赛默飞顶空气相色谱分析血液中的乙醇

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样品的测定 赛默飞顶空气相色谱分析血液中的乙醇 邓桂凤余翀天赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 HS-GC， 乙醇，血液 引言 近几年来，随着我国机动车的保有量越来越大，驾驶机动车所引起的交通事故逐年增多，其中酒后或醉酒驾驶引起的交通事故占了很大一部分，且多为恶性事故，为公共安全带来隐患。为此，我国《道路交通安全法》第九十一条规定，饮酒后驾驶机动车的，追究民事责任，而醉酒驾驶机动车的，由公安机关交通管理部门约束至酒醒，吊销机动车驾驶证，依法追究刑事责任。按照标准，对于认定酒后驾驶、醉酒驾驶，并不是根据行为人的意识状态，而是根据血液中的酒精含量来确定：车辆驾驶人员血液酒精含量大于或等于 20mg/100mL，小于80mg/100m1的，属于酒驾；血液酒精含量大于或等于80mg/100m1的，属醉驾。目前，人体血液中酒精含量的准确检测，国际上采用顶空色谱法。随着新《交通法》的实施，驾车者血醇含量的检测日趋普遍，气相色谱法定性及定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。本文是基于《中华人民共和国公共安全行业标准》(GA/T849-2009)而开发的顶空气相色谱法进行的血液中的乙醇含量的检测。本方案检测方法先进，仪器配置合理，操作简单，结果可靠，可供各级公安部门及司法鉴定中心参考。 对照液及供试液的配制 对照液：吸取10.04mL 尔称取8.008g无水乙醇标准品置于100mL容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀，得8000mg/100mL乙醇储备液，将储备液逐级稀释得到浓度为 400mg/100mL的对照品储备液。逐级稀释对照储备液，获得系列浓度对照工作液，浓度分别为 200mg/100mL、100mg/100mL、80mg/100mL、20mg/100mL、10mg/100mL。内标工作液：准确称取1.050g叔丁醇标准品(含量不小 于99.5%)置于500mL容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀， 得 200mg/100mL 叔丁醇标准使用液。 待测样品及加标回收率样品的制备 吸取 0.50mL 待测全血两份，分别加入样品瓶内，各加入 0.10mL叔丁醇标准使用液，密封混匀后，待进样。 实验部分 主要仪器设备与试剂 0.494mL 待测全血，平行3份，分别添加6pL浓度为2000mg/100mL 的乙醇标准使用液，再分别添加0.10mL叔丁醇标准使用液，按上述方法平行操作。 仪器： Trace GC 1310 气相色谱仪(ThermoFisher)， Triplus300顶空自动进样器。 试剂：叔丁醇，乙醇； 样品：人酒后血液样品 仪器条件见表1。 表1.仪器参数设置 色谱柱及柱温 DB-FFAP， 30 m， 0.32 mm， 1.00 pm柱温：70℃(恒温8min) 检测器类型、工作参数 FID 检测器，检测器温度250℃ 氮气：氢气：空气=40：35：350 (mL/min) 载气类型及流速 氮气，恒流模式，流速： 1.0mL/min 进样方式及进样体积 孵化炉温度：70℃ Manifold 温度：105℃ 传输线温度：115℃ 孵化时间：15min 吹扫：进样后吹扫流量 30 mL/min， 0.5 min 恒流进样模式 SSL进样口，进样模式： split，进样口温度：200℃，分流比 30：1进样体积：1mL(定量环) 结果 方法的线性关系 取2.2项下的系列浓度标准溶液0.5mL，分别加入0.1mL的叔丁醇内标液，密封后混匀进样。由低浓度至高浓度依次进样检测，以乙醇峰面积和内标叔丁醇峰面积比为 纵坐标，乙醇浓度为横坐标作标准曲线线性回归。结果表明，目标物乙醇和内标叔丁醇峰形良好(图1)，在10mg/100mL ~ 200mg/100mL范围内乙醇呈良好线性关系(R=0.9993，见图2)。 图1.乙醇(5.60min)及内标叔丁醇的色谱图(4.86min)， 浓度为 10mg/100mL 图2.乙醇的线性 RT： 0.00-8.02 图3.由上而下分别为样品及加标回收率样品的色谱图 表2.方法的线性关系、定量限 化合物 保留时间 min 线性范围 mg/100mL 相关系数R 定量限mg/100mL 乙醇 5.60 10.00-200.00 0.9993 10.0 方法精密度和回收率的测定 按照2.3项方方法制备3份加标样品，密封后混匀进样，所得样品图见图3，结果见表2，回收率范围为 91.32~115.40%，相对标准偏差(RSD， n=3) 为2.55%。回收率和精密度数据结果见表3。 表3.方法回收率和精密度数据 化合物 添加水平(25mg/100mL) 空白测得量 mg/100mL 测得量 mg/100mL 回收率(%) RSD(%) 乙醇 98.79 123.32 91.32% 2.55 102.18 124.44 95.80% 2.55 129.34 115.40% 2.55 样品检测 取2.3项下的两份样品，放入顶空中检测血液中乙醇的含量，两份平行样品的结果分别为 98.79mg/100mL 和102.18mg/100mL，根据标准取平均值，则在该样品中，其酒精含量为100.49mg/100mL，可定为醉驾。 结论 本方法根据 GA/T842-2009 的步骤，结合Thermofisher 的 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：8008105118400 6505118(支持手机用户) Triplus300 和Trace1310气相色谱仪，对血液中的酒精进行检测，且经过验证，该方法简便、快速、准确；；可供各级公安部门及司法鉴定中心参考。 ( [1] GA/T842-2009中华人民共和国公共行业准准血液酒精 含量的检验方法 ) ThermoFisherSCIENTIFIC AN_C_GC-