儿童饮用器具、餐具中双酚A（BPA）含量及迁移量检测方案

智能文字提取功能测试中

Solutions for Sciencesince 1875 双酚A(BPA)含量及迁移量的测定 岛津国际贸易(上海)有限公司 双酚A(BPA)含量及迁移量测定项目资料 一、前言 双酚A， 也称bisphenolA(BPA)，用于生产防碎塑料，工业上又叫作聚酸酸酯。BPA无处不在，从矿泉水瓶、医疗器械到及食品包装的内里，都有它的身影。 双酚A是世界上使用最广泛的工业化合物之一，主要用于生产聚碳酸酯、环氧树脂、聚砜树脂、聚苯醚树脂、不饱和聚酯树脂等多种高分子材料。也可用于生产增塑剂、阻燃剂、抗氧剂、热稳定剂、橡胶防老剂、农药、涂料等精细化工产品。 在塑料制品的制造过程中，添加双酚A可以使其具有无色透明、耐用、轻巧和突出的防冲击性等特性，尤其能防止酸性蔬菜和水果从内部侵蚀金属容器，因此广泛用于罐头食品和饮料的包装、奶瓶、水瓶、牙齿填充物所用的密封胶、眼镜片以及其他数百种日用品的制造过程中。 全世界每年生产2700万吨含有BPA的塑料。但BPA也能导致内分泌失调，威胁着胎儿和儿童的健康。癌症和新陈代谢紊乱导致的肥胖也被认为与此有关。欧盟认为含双酚A奶瓶会瓶发性早熟，从2011年3月2日起，禁止含生产化学物质双酚A(BPA)的婴儿奶瓶。 二、相关法规及政策 1.挪威：最早将双酚A纳入受限物质的应是原定于2008年1月1日生效，后因许多议题尚未达成共识而延期的挪威PoHS指令，在其对消费性产品中的禁止使用的10种物质中就包括双酚A(BPA)。 2.加拿大：2008年10月18日，加拿大宣布双酚A毒有毒化学物质，由此成为世界上第一个将双酚A列为有毒化学物质的国家，并禁止在婴儿奶瓶的制作过程中使用双酚A。 3.美国联邦：2009年3月份提案禁止在“可重复使用的食品容器”和“其他食品容器”中使用 (BPA)。这一禁令在正式通过180天后开始生效。 4.纽约州萨福克县：2009年4月2日公布的决议将于90天后开始生效。根据此法律，在萨福克县任何人不得销售或为销售提供含有BPA供3岁以下儿童使用的婴儿奶瓶和儿童饮料容器。 5.伊利诺斯州： 2010年7月1日起，任何人不得销售、为销售提供、分销或为分销提供含有双酚A的运动水瓶，或适用于3岁或以下儿童的儿童食品容器，不论该容器是否装有食品或饮料。 6.马里兰州：规定儿童护理品不得含有双酚A或其他任何致癌或对生殖系统有毒害的物质，同时生产商须在产品上标注不含双酚A。违反上述规定每项可被处以最高1万美元的罚款。 7.欧盟从2011年3月1日禁止生产含双酚A的塑料奶瓶，6月起禁止任何双酚A塑料奶瓶进口到成员国。记者走访多家超市、孕婴用品专卖店发现，市场上很多品牌的塑料奶瓶都使用PC材质。 8.我国的卫生标准规定碳酸酯树脂和成型品中酚(蒸馏水，回流6h)的溶出量不大于0.05 mg/kg，是采用滴定的方法对溶液中游离的酚进行定量计算。 9.欧盟2002/72/EC法则规定双酚A在塑料食品接触材料中的迁移限量为3 mg/kg。欧盟采用液相色谱对双酚A的迁移量进行检测(检出限为0.2~0.7 mg/kg)。 10.美国食品与药品管理局(FDA)规定双酚A可作为食品接触材料的原料使用。EPA(1993)规定最大可接受剂量或者参考剂量是0.05 mg/kg bw/day。 11.日本《食品卫生法》规定聚碳酸酯食品容器中的双酚A溶出限量为2.5 mg/kg。 三、理化性质 1.理化性质： 双酚A学名为2，2-双(4-羟基苯基)丙烷，简称双酚基丙烷(BPA)， 英文名称bisphenol A。 白色晶体，可燃，微带苯酚气味。沸点250~252℃(1.773 kPa)。纯品熔点155~156℃，工业品熔点150-152℃。相对密度1.195(25℃)，闪点79.4℃。溶于乙醇、丙酮、乙醚、苯及稀碱液等，微溶于四氯化碳，几乎不溶于水。双酚A是由苯酚、丙酮在酸性介质中合成的，是环氧树脂、聚碳酸酯、聚砜、聚芳酯、酚醛树脂、不饱和聚酯树脂、阻燃剂等产品的重要原料。 2.危害： 双酚A在生活中应用广泛，成为人们经常能接触到的物质。因此，其安全性问题成为了公众的关注的焦点。双酚A的应用存在争议，目前广泛使用。目前国内外双酚A的毒性研究资料主要为动物调查和实验研究结果，关于双酚A毒性作用的人群流行病学调查和人体试验研究的报道相对较少。资料表明，双酚A属低毒性化学物。动物试验发现双酚A有模拟雌激素的效果，即使很低的剂量也能使动物产生雌性早熟、精子数下降、前列腺增长等作用。此外，有资料显示双酚A具有一定的胚胎毒性和致畸性，可明显增加动物卵巢癌、前列腺癌、白血病等癌症的发生。 但有研究表明双酚A并不是人类致癌危险因素。目前，虽然一些研究结果提示，塑料奶瓶等塑料制品中的双酚A可能会影响婴幼儿的成长发育，并对儿童大脑和性器官造成损伤，但是迄今未有充足证据证明婴儿或者儿童因摄取PC奶瓶释放的双酚A成分而受到伤害。 研究表明，制造塑料容器的PC材质可能会释放有毒的双酚A，温度愈高释放愈多速度也愈快。然而，塑料容器是否真会释放双酚A，目前仍存在很大争议，各界学者说法不一。目前含双酚A的塑料容器，在世界上包括中国在内的绝大多数国家都在正常使用。 四、检测流程 1.消费品中BPA的总含量测定 1.1.适用范围 本方法适用于消费品中双酚A的含量测定。 1.2.方法原理 样品用适量甲醇超声萃取，萃取溶液经过滤后，采用LCMS进行分析测定。 1.3.程序 1.3.1.仪器和设备 1.3.1.1.分析天平，精密度为0.1 mg 1.3.1.2.容量瓶10mL 1.3.1.3.移液枪 1.3.1.4.螺旋管 1.3.1.5.超声波萃取仪 1.3.1.6.0.22微米的PTFE微膜针筒式过滤器 1.3.1.7.带MS检测器的液相色谱仪 1.3.2.品准品，试剂及标准溶液的配制 1.3.2.1.甲醇(HPLC级) 1.3.2.2.一级水(ISO3696) 1.3.2.3.标准物质： BPA(bisphenol A)， CAS No.： 80-05-7 1.3.2.4.标准曲线溶液的配制 1.3.2.4.1.1000 mg/L标准贮备液的配制：准确称量BPA 10 mg于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期12个月。 1.3.2.4.2. 10 mg/L标准贮备液的配制：移取BPA1000 mg/L 标准溶液0.1 mL于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期3个月。 1.3.2.4.3.校准溶液的配制： 混合标液浓度(mg/L) 加入10 mg/L标准工作液体积(uL) 定容溶剂 定容体积(mL) 0.01 10 甲醇 10 0.02 20 甲醇 10 0.05 50 甲醇 10 0.1 100 甲醇 10 0.5 500 甲醇 10 该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期1个月。 1.3.3.样品制备 均一材质：样品剪成不大于2 mmx 2mm× 2mm。 混合材质：按客户要求取样，剪成不大于2 mmx 2 mm × 2 mm。 1.3.4.样品萃取 准确称取0.5 g±10mg样品于25mL螺旋管中，加入10mL甲醇，盖上盖子，置于超声波中，50±2℃下萃取60min， 冷却到室温，用0.22 u m PTFE滤膜过滤到样品瓶里， 上LCMS分析。 1.3.5.分析条件 柱子 C18 Shim-pack XR-ODS 75 mmL.*2.0 mmI.D.， 2.2um 流动相 甲醇/水=75/25(v/v) 程序 5.01 min Stop 流速 0.2 mL/min 进样量 1uL 柱温 40℃ 离子源 ESI 采集模式 负， SIM 采集参数 定性离子m/z 226.8参比离子m/z227.8 DL温度 250℃ Heat Block温度 200℃ 雾化器流速 1.50 L/min 干燥气流速 15 L/min 1.3.6.质控样品制备 1.3.6.1.制备方法空白，重复步骤1.3.4.，不加样品。 1.3.6.2.制备试剂加标溶液，重复步骤1.3.4.，加入50 pL10 mg/L标准溶液，不加样品。 1.3.6.3.制备样品加标溶液，重复步骤1.3.3.~1.3.4.，加入50pL10mg/L标准溶液。 1.3.6.4.重复步骤1.3.3.~1.3.4，每批制备一个平行样。 1.4.结果计算 BPA=C×V.×D.F./W BPA=BPA在样品中的含量(mg/kg) C=仪器读数(mg/L) V=样品定容体积(mL) D.F.=稀释倍数 W=称取样品的重量(g) 2.儿童饮用器具、餐具和喂养器具中BPA迁移量的测定 2.1.适用范围 本方法适用于用含有聚碳酸酯或聚砜的热塑性塑料制造的儿童饮用器具、餐具和喂养器具中双酚A迁移量的测定。 2.2.方法原理 样品经模拟溶液提取后，采用LC或LCMS进行分析测定。 2.3.程序 2.3.1.仪器和设备 2.3.1.1.分析天平，精密度为0.1 mg 2.3.1.2.容量瓶10 mL 2.3.1.3.移液枪 2.3.1.4.螺旋管 2.3.1.5.恒温箱 2.3.1.6.0.22微米的PTFE微膜针筒式过滤器 2.3.1.7.带二极管阵列或MS检测器的液相色谱仪 2.3.2.标准品，试剂及标准溶液的配制 2.3.2.1.甲醇(HPLC级) 2.3.2.2.一级水(ISO3696) 2.3.2.3.醋酸(HPLC级) 食品模拟溶液(3%w/v醋酸)：称取30g±0.05g醋酸于1000 mL容量瓶中，用一级水溶解并稀释至刻度，摇匀。常温下保存3天。 2.3.2.4.标准物质： BPA (bisphenol A)， CASNo.： 80-05-7 2.3.2.5.标准曲线溶液的配制 2.3.2.6.1.1000 mg/L标准贮备液的配制：准确称量BPA 10 mg于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期12个月。 2.3.2.6.2. 10 mg/L标准贮备液的配移：移取BPA1000 mg/L 标准溶液0.1mL于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期3个月。 2.3.2.6.3.校准溶液的配制： 混合标液浓度(mg/L) 加入10mg/L标准工作液体积(uL) 定容溶剂 定容体积(mL) 0.01 10 一级水 10 0.02 20 —级水 10 0.05 50 级水 10 0.1 100 一级水 10 0.5 500 -乡级水 10 该标准溶液在0-4℃下避光保存，有效期1个月。 2.3.3.样品制备 按客户要求取样或随机取样。 2.3.4.样品萃取 2.3.4.1.饮用设备和喂养器具 移取100mL级级水或食品模拟溶液至装置中，如果100mL体积对于样品太大，则用已知试样体积的50%浸泡。 2.3.4.1.餐具 将餐具置于大于或等于250 mL的量筒中，加入足够的已知体积模拟液将样品恰好完全浸泡。 2.3.4.3.在恒温箱40±2℃放置24h。 2.3.4.4.提取液用0.22 pm PTFE滤膜过滤到样品瓶里，上LC分析，当LC分析存在干扰时用LCMS分析。 2.3.5.分析条件 2.3.5.1.LC分析条件 柱子 C18 Shim-pack XR-ODS 75mmL.*2.0 mmI.D.， 2.2um 流动相 甲醇/水=65/35(v/v) 程序 5.01 min Stop 流速 0.2 mL/min 进样量 20 uL 柱温 25°C 检测器 二极管阵列 波长 225nm 2.3.5.2.LCMS分析条件 柱子 C18 Shim-pack XR-ODS 75 mmL.*2.0mmI.D.， 2.2um 流动相 甲醇/水=65/35(v/v) 程序 5.01 min Stop 流速 0.2mL/min 进样量 1pL 柱温 25°C 离子源 ESI 采集模式 负， SIM 采集参数 定性离子m/z226.8参比离子m/z 227.8 DL 温度 250°C Heat Block 温度 200°C 雾化器流速 1.50 L/min 干燥气流速 15 L/min 2.3.6.1.制备方法空白，重复步骤2.3.4.，不加样品。 2.3.6.2.制备试剂加标溶液，重复步骤2.3.4.，加入50 pL 10 mg/L标准溶液，不加样品。 2.3.6.3.制备样品加标溶液，重复步骤2.3.4.，加入50 pL 10mg/L标准溶液。 2.3.6.4.重复步骤2.3.4.，每批制备一个平行样。 2.4.结果计算 仪器读出的BPA溶液的浓度和模拟液的体积是最后的结果。 3.质量控制的数据及标准 质控项目 测试溶液 标准 测试频率 标准曲线 一 r>0.998 每月1次 曲线回读 0.05 mg/L 回收率：85~115% 1/20或每批 方法空白 一 <0.01 mg/L 1/20或每批 空白加标 0.05 mg/L 回收率：85~115% 1/20或每批 样品加标 0.05 mg/L 回收率：70~120% 1/20或每批 平行样 相对偏差<±20% 1/20或每批 4.参考标准 4.1.3550C：2007 UItrasonic Extraction 4.2. US EPA 8321D：2007 Solvent-extractable nonvolatile compounds by HPLC/TS/MS or UV 4.3. BS EN 14350-2：2004 Child use and care articles-Drinking equipment-Part2： Chemical requirements and test 4.4. BS EN 71-11：2005 Organic chemical compounds-Methods of analysis 5.1.消费品中BPA的总含量测定 5.2.儿童饮用器具、餐具和喂养器具中BPA迁移量的 6.主要前处理流程图片： 6.1.消费品中BPA的总含量测定 6.2.儿童饮用器具、餐具和喂养器具中BPA迁移量的测定 样品 恒温箱中模拟食品溶液萃取 过滤 LC或LCMS分析 五、技术数据 1.消费品中BPA的总含量测定 1.1.标准曲线线性 f(x)=1.62850e+006*x-2261.95Rr1=0.9999922 Rr2=0.9999845MeanRF：1.575247e+006RFSD： 3.493259e+004RFRSD： 2.217595FitType ： LinearZeroThrough ： Not ThroughWeighted Regression ： NoneQuantitation Method ： External Standard 1.2.标准溶液回读 曲线中间三个点分别回读三次。 名称 浓度(mg/L) 回收率(%) RSD(%) 0.02 0.05 0.1 BPA 0.02 0.05 0.10 105 4.8 1.3.样品加标回收 样品加标流程：吸取10mg/L的标准溶液20、50、100pL到样品中，超声萃取，按照检测细则进行操作。 名称 浓度(mg/L) 回收率(%) RSD(%) 0.02 0.05 0.1 BPA 0.02 0.05 0.09 93 4.8 1.4.检出限 样品加标流程：吸取10mg/L的标准溶液10 pL到10个空白基质样品中，用甲醇定容至10ml，超声萃取，按照检测细则进行操作(加标理论值为0.01 mg/L ) 测试项目 加标样品浓度(mg/L) 定量检出限(mg/kg) BPA 0.009 0.009 0.009 0.010 0.010 0.009 0.010 0.010 0.010 0.009 1.0 1.5.色谱图 1.6.质谱图 Inten(x1，000，000) 226.8 50.5 909 1328 164，8，192.8 280.8 324.7 356.73825_ 420.8 498.6 454.8476.7 2.儿童饮用器具、餐具和喂养器具中BPA迁移量的测定 2.1.标准曲线线性 f(x)=1.29700e+006*x-895.225 Rr1=0.9999918 Rr2=0.9999836 MeanRF： 1.263246e+006 RFSD：3.554079e+004 RFRSD： 2.813449 FitType ： Linear ZeroThrough ： Not Through Weighted Regression ： None Quantitation Method ： External Standard 曲线各点浓度分别为：0.01，0.02，0.05，0.1， 0.5 mg/L 2.2.标准溶液回读 曲线中间三个点分别回读三次。 名称 浓度(mg/L) 回收率(%) RSD(%) 0.02 0.05 0.1 BPA 0.02 0.05 0.1 103 5.2 2.3.样品加标回收 样品加标流程：吸取10 mg/L的标准溶液200、500、1000 pL到样品中，模拟食品溶液萃取，按照检测细则进行操作。 名称 浓度(mg/L) 回收率(%) RSD (%) 0.02 0.05 0.1 BPA 0.02 0.05 0.09 92 4.9 2.4.检出限 样品加标流程：吸取10 mg/L的标准溶液100 pL到10个空白基质样品中，加入模拟食品溶液100 mL，恒温箱萃取，按照检测细则进行操作(加标理论值为0.01 mg/L) 测试项目 加标样品浓度(mg/L) 定量检出限 (mg/L) BPA 0.009 0.009 0.010 0.010 0.010 0.009 0.009 0.010 0.009 0.010 0.01 2.5.色谱图 Datafile Name：1ppm01.lcd 2225nm，4nm (1.00) 用户服务热线电话：800-8100439 400-6500439 样本中的试验数据除注明外为本公司的试验数据 注：此样本所有信息仅供参考，如有变动恕不另行通知 印刷日期：2011年5月