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鉴别 展开
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含量测定 展开
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前处理 展开
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限度检查 展开
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理化性质 展开
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注射剂及特殊剂型相关 展开
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微生物相关及生化特性 展开
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机械性能 展开
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组学研究 展开
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临床前研究 展开
参考标准
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其他 ADC DAR 表征工作流程涉及分析前对纯化的 ADC 样品进行样品前处理。增加去糖基化步骤可从 ADC 去除多聚糖，因此能够大幅简化谱图从而提高 DAR 测定过程中峰识别的可靠性。此外，去糖基化使测定不含多聚糖的抗体的质量数以及检测抗体的糖谱成为可能。在 ADC 分析前的还原步骤可测定轻链和重链的质量数以及药物偶联物在每条链上的相对分布情况。结合抗体还原与去糖基化步骤简化了谱图的解析并允许测定去糖基化轻链和重链的质量数。 另外，数据分析和报告也是 ADC 表征中的重要环节。因此，安捷伦公司开发了 Agilent MassHunter DAR 计算器，该计算器仅需极少的用户输入即可快速计算完整和还原态 ADC 的 DAR 值。该软件给出的报告汇总了理论质量数、测定质量数、药物/接头质量数和 ADC 的总 DAR 值。它还能以表格形式给出所有检测到的 DAR 种类及其各自的理论质量数、测定质量数、峰面积百分比和计算所用谱图。该报告可提供电子版本，方便研究人员查看、存档以及共享不同的分析数据。方案
抗体药物偶联物 (ADC)中药物/抗体比率 (DAR)检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
检测仪器 1290 Infinity II -
肽谱分析是表征生物治疗蛋白质不可或缺的工具，该方法广泛运用于生物药物蛋白质的生产过程，以确保产品在各生产阶段的完整性和稳定性。利用 LC/MS 进行肽谱分析是表征肽段修饰的首选技术。稳定且重现性高的 LC/MS 方法，是成功实现肽谱分析分离的关键。因此，需要对 LC/MS 分离参数进行全面的研究。分析复杂蛋白质酶解物的过程中，如何实现肽段的高效、高分离度分离是一项巨大的挑战。甲酸是一种兼容质谱的离子对试剂，常用于 LC/MS 方法中，可实现灵敏检测。然而，甲酸也会导致峰形展宽，从而使肽段发生共洗脱。除此之外，流动相含甲酸的现有 LC/MS 方法具有峰容量小、峰展宽以及对相似肽段分离度差的限制。选择正确的反相色谱柱和 LC/MS 方法，对肽谱分离的成功十分重要。Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱专为高效的肽段分离而设计。HPH Poroshell 填料包覆了一层带正电荷的改性表面基团。采用 C18 配基的表面多孔颗粒填料表面带电，可改善峰形并提高峰容量。最佳孔径 (120 Å) 和粒径 (2.7 μm) 能够以低色谱柱反压提供类似 UHPLC 的性能。AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱还可以与含甲酸的流动相兼容，在与质谱联用时可提供出色的峰形。 ?本应用简报展示了 AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱在用含甲酸的流动相对单克隆抗体 (mAb) 进行肽谱分离时显示出的卓越性能。本文通过研究流速、梯度时间和温度等不同的填料影响因素，开发出了实现最佳肽段分离的 LC/MS 方法。并对峰容量、峰宽、峰面积、峰高、重现性和序列覆盖率等肽谱分析的关键要素进行了评价。方案
生物治疗蛋白质中肽谱分析检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
检测仪器 Agilent 6545 Q-TOF 液质联用系统 外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
检测仪器 1290 Infinity II -
由于聚集体会对药物安全性产生显著影响并且可能引发抗原反应，因此蛋白质聚集是生物治疗药物蛋白质的关键质量属性。聚集体还可能会降低生物治疗药物的药效并大幅降低生产工艺的经济效益。蛋白质通常在暴露于压力条件下时发生聚集，例如pH、温度或浓度的变化，因此不同生产阶段均有可能发生聚集。目前人们已经确定选择体积排阻色谱(SEC) 方法进行聚集体的定量分析。 在生物治疗药物开发过程中（例如在克隆选择过程中或在通过严格的“实验设计”法优化发酵条件时）监视聚集体的形成情况，这些过程可能产生大量需要进行体积排阻分析的样品。 SEC 常用条件的分析时间往往需要20 min 甚至更长，这极大限制了对大量样品的分析能力。Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱具有高度优化的粒径和孔径设计，可实现更快速的分离，从而显著减少分析瓶颈问题。本应用简报介绍的技术可提高样品通量而不影响分析的准确性。方案
生物治疗药物中聚集体检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler 外设/附件 OpenLAB 软件
Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
单克隆抗体聚集可通过产品和环境因素等多种机制产生。体积排阻色谱(SEC) 是单克隆抗体型治疗药物聚集体和片段含量测定和定量分析的标准方法。本应用简报重点展示强制应激研究中获得的利妥昔单抗生物仿制药和创新药物的完整态、聚集体及片段的高分离度分离与定量分析。其中采用Agilent 1260 Infinity 四元生物惰性液相色谱和Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱进行分离与定量分析，并使用分子量标准品校准色谱柱。AdvanceBio SEC 色谱柱的高灵敏度、高分离度分离适用于监测聚集体/降解物，也是亟需高分离度与高灵敏度的应用的理想选择。方案
利妥昔单抗生物仿制药和创新药物中聚集体和片段检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler 外设/附件 OpenLAB 软件
Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。 配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的 2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。方案
人免疫球蛋白 G中糖基化分析检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
目的：建立两种复方甘草制剂中吗啡成分测定的Online SPE-UHPLC 分析方法，进行定量分析。方法：采用Agilent Zorbax Extend C18 柱(4.6 x 12.5 mm，5 μm) 作为Online SPE 柱，采用Agilent Poroshell 120 EC C8 柱(3.0 x 50 mm，2.7 μm)，以庚烷磺酸钠水溶液 (A) 乙腈(B) 为流动相，等度洗脱，检测波长为220 nm；结果：通过Online SPE 方法可以有效去除样品中的基质干扰，回收率>95%，重现性良好，保留时间RSD%<1%，峰面积 RSD%<1.5%，并且取得准确的定量结果。结论：本文所建立的方法分析速度快，分离效果良好，比传统SPE 方法操作简便，使用成本低，为复方甘草制剂的质量控制提供了一种快速准确低成本的分析方法。方案
复方甘草制剂中吗啡检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler 外设/附件 OpenLAB 软件
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
检测仪器 1290 2D-LC -
本应用简报介绍了如何像生物分析科学家在典型生物药理学环境下进行纯度分析那样，使用 Agilent Easy Access 软件来分析模式治疗性蛋白的批次间纯度。分析模式治疗性蛋白的批次间纯度时，将 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统与 Agilent 6530 精确质量Q-TOF LC/MS 联用，并通过 Agilent Easy Access 软件进行数据分析。LC/MS 平台拥有卓越的色谱分离度和质量精度，结合强大的数据处理能力，可简便、快速地分析批次间的蛋白纯度。本应用简化了工作流程，使用者可以快速做出决策，以作进一步的下游处理。该软件可用于比较蛋白谱图，从而确保监管机构要求的批次一致性。此外，该软件还有助于了解工艺放大或生产过程中纯化后蛋白的杂质谱图。该数据可帮助开发生物仿制药的公司在产品上市前评估其产品与原始药物的相似度，重要性不言而喻。方案
治疗性蛋白中批次间纯化分析检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统
检测仪器 1290 Infinity II -
药物代谢和药代动力学 (DMPK) 研究通常需要通过质谱 (MS) 鉴定药物代谢物，并在药物开发的后期阶段，通过 NMR 确认代谢物结构。为此，可能需要对代谢物进行纯化。在本应用简报中，将安捷伦自动纯化软件与 Agilent 1260 分析型纯化系统相结合对安非他酮药物代谢物进行纯化。使用通过 Agilent 6540 精确质量四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统和 Mass-MetaSite 软件采集到的高分辨率精确质量 MS 和 MS/MS 数据对代谢物进行鉴定。方案
对安非他酮药物中代谢物的纯化和鉴定检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
检测仪器 Agilent 6545 Q-TOF 液质联用系统 外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler 外设/附件 OpenLAB 软件
Agilent 1260 Infinity 分析型纯化系统
检测仪器 1260 分析型 -
作为当前研究热点的单克隆抗体 (mAb) 是一类迅速扩展的蛋白质生物分子。由于蛋白质药物的异质性，必须对此类生物分子进行广泛的分析表征。 ?将液相色谱与电喷雾质谱 (LC/MS) 相结合进行肽谱分析是生物制药行业中用于确证 mAb 一级序列的一项成熟技术。全面的表征不仅能提供 mAb 及其异构体的完整氨基酸序列，还能够获得翻译后修饰 (PTM) 及位置的信息。然而，数据处理和结果解析自动化工作流程的缺失成为大多数生物制药分析或临床研究实验室的瓶颈。 在本研究中，我们开发了高通量的工作流程，使用 Agilent AssayMAP Bravo 液体处理自动化系统、Agilent 1290 Infinity II UHPLC 系统、Agilent 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF 以及 Agilent BioConfirm 软件（实现自动化数据分析）进行完整的序列映射分析。方案
单克隆抗体 (mAb)中肽谱分析检测方案(移液工作站)
治疗类生物药品 | 含量测定
检测仪器 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统 检测仪器 Agilent 6545XT Q-TOF 液质联用系统
Agilent AssayMAP Bravo 蛋白质样品前处理平台
前处理设备 AssayMAP Bravo -
注射用脑蛋白水解物为猪脑组织提取、分离、精制而得的无菌制剂。内含16种游离氨基酸，并含少量肽。可用于颅脑外伤、脑血管疾病后遗症伴有记忆减退及注意力集中障碍的症状改善。因此测定其氮含量可得出其中有效成分的含量。本实验参照《2015版 中国药典》中的脑蛋白水解物中的氮含量进行测定。方案
注射用脑蛋白水解物中氮含量检测方案(定氮仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
前处理设备 海能SH420F石墨消解仪
海能K1160/K1160+K1124全自动凯氏定氮仪
检测仪器 K1160/K1160+K1124 -
在生物制药行业，单克隆抗体生产的下游加工过程通常包括三步色谱纯化：捕获、中间纯化和精制纯化。蛋白质A 柱常在捕获步骤中使用，它能带来高通量（即分析能力和分析速度），同时在浓缩目标分子和免疫球蛋白方面同样发挥了重要的作用。在投入高成本进行制备以及使用大量蛋白质A 柱之前；若想要对细胞培养上清液的单克隆抗体滴度和产量进行监测，就需要通过小型（分析型）的处理工序来确定单克隆抗体的滴度，以便确定单克隆抗体产品的最佳采集时间。在本应用简报中，采用预填充的Agilent Bio-Monolith 蛋白质A 色谱柱进行了快速捕获细胞上清液中的单克隆抗体滴度的研究。方案
细胞培养液单克隆抗体中滴度检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
外设/附件 Agilent 1290 Infinity II Multisampler
Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
重组人白蛋白可用于治疗肝硬化、腹水等适应症。白蛋白主要由肝脏合成，具有维持血液渗透压和营养载体的作用。传统的血液制备存在产量低、价格高和交叉污染等缺点。基因重组制备技术具有巨大的应用潜力。本实验参照《中国药典 2015年版 通则0704 氮测定法 第三法 定氮仪法》对重组人白蛋白注射液中的氮含量进行测定。方案
重组人白蛋白注射液中氮含量检测方案(定氮仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
前处理设备 海能SH420F石墨消解仪
海能K1160/K1160+K1124全自动凯氏定氮仪
检测仪器 K1160/K1160+K1124 -
前处理设备 海能SH420F石墨消解仪
海能K1160/K1160+K1124全自动凯氏定氮仪
检测仪器 K1160/K1160+K1124 -
建立了天冬氨酸异构化质谱解析方法，为单抗药物的准确、快速、精细解析提供了可靠的分析手段，尤其当一些药物质控分析中出现异常电荷异质性或药物异常降解时，可以进行肽图水平的精确质谱分析。方案
单抗药物天冬氨酸中精细质控分析检测方案(气相色谱仪)
赛默飞Trace1300E 气相色谱仪
检测仪器 Trace1300 E -
盐梯度下阳离子交换色谱的方法开发参数。 由于蛋白质治疗药物（包括单克隆抗体(mAb)）的电荷异质性可能会影响生物治疗药物的生物活性、安全性和稳定性，所以需要对这种电荷异质性进行表征和监测1。离子交换色谱(IEX)一直被广泛应用于蛋白质电荷异构体的纯化、表征和常规监测分析。由于mAb的等电点(pI)相对较高，与阴离子交换色谱分离相比，阳离子交换色谱(CEX)更适合用于mAb电荷异构体的表征分析。本应用纪要介绍了开发CEX固定pH盐梯度方法时需要考虑的因素。其它与使用pH梯度有关的信息请参阅单独的沃特世应用纪要2。 借助沃特世高分离度强阳离子交换色谱柱（即BioResolve SCX mAb）和 Waters AutoBlend Plus技术，可以高效实现盐梯度方法开发，得到可重现、稳定的分离。方案
单克隆抗体电荷异构体中分析表征检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
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本文介绍了利用 Agilent 1260 Infinity Ⅱ Prime 液相色谱系统和 Agilent 1290 Infinity ⅡELSD 检测器对生物制剂中吐温 80 和泊洛沙姆 188 同时进行定量分析的方法。该方法采用含1% 乙酸的水和异丙醇溶液为流动相，以梯度条件对生物制剂中吐温 80 和泊洛沙姆 188 同时进行分离和定量分析。该方法不需要复杂前处理过程，操作方便，分离度好，灵敏度高，具有良好的线性关系、精密度和准确度，为生物制药企业测定生物制剂中吐温 80 和泊洛沙姆 188 提供一种可选的解决方案方案
治疗性蛋白药物制剂中吐温80（聚山梨酯 80）和泊洛沙姆188检测方案(液相色谱仪)
治疗类生物药品 | 含量测定
Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统
检测仪器 1260 Infinity II Prime -
本实验采用Q Exactive高分辨质谱仪测定BlotGlycoTM O-Glycan样品制备试剂盒制备的2AB标记的Enbrel O糖链，建立了Q Ex-active分析糖蛋白O-糖链的样品前处理、色谱和质谱分析方法，为糖蛋白O-糖链的研发和生产检测提供快速、准确的分析平台。方案
Enbrel O-糖链中鉴定检测方案(液质联用仪)
检测仪器 赛默飞UltiMate 3000 基础自动系统液相色谱
赛默飞Q Exactive Plus LCMS 系统
检测仪器 Q Exactive Plus LCMS
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