UV-1100分光光度法测定牛奶罗红霉素的含量

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Technology-because you change 分光光度法测定牛奶中的罗红霉素残留 美析仪器 关键词：分光光度法；牛奶；罗红霉素；美析仪器www.macylab. com； UV-1300 一、实验目的 掌握紫外分光光度法检测牛奶样品中罗红霉素残留量的原理与方法。 二、实验原理 罗红霉素是红霉素的一种衍生产品，它在冰醋酸中被浓 HC1 降解后，可与对二甲氨基苯甲醛形成在486nm 波长处有最大吸收的有色物质，与标准品比较，通过比色可以实现定量分析。 三、仪器与试材 1.仪器与器材 UV-1300 型紫外分光光度计、离心机、超声波清洗器等。 2.试剂 除特别注明外，实验中所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。 (1)常规试剂与溶液：：冰醋酸、HC1、95%乙醇、对二甲氨基苯甲醛、HC1一冰醋酸混合液(2-+-1，体积比)。 (2)显色剂(0.5%)：适量对二甲氨基苯甲醛，，以以冰醋酸配制。 (3)罗红霉素标准溶液(0. 8mg/mL)：称取罗红霉素标准品(纯度≥99%)适量，，以95% 乙醇配制。 3.实验材料 2~3种新鲜牛奶，各50mL。 四、实验步骤 1.样品提取 称取1.00g样品于100mL具塞锥形瓶中，加入95%乙乙10mL，振摇使之分散均匀，超声提取 20min， 以4000r/ min 离心10min，上清液为样品提取液。 2.测定 (1)取罗红霉素标准溶液 0、0. 5mL、1.0mL、1. 5mL、2. 0mL、2.5mL，分别置于 50mL容 量瓶中，加冰醋酸20mL、显色剂5.0mL，再加HCl一冰醋酸混合液至刻度，摇匀，对应的罗红霉素的浓度分别为0、8ug/mL、16ug/mL、24ug/mL、32ug/mL、40ug/mL。 (2)于25~35℃放置15min后，于486nm波长处分别测定A486nm以浓度为横坐标，A486nm为纵坐标，绘制标准曲线。 (3)取样品提取液2mL， 按(1)、(2)所述方法，测定样品提取液的A486nm根据标准曲线，查得提取液中罗红霉素的浓度。同时做试剂空白。 3.计算 按下式计算样品中罗红霉素的含量： x=cV/m 式中，x为佯品中罗红霉素的含量， mg/kg；c 为样品提取液中罗红霉素的浓度，ng/mL； m为样品的质量， g； V为样品提取液的体积，mL。 五、注意事项 在测定过程中，应根据样品中罗红霉素的含量，确定样品提取液的使用量。 http：//www.macylab.comTel：