检测样品 其他
检测项目 硅酸盐细菌培养基
参考标准 GB/T 5009.204 食品中丙烯酰胺含量的测定方法 气相色谱-质谱(GC-MS)法
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硅酸盐细菌培养基 (一)高渗液体硅酸盐细菌培养基 [用途] 可用作基础培养。也用于血液、骨髓、胸水等标本进行硅酸盐细菌增菌培养 1 高渗盐液体硅酸盐细菌增菌培养基 [配法] 新鲜牛肉500g ,蛋白胨10g ,氯化钠40g ,蒸馏水1L。 将新鲜牛肉去除脂肪、筋膜,切成小块后用绞肉机绞碎,称取500g 加水1L 混合后置冰箱浸抱过夜;将肉浸液煮沸30min ,然后用麻布或绒布挤压过滤;加入蛋白胨、氯化钠后加热溶解,并补足因蒸发而失去的水分,调整pH 至7.4-7.6 ;用滤纸过滤后分装小瓶,121 ℃ 灭菌15-20 min。 2 高渗糖液体增菌培养基 [用途] 用于血液、骨髓、胸水等标本的L 型细菌增菌培养 [配法] 新鲜牛肉500g ,蛋白胨10g ,氯化钠30g ,蔗糖150g ,蒸馏水1L 。 同上述高渗盐培养基,唯高压蒸汽灭菌时采用115 ℃ 20min ,以免蔗糖分解> [用法] 取血液5ml及其它标本直接种于高盐、高渗糖液体培养基,置35 ℃ 培养1-7天,每天观察细菌生长清况在上述增菌培养基上,L 型细菌呈颗粒状生长,颗粒可粘附于管壁或沉淀于管底。 [质量控制] 金黄色葡萄硅酸盐细菌生长良好 (二)硅酸盐细菌增菌培养基 [用途] 用于血液、脑脊液等体液标本中L 型细菌的增殖培养 [配法] (1)牛肉浸液1L ,氯化钠30-40g ,蛋白胨(优质)20g (2) 牛肉浸液1L ,氯化钠30g ,蔗糖150g ,蛋白胨20g 将各成分称量混合加热溶解后,校正pH 至7.4-7.6 ,分装培养瓶,每瓶15ml,121 ℃ 灭菌15min 备用。 [用法] 用无菌操作采集标本,立即接种于L 型细菌液体培养基和常规血液增菌培养基内,标本与培养基之比为1: 10 ,置35 ℃ 培养3-7天,逐日观察。如发现培养液产生混浊、溶血、絮状沉淀或瓶壁上附有粘性颗粒等细菌生长现象,立即分离至L 型细菌分离平板上进行鉴定。 [质量控制] 用硅酸盐细菌做生长试验,培养24-72h ,生长良好。 [保存] 置4 ℃ 冰箱内使用1-2 周。 二、硅酸盐细菌分离琼脂培养基 [用途] 用于常见L 型细菌的分离培养 1. Kaqan 分离平板 [配法] 牛肉浸液800ml ,氯化钠50g,蛋白胨(Oxoid ) 20g ,琼脂粉(Oxoid)8g ,血浆(人、马、羊)200ml 将前四种成分称量混合加热溶解,校正pH 至7.5 士0.1 ,分装每瓶80ml,121 ℃ 灭菌15min 冷藏备用。 临用时加热溶解后,冷却至56 ℃ 加入血浆20ml摇匀倾注平板。放在密封塑料袋中,置4 ℃ 冰箱备用。 注:血浆要预先灭菌处理,并经56 ℃ 水浴灭活30min。 2 蚌埠85-7分离平板 [配法] 牛肉浸液1L ,氯化钠40g ,蛋白胨30g ,明胶(生物试剂)30g ,琼脂粉5-8g 。 将上述成分混合,加热溶解,校正pH 至7.4-7.6 ,分装后,经121 ℃ 灭菌15 min 后倾注平板,置4 ℃ 冰箱备用。 [用法] 将血、脑脊液、尿等标本或增菌培养物滴种于平板约0.1ml,用L 型玻棒均匀涂开,置35 ℃ 温箱内启盖片刻,除去平板表面水分。在平板的边端贴一片专用诱导纸片。覆盖后置35 ℃ 10 %二氧化碳环境下3-5 天逐日观察。如有可疑L 型菌落,用低倍镜检查。在诱导区与非诱导区同时见到L 型菌落说明标本内确有L 型细菌存在;若诱导区存在L 型菌落,而非诱导区无,则提示标本内有L 型细菌变异的趋向。 [质量控制] (1)细菌诱导试验,在该平板上能诱导金黄色葡萄球菌Coweng I标准菌株出现L 型菌落和G 型菌落。 (2) 用L 型菌落作10-7 稀释,取0.1ml接种,经培养获得单个菌落和纯培养。 [保存] 置4 ℃ 冰箱内,2 周用完 硅酸盐细菌培养基(一)高渗液体硅酸盐细菌培养基 [用途] 可用作基础培养。也用于血液、骨髓、胸水等标本进行硅酸盐细菌增菌培养 1 高渗盐液体硅酸盐细菌增菌培养基 [配法] 新鲜牛肉500g ,蛋白胨10g ,氯化钠40g ,蒸馏水1L。 将新鲜牛肉去除脂肪、筋膜,切成小块后用绞肉机绞碎,称取500g 加水1L 混合后置冰箱浸抱过夜;将肉浸液煮沸30min ,然后用麻布或绒布挤压过滤;加入蛋白胨、氯化钠后加热溶解,并补足因蒸发而失去的水分,调整pH 至7.4-7.6 ;用滤纸过滤后分装小瓶,121 ℃ 灭菌15-20 min。 2 高渗糖液体增菌培养基 [用途] 用于血液、骨髓、胸水等标本的L 型细菌增菌培养 [配法] 新鲜牛肉500g ,蛋白胨10g ,氯化钠30g ,蔗糖150g ,蒸馏水1L 。 同上述高渗盐培养基,唯高压蒸汽灭菌时采用115 ℃ 20min ,以免蔗糖分解> [用法] 取血液5ml及其它标本直接种于高盐、高渗糖液体培养基,置35 ℃ 培养1-7天,每天观察细菌生长清况在上述增菌培养基上,L 型细菌呈颗粒状生长,颗粒可粘附于管壁或沉淀于管底。[质量控制] 金黄色葡萄硅酸盐细菌生长良好 (二)硅酸盐细菌增菌培养基 [用途] 用于血液、脑脊液等体液标本中L 型细菌的增殖培养 [配法] (1)牛肉浸液1L ,氯化钠30-40g ,蛋白胨(优质)20g (2) 牛肉浸液1L ,氯化钠30g ,蔗糖150g ,蛋白胨20g 将各成分称量混合加热溶解后,校正pH 至7.4-7.6 ,分装培养瓶,每瓶15ml,121 ℃ 灭菌15min 备用。 [用法] 用无菌操作采集标本,立即接种于L 型细菌液体培养基和常规血液增菌培养基内,标本与培养基之比为1: 10 ,置35 ℃ 培养3-7天,逐日观察。如发现培养液产生混浊、溶血、絮状沉淀或瓶壁上附有粘性颗粒等细菌生长现象,立即分离至L 型细菌分离平板上进行鉴定。 [质量控制] 用硅酸盐细菌做生长试验,培养24-72h ,生长良好。 [保存] 置4 ℃ 冰箱内使用1-2 周。 二、硅酸盐细菌分离琼脂培养基 [用途] 用于常见L 型细菌的分离培养 1. Kaqan 分离平板 [配法] 牛肉浸液800ml ,氯化钠50g,蛋白胨(Oxoid ) 20g ,琼脂粉(Oxoid)8g ,血浆(人、马、羊)200ml 将前四种成分称量混合加热溶解,校正pH 至7.5 士0.1 ,分装每瓶80ml,121 ℃ 灭菌15min 冷藏备用。 临用时加热溶解后,冷却至56 ℃ 加入血浆20ml摇匀倾注平板。放在密封塑料袋中,置4 ℃ 冰箱备用。 注:血浆要预先灭菌处理,并经56 ℃ 水浴灭活30min。 2 蚌埠85-7分离平板 [配法] 牛肉浸液1L ,氯化钠40g ,蛋白胨30g ,明胶(生物试剂)30g ,琼脂粉5-8g 。 将上述成分混合,加热溶解,校正pH 至7.4-7.6 ,分装后,经121 ℃ 灭菌15 min 后倾注平板,置4 ℃ 冰箱备用。 [用法] 将血、脑脊液、尿等标本或增菌培养物滴种于平板约0.1ml,用L 型玻棒均匀涂开,置35 ℃ 温箱内启盖片刻,除去平板表面水分。在平板的边端贴一片专用诱导纸片。覆盖后置35 ℃ 10 %二氧化碳环境下3-5 天逐日观察。如有可疑L 型菌落,用低倍镜检查。在诱导区与非诱导区同时见到L 型菌落说明标本内确有L 型细菌存在;若诱导区存在L 型菌落,而非诱导区无,则提示标本内有L 型细菌变异的趋向。 [质量控制] (1)细菌诱导试验,在该平板上能诱导金黄色葡萄球菌Coweng I标准菌株出现L 型菌落和G 型菌落。 (2) 用L 型菌落作10-7 稀释,取0.1ml接种,经培养获得单个菌落和纯培养。 [保存] 置4 ℃ 冰箱内,2 周用完
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继续免费阅读全文上海邦景实业有限公司为您提供《硅酸盐细菌培养基中硅酸盐细菌培养基检测方案(培养基 琼脂)》,该方案主要用于其他中硅酸盐细菌培养基检测,参考标准《GB/T 5009.204 食品中丙烯酰胺含量的测定方法 气相色谱-质谱(GC-MS)法》,《硅酸盐细菌培养基中硅酸盐细菌培养基检测方案(培养基 琼脂)》用到的仪器有硅酸盐细菌培养基。
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