细胞中培养、成像、计数检测方案(酶标仪)

智能文字提取功能测试中

系统参数 绚丽清晰的细胞图像&卓越的数据采集 ON5细胞成像微孔板检测系统 88Biolek 美国伯腾仪器有限公司 北京代表处 ( 北京市朝阳 区东四环中 路 62 号远洋国际 D座3 0 4 室，1 0 0025 电 话 ： + 8 61085865569 传 真 ：+8 6 1085861829 ) Cytation5细胞成像微孔板检测系统 全自动显微镜&多功能微孔板检测仪 Cytation5为用户提供了完备而灵活的的成像方式并具备强大的图像处理功能，足以和高端的显微镜和成像系统相媲美。广泛而全面的成像应用、灵活可升级的模块化设计以及具有有争力的价格，使Cytation5可以完美配合各类实验室的应用及预算。其独特的Gen5数据分析软件功能强大，操作界面友好，使用便捷，并可以与其他自动化设备进行对接。 Cytation5像胞成像微孔板检测系统整合了全自动的数字显微镜和多功能微孔板检测系统，为用户同时提供丰富的细胞表型信息和基于孔板检测的定量数据结果。由于配备有Hybrid专利技术， 因此其多功能检测模块也同时整合了灵活的带宽可调光栅系统和高灵敏度的滤光片检测系统，并可配合激光光源完成Alpha筛选分析。细胞显微成像最高可配合60倍物镜进行图像捕获，兼容荧光场、明场、H&E染色成像和相差成像。Gen5软件是专门为细胞成像及多功能检测所开发，可高效完成图片数据的采集和分析。 Cytation5可以配合优异的气体控制模块，为细胞生长提供最适的CO，/O.环境，另外可以通过程序控制环境的温度，最高可达65℃，并且具有线性、轨道和双轨道等震荡模式可选，程序控制震荡的强度和持续时间。一套独立的双自动加样器可以随时为实验操作提供精确的试剂加样操作，尤其对于那些加样后需要立即检测的实验，是非常实用而有效的功能模鄚。 Cytation5可提供最为简单快速的细胞成像，其多样的检测功能包括：倒置荧光成像、明场及H&E染色成像、相差成像等。配合气体控制、多种检测耗材和丰富的检测模式， 使Cytation5成为一套强大的细胞成像检测工作站。Gen5软件可以提供简单方便的图像捕获操作，不论是聚焦、LED强度还是曝光均可全自动完成。16bit科学级CCD采用索尼公司的芯片，同时配合高质量光学元件可以提供优异的图像质量。 Cytation5的孔板检测模块应用更为广泛，其多功能检测系统可以完成荧光强度、时间分辨荧光、荧光偏振、Alpha检测、发光以及紫外/可见吸收光的检测。所有检测模式均兼容6-384孔板。如果在实验流程中随后加入细胞成像操作， Gen5软件的Hit Pick功能可以根据检测信号的强度阈值来挑选出目标孔进行成像。以上流程既提高效率又极大的减少了数据分析量，同时也节省了数据的存储空间。 Cytation5可以通过Gen5软件进行定量检测和图像采集与分析。只需轻点鼠标即可轻松完成微孔板内培养细胞的计数工作。细胞计数和成像统计均可以自动完成，其分析选项灵活而强大，无论是细胞培养板还是玻片，均可胜任。 成像模式 的图像结果。 Z-stacking是进行3D细胞成像检测的一项重要应用，例如类瘤体，细胞球以及悬滴培养分析等，这类样品无法在物镜固定的景深范围内进行整体成像，而需要在不同层面进行聚焦，来获取完整样品的图像信息。另外，一些活体样品的检测如斑马鱼、线虫等，还有血管形成和官腔形成等分析，均需要在基质胶内完成，并需要z-stacking功能进行多层面聚焦及成像，从而获得叠加后的整体图像。Cytation5可以最多进行50层的聚焦叠加，进而满足3D样品对重要细节的成像需求。Gen5软件的z-projection功能，可以提供灵活的图像叠加模式，将z-stack所获得的不同层面的图像，整合为一个富含整体信息的图像。 图像拼接 Gen5为用户提供了高级的图像拼接模式，方便用户对大体样品进行图像的采集和分析，这类样品包括： 大面积培养细胞样品 超出物镜视野范围的大样品 组织切片，如H&E染色切片 活活胞动态分析，细胞可能会移动出视野范围 Gen5的图像拼接功能，可以将多个成像视野间的缝隙进行计算融合，从而显示为一幅完整的图像，并且保证样品呈现的准确性和计算的精确性，能够为用户提供更为丰富的数据结果。 在96孔或384孔的明场细胞成像中，由于“弯月面"效应的存在，光线对样品的照射不均一，会导致类似“牛眼”的影像扭曲。数码相差技术可以纠正这一现象，消除光线不均所造成的影响，从而获得更为均一，对比更为明显的图像。 细胞计数&测量 Gen5软件可以提供准确和智能化的细胞计数，先进的图像处理工具，如图像平滑和背景淡化等，可以获得对比度更好、更为均一的图像效果，便于对图像的一些细节进行分析，如大小，圆度，强度以及自动计算等。 亚群分析 如果在一个群体样品中，存在多个亚群， Gen5软件可以通过信号的强度或形状的不同加以分群，可以用于不同群体的计数分析，如转染效率评价，核转位分析和细胞周期分析。 高质量硬件及相关配件 Cytation5拥有BioTek最为专业的微孔板测模块同时配以高端的成像硬件，为用户提供最为优质的工作流程效率。是一套真正独特的活细胞分析系统。 Olympus和Zeiss物镜 采用Semrock滤光片的LED模块和滤光片模块 .aaa. 气体控制模块 Take3微量检测板 玻片和培养瓶适配器 传统的细胞荧光染色成像分析主要由手动显微镜完成，但是样品通量过低。如果需要分析更高通量的样品，则需要购买价格更高的显微镜。本研究介绍了Cytation的全自动数字荧光显微镜功能模块。Cytation是一款全新细胞成像多功能微孔板检测系统，既可以采用PMT进行荧光强度检测，还具有配备CCD相机的全自动倒置荧光显微镜。Gen5数据分析软件可以在微孔板中进行细胞图像分割与细胞计数。在96孔板中进行一种颜色的细胞荧光染色，并分别采用4倍和20倍物镜进行成像。 细胞计数时，采用Gen5软件中“分离接触对象"功能。 人U-2OS细胞采用BacMam法转染后的细胞成像及转染效率分析 组织细胞瞬时转染的常规方法是在培养的细胞中引入新型的基因元件。但是，在向许多组织细胞中引入外源DNA的操作过程中，实验转染效率主要依赖于引入基因的适量表达。这篇应用中，我们介绍在活细胞中采用BacMam基因传递系统和Cytation细胞成像多功能微孔板板测仪，优化和评估基因表达和转染效率。 BacMam Histone H3病毒感染细胞，并进行活细胞成像分析。 传统上荧光显微镜均用于载玻片样品的观测，但是如今的成像分析实验越来越倾向于使用通量更高的96和384孔微孔板，可以轻易完成大量样品的自动成像和分析。这些已属于高内涵筛选(HCS)的应用领域。本应用中，对样品进行荧光成像之前，采用EL406TM洗板分液系统全自动完成细胞样品的固定和染色等操作，最终采用Cytation进行成像分析。 U-2OS细胞中线粒体、F-actin和细胞核染色。 采用卵巢癌上皮细胞系对IL-6的分泌和细胞活性进行多重分析 表皮生长因子受体(EGFR)在70%的卵巢癌上皮细胞(EOCs)中都有表达。在卵巢癌病人的腹水中发现IL-6高表达。研究发现，配体激活EGFR后，活化NFkB依赖的转录，并诱导促炎症IL-6细胞因子分泌。在这篇应用说明中，我们建立多重分析实验，通过抑制剂抑制EGFR和NFkB的激活水平，监测IL-6分泌和细胞活性。在实验过程中，我们选用细胞培养板和HTRF检测板。细胞处理后，取上清到HTRF检测板中，检测IL-6浓度；细胞培养板中采用荧光探针进行标记，对细胞活性进行成像分析。实验中的检测和成像均采用Cytation细胞成像多功能检测系统完成。 SKOV-3细胞，蓝色为细胞核DAPI染色，绿色为Phalloidin actin染色。 实验采用高密度细胞细斥法来进行细胞侵袭的相关研究。Oris TM Pro 细胞迁移分析法在96或384孔板的中心区域放置生物兼容胶质，培养细胞在胶质外围形成单侧贴壁细胞，随着细胞培养板中心胶质的溶解，板中心产生一个无细胞覆盖的观测区域。实验人员可以采用Cytaiton随时监测细胞在加入不同刺激剂或抑制剂后的爬行迁移情况，并对观测区域内细胞生长的情况进行测定和分析。 96孔板中每孔种植50K HT-1080细胞，每个2小时观测拍摄一次。 利用3D细胞培养技术进行激酶相关筛选分析 全新的3D细胞培养技术可以诱导细胞按照正常的组织构架和通信网络进行生长，大量应用于体外的药物筛选实验。本文采用3D细胞培养技术，促使肿瘤细胞与水凝胶质融合成团生长成为肿瘤样球体，通过微孔板的相关操作，进行elF4E和磷酸化eIF4E的定量分析。通过Cytation的滤光片系统和HTRF磷酸化检测试剂盒对培养样品进行磷酸化定量分析。同时系统温度控制于37℃并采用气体控制装置调定合适的O，/CO，浓度，配合轨道振荡模式，进行动态图像捕获。 20xz-stacked 对HCT116肿瘤球体进行成像。 基于血细胞计数板的自动化活/死细胞计数 细胞计数是最常规的生命科学实验之一。在日常细胞传代和进行细胞学实验时，都需要对细胞进行计数。虽然有多种仪器设备可以进行自动化的细胞计数工作，但使用血细胞计数板仍是成本最低的方法。通过使用配备相差成像模块的Cytation5可以实现血细胞计数板的细胞计数工作。这一自动化的方法相对人工计数更为准确。除此之外，通过台盼蓝染色细胞成像还可获得细胞存活比率的数据。 细胞相差成像和活细胞计数。 高通量全自动组织芯片扫描成像 组织芯片技术在生物医学领域有广泛的应用，包括生物样本库、标本和组织样品存档、样品分级分类、质量控制、分析实验中抗体的标记和染色优化等。Cytation5所具有的彩色明场成像，可满足样品的自然色彩成像和基于H&E染色的样品成像，其区域扫描及拼接模式则可满足组织芯片的整体扫描与成像需求。其倒置荧光显微成像模块则可以满足荧光标记的组织芯片的图像捕获。专有的玻片适配器可以完全适配组织芯片的样品玻片，并可以和储板器相互整合，进行高通量的芯片扫描成像操作。 Cytation5进行24点组织芯片成像，以及DAPI染色后的组织芯片及高倍成像。 疾病诱因(如癌细胞)，由疾病初始的位置转移到到体其他位置的过程，是癌症致死的主要原因，其相关性达到90%。因此也成为疾病治疗的关键环节。转移的过程涉及到到细胞由肿瘤的原始位置迁移出去，最后对周围或远处组织进行侵袭。Cytation5配备有长距离工作物镜，非常适合进行迁移小室类的实验成像，由于具有内室和外室，远距离工作物镜可以对位置较高的内室进行清晰成像，并可配合气体控制模块，对细胞侵袭的全过程进行动态监测。 MCF-7细胞在无血清和含10%血清下的侵袭过程。 细胞周期 化合物能够作用于细胞增殖的效应是基于ADME/TOX药物研发的关键点。很多抗癌药物的研究不仅仅看中药物对于正常细胞和癌细胞的毒性，还需要明确药物主要作用于细胞周期的哪个环节。采用核染料配合Cytation5的细胞成像与分析功能可以进行药物作用于细胞周期的研究与分析。 Hoechst 33342染细胞核，研究药物对细胞周期的作用。 活细胞RNA表达分析 RNA表达水平是细胞生物学研究的重要组成部分，然而常规的实验室技术在后续的样品制备中均需要对细胞进行裂解并且破坏性很大，而且扩增的方法可能会产生假阳性或错误的放大差异。采用Cytation5结合SmartFlareTM技术，可以对活细胞内RNA的表达进行实时监控。 不同浓度血清培养下， Hela细胞内RNA的表达水平。 利用相差成像技术对细胞形态及凋亡进行分析 基于细胞表型或基于细胞、组织、器官效应的分子药物筛选可追溯到最早的药物研发。其中基于凋亡的表型研究也是其中的重点，尤其是在肿瘤研究方面，可以帮助研究人员了解疾病的发病机制和探索可能的治疗手段。Cytation5的相差成像模块和气体控制模块相配合，可以无需任何外界干预手段(如标记、固定、裂解等)，动态细胞成像，并通过细胞圆度的分析，对细胞凋亡情况进行评价。 明场相差及荧光场标记追踪细胞凋亡情况。 Cytation5以其独特的光路设计保证了检测的灵活性和高灵敏性，可以适用于几乎所有的非同位位检测技术，包括Alpha技术 (AlphaScreen/AlphaLISA)、荧光偏振(FP)、时间分辨荧光(TRF)、荧光强度、发光及吸收光检测。 信号通路研究： Alhap筛选、TRF以及FP技术都可以用于信号转导通路研究，包括激酶研究、分子间相互作用以及翻译后修饰等； 离子通道研究：采用荧光或发光的标记方法，可以和细胞内的钙离子进行特异性的识别，并改变其发射光光谱特性，配合快速检测的自动加样装置，可以保证离子流检测的精确与准确； 报告基因研究：满足带有注射器的闪烁发光检测，GFP检测，基于荧光的报告基因检测和基于发光的BRET检测； 酶学研究：具有7个数量级的动态范围及短间隔、长时间的快速动力学检测，满足各类酶学研究的需求； 基因分型研究：基于滤光片系统的荧光偏振模块可用于SNP的基因分型研究； 细胞增殖及毒性研究：由于具有微孔板检测的所有技术，可以配合功能模块进行基于标记或ATP的细胞增殖及毒性研究； 定量检测：灵活方便的吸收光检测模块，包括紫外和可见光检测以及光谱扫描，同时兼容Take3微量检测板，因此适用于DNA、蛋白定量及ELISA定量等； Alpha筛选检测原理。 专利的温控模块： Cytation5配备了BioTek专利的4-Zone温控技术，具有高达65°℃的温控范围和在37°℃时±0.2℃的优异温控精确性。自然对流的加热方式可有效降低边缘效应，当实验板带盖或被封闭，可以通过在板顶和板底分别设定差异温度来有效降低凝集现象的产生，这一先进的抗凝集技术，可有效避免凝集现象对实验检测结果所产生的干扰。 专利的4-Zone温控，和独有的梯度控温抗凝集技术 先进的震荡模式： Cytation5具有线性、轨道和双轨道三种不同的震荡模式，以满足不同样品的检测需求，线性震荡为ELISA等实验分析提供强力的震荡效果；轨道震荡相对温和，可以为贴壁细胞类的实验提供保护；而双轨道震荡则提供不同方向的震动，以保证细胞和细菌样品处于悬浮状态。无论何种震荡模式，用户均可以通过程序设定来调整震荡的频率和时间。 先进多样的震荡模式 光栅检测带宽连续可调： Cytation5配备了新一代光栅系统，其带宽9-50nm连续可调1nm步进，与传统光栅系统的固定带宽相比，能够更好的配合荧光染料的特性，并且可灵活调整激发与发射侧光栅的带宽，以保证不同荧光染料检测的灵敏度。 跳跃加样与检测：具有超级灵活的加样和检测模式，用户可以根据样品的实验排布或孔板使用的情况，选择任意孔进行操作。 高密度孔域扫描：对于不均一样品或细胞培养样品，需要对全孔的信号进行扫描并计算均数， Cytation5可实现最高99x99的矩阵扫描，用户可根据矩阵图判断样品的信号分布并自动给出均数。 合作伙伴 BioTek通过多家试剂生产伙伴的名录，您可火完全信赖我们的仪器在广泛应用中的优异检测效果。登录www.biotek.com网站下载应用手册和相应试剂合作伙伴在BioTek仪器上进行检测的数据和检测条件。 diachemiRapid Definitive Detection Transcreener是BellBrook Labs的注册商标 HTRF和HTRF标记是CisBio Internationgal的注册商标 Predictor和LanthaScreen是Invitrogen Corporation的注册商标 Oris是Platypus Technologies的注册商标 DLR和DLReady 标志是Promega Corporation的注册商标 AlphaScreen是PerkinElmer，inc的注册商标 所有其他商标均属于BioTek仪器公司或其他各自的所有者 选择您需要的功能模块 模块化可升级设计 Cytation5采用了模块化的设计，在整套系统中搭载了基于光栅的检测模块、基于滤光片的检测模块、基于成像的检测模块、基于激光器的Alpha检测模块和相差模块。所有这些模块都采用了顶级的设计和元件，保证了检测的专业性。用户可以根据需求，放心的选择一个或多个模块进行组合，每一个模块都会带给用户最为专业和优异的检测结果。如果未来有额外的功能需求，也可以在本地轻松实现升级。 登录www.cytation5.com获取更多应用相关信息 www.biotekchina.com.cn 上海代表处关注微信平台，获取更多产品信息Biolekwww.biotekchina.com.cnE-mail： infochina@biotek.com 登录www.cytation.com获取更多应用相关信息Www.biotekchina.com.cn Cytation5是一套全新而独特的检测系统，采用革命性的技术将自动数字显微镜和方便灵活的多功能微孔板检测仪整合于一台仪器之内，非常适合细胞生物学领域的研究应用。Cytation5是为活细胞分析而量身定做，因此还具有其它的相关特性:温度控制可达65℃，多种震荡模式，CO2/O2气体控制装置以及支持延时分析技术。Cytation5细胞成像微孔板检测仪综合了活细胞工作站、高内涵筛选仪、多功能酶标仪的功能，它是真正意义上的多功能微孔板检测仪。 Cytation5的微孔板检测光路基于BioTek的Hybrid技术理念，综合了光栅光路和滤光片光路的优点。让用户既能选择灵活的数据分析，又能使用高灵敏度的数据定量。倒置的荧光及明场成像光路可以实现自动动态的图片捕捉，并实现图片的扫描拼凑（蒙太奇）。 Cytation5结合了数字宽场显微镜和多功能微孔板检测仪的功能特点，为用户提供了更为丰富的图片和数据分析结果，独特的整合设计可以同时得到定量数据、表型图片以及相关分析结果。同时配合相应的配件，可以在生物化学、活细胞分析以及固定细胞样品的检测中，得以无限应用：●细胞成像与分析●细胞增殖●细胞毒性●蛋白表达●分子标记定量●药物研发●基因表达●药物吸收与代谢●生物药物研发与筛选●环境检测●食品安全●核酸定量●蛋白定量●细胞迁移●细胞技术●亚群分析●Hit筛选