针剂中蛋白含量检测方案(定氮仪)

智能文字提取功能测试中

Manon海能仪器民族仪器 品质典范 海能仪器：针剂中真蛋白含量的测定(凯氏定氮法) 1前言 众所周知，a凯氏定氮法所测定的氮包括有机态的氮以及无机态的氮。而对于一些针剂等需要测定真蛋白的样品而需要进行特殊的处理，将样品中的非蛋白氮进行测定，其差值则为真蛋白氮，从而可以计算得到真蛋白值，这里我们用到的是钨酸沉淀法。 实验部分 2.1原理 根据《中国药典2015版》中的规定。采用钨酸沉淀法将真蛋白进行沉淀，测得非蛋白氮含量。 2.2 仪器与试剂、器具 2.2.1K1100F 全自动凯氏定仪仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.2 SH420F石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.3硼酸分析纯，质量分数 2%。 2.2.4氢氧化钠分析纯，质量分数40%。 2.2.5亚甲基蓝-甲基红混合指示剂将亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(2g/L)按 1：1体积比临时混合摇匀备用。 2.2.6钨酸钠分析纯 质量分数10% 2.2.7 稀硫酸0.33mol/L 2.2.8 硫酸标准酸0.1mol/LH 2.2.9氯化钠 分析纯质量分数0.9% 2.2.1017移液管 2.3实验步骤 2.2.1总氮样品制备：精密量取供样品5ml，用0.9%氯化钠溶液定量稀释至100ml，制成每 1ml中含氮量约lmg的溶液，精密量取1ml，作为总氮供试品溶液进行测定。 2.2.2非蛋白样品制备：：料精密量取2ml样品，置20ml量瓶中，加水14ml，加10%钨酸钠溶液2.0ml， 0.33mol/L 硫酸溶液2.0ml，加水至刻度，摇匀，静置30分钟，滤过，取滤液5ml。 2.2.3取样：：消化管中各加入0.3g稀硫酸钾，10滴30%的硫酸铜溶液。 2.2.4消解：利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设置参数如下：消化过程采用曲线升温模式，设置参数如下： 温度 时长 1 220度 30min 2 350度 10min 2 420度 120min 注意：：如果加大取样量，需要缓慢升温。再次升温以样品不冒泡冲样为准。如果消解过程中样品剧烈沸腾冒泡，立即停止加热。 2.3.5定氮仪设置程序如下： 稀释水：：30ml 硼酸： 25ml 蒸馏时间：：5min 2.3.6仪器自动滴定并给出结果。 3结果与讨论 全氮含量 蛋白质含量 式中：C-标准酸摩尔浓度(mol/L) V，-空白样滴定标准酸消耗量((mL) Vx-全氮样品滴定标准酸消耗量(mL))，精确到小数点后四位Vx，-全氮样品滴定标准酸消耗量(mL)，精确到小数点后四位n-稀释倍数 注意： (1)如果样品蛋白质含量超过10%，应加大稀释倍数。10%钨酸钠溶液及稀硫酸溶液用量相应的按比例增加，使溶液中钨酸浓度保持1%。 (2)全氮含量以及非蛋白氮含量可用同一空白体积。 -- --