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分光光度法测定牛奶中的罗红霉素残留 美析仪器 关键词:分光光度法;牛奶;罗红霉素;美析仪器www.macylab.com;UV-1300 一、实验目的 掌握紫外分光光度法检测牛奶样品中罗红霉素残留量的原理与方法。 二、实验原理 罗红霉素是红霉素的一种衍生产品,它在冰醋酸中被浓HCl降解后,可与对二甲氨基苯甲 醛形成在486nm波长处有最大吸收的有色物质,与标准品比较,通过比色可以实现定量分析。 三、仪器与试材 1.仪器与器材 UV-1300型紫外分光光度计、离心机、超声波清洗器等。 2.试剂 除特别注明外,实验中所用试剂均为分析纯,水为去离子水或蒸馏水。 (1)常规试剂与溶液:冰醋酸、HCl、95%乙醇、对二甲氨基苯甲醛、HCl一冰醋酸混合液(2-+-1,体积比)。 (2)显色剂(O.5%):适量对二甲氨基苯甲醛,以冰醋酸配制。 (3)罗红霉素标准溶液(0.8mg/mL):称取罗红霉素标准品(纯度≥99%)适量,以95% 乙醇配制。 3.实验材料 2~3种新鲜牛奶,各50mL。 四、实验步骤 1.样品提取 称取1.00g样品于100mL具塞锥形瓶中,加入95%乙醇10mL,振摇使之分散均匀,超声提 取20min,以4000r/min离心10min,上清液为样品提取液。 2.测定 (1)取罗红霉素标准溶液0、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL,分别置于50mL容 量瓶中,加冰醋酸20mL、显色剂5.0mL,再加HCl一冰醋酸混合液至刻度,摇匀,对应的罗红霉素的浓度分别为0、8μg/mL、16μg/mL、24μg/mL、32μg/mL、40μg/mL。 (2)于25~35℃放置15min后,于486nm波长处分别测定A486nm以浓度为横坐标,A486nm为纵坐标,绘制标准曲线。 (3)取样品提取液2mL,按(1)、(2)所述方法,测定样品提取液的A486nm根据标准曲线,查得提取液中罗红霉素的浓度。同时做试剂空白。 3.计算 按下式计算样品中罗红霉素的含量: x=cV/m 式中,x为佯品中罗红霉素的含量,mg/kg;c为样品提取液中罗红霉素的浓度,μg/mL;m为样品的质量,g;V为样品提取液的体积,mL。 五、注意事项 在测定过程中,应根据样品中罗红霉素的含量,确定样品提取液的使用量。 关键词:分光光度法;牛奶;罗红霉素;美析仪器www.macylab.com;UV-1300
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