有 100% 空气培养箱时，可以拧紧瓶盖或换培养基（效果可能更好）培养。适用于 CO2 环境的培养基需保持培养瓶透气。划重点：培养细胞时注意参照说明书选择培养基，并注意培养坏境。技术参数上海喆图科学仪器有限公司 用途概 述 ZCP系列 二氧 化 碳培养箱是通过在 培 养 箱 箱 体 内 模拟 形成类似细胞/组织 在 生 物 体内的生长 环境 ，要求稳定的温度37℃、稳定的CO2水平5%、恒 定的 酸 碱度 (pH 值： 7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度 (95%)来对细胞/组织进 行体 外培养的 一 种仪 器。二 氧 化碳培养箱是开 展免 疫学、肿 瘤 学 、遗 传学 及生物工程所必需的关键设备，广泛 应 用 于 细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养 ，常见 于 细胞动力 学 研 究、哺乳动物细胞分 泌物 的收集、各 种 物 理、化学因 素 的致癌或毒理效应、抗原的 研 究 和 生产、培 养杂 交 瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干 细 胞、组 织 工程 、药物筛选 等 研 究领 域 。 产 品特 点 ※可 上下堆叠放置 二层，便 于 实 验室 空 间 的充分利用 ，可更改 开 门方向； ※进 气 口配备 高 效空 气 过滤器，针 对 粒 径 ≥0.3u m 粒子期 过 滤效率 高 达 99.99%； ※采 用 镜面不锈钢 内 胆，四 角 半 圆 弧 过 渡 设 计 ，搁板支架可以自 由 装 卸，易于清洁；※防倾斜搁板的设计，使 搁板抽 出 一半时仍能保 持 水 平 状态 ，可 有 效防止培养液溢出； ※箱内 标 配 加 湿水盘，湿度 蒸发面积大，易达到相对饱 和 湿度，开关门 后 湿度恢复快 ； ※一 机两用 ，可通过打 开 或 者关 闭C O2浓度控制 ，做二 氧 化碳培养箱 或 恒温培养箱使 用 ；※采 用 门加热控制系统，可有效避免内玻璃门结露现象，以防止其 带 来微生物 污 染 的 可能性； ※可 设 定温度值的单 位 为摄氏度℃或华 氏 度 P ，设定后有摄氏度℃或华氏度 F指 示 灯 亮做 提 醒； ※水 套式箱内水位过 低 时，水位控制器自 动 报 警，同 时 切 断 加 热输出 ，防 止 机 器出现 干 烧 情 况； ※陶瓷 纤 维保温材料使其 具 备良好的绝热性能和密封性能来 确 保二 氧 化碳培 养 箱完美的热稳定 性 ； ※具有浓 度 自整定功能，如果温 度 或者CO 2浓 度 控制不理想，可 启 动温度或者CO2浓度自整 定 功能； ※具有多种查询 功 能，可依次查看 门 温温度，环境温度，紫外 灯 已 经工作的时间以及剩余的工作周期 ； ※当 设 备加热时加 热 指示 灯 亮，加热渐 出功 率 可数字显示并自 动 变频调整加 热 功 率 百分比，智 能节能 ； ※具 有门控功能，门 控触点闭 合 为 开 门 ，断开 为 关门 ，当开 门 时，自动关断 所 有输 出 ，蜂 鸣 器会自动 报 警； ※加热异常温度 偏 高偏低、CO2浓度偏离设定值、CO2气体用完或CO2传感器有异 常 均会 有 错误提醒标志； ※内置无 臭 氧型紫外 杀 菌 灯 可 杀 灭箱体内循环 空 气及 加 湿盘水气中的浮菌，有 效防 止 细胞 培 养期 间 的污染 ；※具 有多种提醒 功 能 ，有 预 约 时 间开启时 预 约指示灯 亮、风机运转 时 风机指示灯 亮、停机 或 者有异常时 报 警 指示灯闪烁、缺水时 水 位报警灯 亮 、当键盘锁定 时 锁定键盘灯 亮 、当 控 制器设定 为 程 序控 制 时 程 序 指 示灯 亮 ； ●红 外传感器 ※具 有自动温度 补 偿 、内 置 大气和零点校准功能、零点漂移及满量 程 漂 移补偿，浓 度 测量精确通，响 应 速度 <20S ，无 氧气依赖性 和 催 化 传感器的中毒现象，寿 命 长 ，准确度高，抗 干 扰性 强，电源和输 出 有过 压和 反 接保护，安全可靠 。※CO2浓度的监测不 受 温度和湿度的影 响 ，在 实验过程中 需 频繁打开箱 门 时 ，可快速 恢 复温度及浓度值，如开 门 30秒 后关门 ，可3分钟内恢复到37℃，10分钟 内 恢复到5%CO2浓度 。 ●紫外杀菌系统 ※紫外 灯 杀菌工作时紫外 灯 指示灯亮，紫外杀 菌灯 可设置常 开 或定时 ，根据设定时间间隔自动开启杀 菌 灯 ； ※消毒 过 程中 门 开 启 则自动停止 消 毒，门 闭合自动 启 动消毒，紫外灯打开 时 间可记录，超 过 规定值自动提示更换紫 外 灯。气 套 式 和 水 套 式两 款都是准确和 可 靠 的 ，主 要 区别 在于 ： ●气 套 式加 热 气套式加热是通过遍布箱体气套 层 内的加热器直 接 对内箱体进行加热的 。 优 点 ：电 加热加热速度 快 ，温度恢复比水套式 培 养 箱 更迅速，特别 有利 于短期培养以及箱 门 频 繁 开 关取放样的试验 。 ●水 套式加 热 是 通过 一 个独立的 水 套层包围内部的 箱 体来维持温度恒定的，通过加热隔层内的 水 ，水 的热 量 通过辐射再 传递到箱体 内 部 从而 保 持了温度的恒定 。 三 优 点 ：水 是 一种很好的绝热物质 ，当 遇 到断 电 的时候 ，水 套式系统就可 以 比较长 时 间的保持培养箱内的温度均 匀 性 以 及 准确性和稳定性 ，有 利于实 验 环 境不 稳定(如对实验有用电限制或 经常 停电 )的用 户 选用。 可选配件 二 氧 化碳 减 压阀- 一￥600 自然加湿湿度 显 示系统 - ￥3000 独 立 限温控制器- ￥600 微 型打印 机 (嵌入式打印机 ) ·二 一 -￥1500 R S485接口及通讯软件 一 ￥600 无线 短 信 报警系统 (不 含 手机及SIM卡 ) -￥2500 零 型号 ZCP-Q50 ZCY-50W ZCP-Q80 ZCP-80W ZCP-Q160ZCP-160W ZCP-Q270ZCP-270W ZCP-Q50T ZCP-50WT ZCP-Q80T ZCP-80WT ZCP-Q160TZCP-160WT ZCP-Q270TZCP-270WT 电源电压 AC220V 50Hz AC220V 50Hz 控温范围 RT(室温)+5~60℃ RT(室温)+5~60℃ CO2控制范围 气套式(液晶显示屏) 气套式(彩色触摸屏) 加热方式 远红外传感器 远红外传感器 恒温波动度 ±0.2℃ ±0.2℃ 温度分辨率 0.1℃ 0.1℃ CO2控制精度 ±0.1%vol ±0.1%vol CO2控制范围 0~20% 0~20% 加热恢复时间 开门30s恢复到37℃<5min 开门30s恢复到37℃<5min 高效过滤器 针对粒径≥0.3um粒子，过滤效率高达99.99% 针对粒径≥0.3um粒子，过滤效率高达99.99% 灭菌方式 UV紫外杀菌(可按时间间隔定时开启) UV紫外杀菌系统(可按时间间隔定时开启) 加湿方式 自然蒸发≥95%RH(可选配数字显示湿度功能) 自然蒸发≥95%RH(可选配数字显示湿度功能) 输入功率 250W 350W 550W 700W 250W 350W 550W 700W 内胆尺寸W*D*H(mm) 345*350*410 400*400*500 500*500*650 600*600*750 345*350*410 400*400*500 500*500*650 600*600*750 外形尺寸W*D*H(mm) 545*465*710 550*525*800 650*620*950 750*715*1030 545*465*710 550*525*800 650*620*950 750*715*1030 公称容积 50L 80L 160L 270L 50L 80L 160L 270L 载物托架 2块 2块 型号 ZCP-Q50RZCP-50WR ZCP-Q80RZCP-80WR ZCP-Q160RZCP-160WR ZCP-Q270RZCP-270WR ZCP-50TR ZCP-50WTR ZCP-80TR ZCP-80WTR ZCP-160TRZCP-160WTR ZCP-270TRZCP-270WTR 电源电压 AC220V 50Hz AC220V 50Hz 控温范围 4-60℃(带制冷) 4-60℃(带制冷) CO2控制范围 水套式(液晶显示屏) 水套式(彩色触摸屏) 加热方式 远红外传感器 远红外传感器 恒温波动度 ±0.1℃ ±0.1℃ 温度分辨率 0.1℃ 0.1℃ CO2控制精度 ±0.1%vol ±0.1%vol CO2控制范围 0~20% 0~20% 加热恢复时间 开门30s恢复到37℃<8min 开门30s恢复到37℃<8min 高效过滤器 针对粒径≥0.3um粒子， 过滤效率高达99.99% 针对粒径≥0.3um粒子， 过滤效率高达99.99% 灭菌方式 UV紫外杀菌(可按时间间隔定时开启) UV紫外杀菌(可按时间间隔定时开启) 加湿方式 自然蒸发≥95%RH(可选配数字显示湿度功能) 自然蒸发≥95%RH(可选配数字显示湿度功能) 输入功率 250W 350W 550W 700W 250W 350W 550W 700W 内胆尺寸W*D*H(mm) 345*350*410 400*400*500 500*500*650 600*600*750 345*350*410 400*400*500 500*500*650 600*600*750 公称容积 50L 80L 160L 270L 50L 80L 160L 270L 载物托架 2块 2块