老鼠肝细胞中细胞结构，三维重构检测方案(扫描电镜)

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Application Data Sheet HITACHIInspire the NextSEMApplication Data Sheet利用SU5000和Gatan 3View 2XP对老鼠肝细胞超薄切片观测及三维重构 SEM 利用SU5000和Gatan 3View 2XP对老鼠肝细胞截面的高分辨截面观测 Fig. 1.老鼠肝细胞高分辨BSE图像 仪器：热场发射SU5000， Gatan 3View@ 2XP SEM (加速电压：2kV，真空模式：高真空) 3View(图像大小： 16k×16k，像素点尺寸： 2 nm/pixel，观测区域：33 umx33 um) Zum 4 2 Y um 2 6 X um 8 (a) 超薄切片观测图像 (b)三维重构结果(长为10pm的正方体) (c)三维重构 (XY 面， YZ 面，， XZ面) Fig. 1.老鼠肝细胞连续切片及三维重构结果 仪器：热场发射SU5000Gatan 3View@ 2XP 3D 重构过程： Image Pro Premier 3D(Media Cybernetics Inc.) SEM 条件：加速电压 2 kV 真空模式高真空3View条件：图像尺寸88k×8k像素尺寸4l.4 nm/pixel观区域36 um×36 um切片厚度50 nm切片数 300 SEM Zum a)： 2 2 4 8 9 10 11 Y um 6 8 大 (b))： 10 12 2 0.9 1.2 1.3 体分布[um3] 图1.3D重构图像 (a) 连续截面BSE图像堆叠图像结果 Fig.2.线粒体的尺寸分布直方图(a)面分布， (d)体分布 (b)线粒体及细胞核体分布(红色为线粒体，绿色为细胞核) 仪器：热场发发SU5000 通过连续切片获得的三维重构结果，可选择性的得到所需信息，如线粒体的分布，结构，尺寸数目的面分布及体分布等。 图1为三维堆叠图及后续分析出的线路体(红色)及细胞核(绿色)i的分布图。可直 观地观测到线粒体的形状，结构及分布。 图2显示的是线粒体的尺寸分布直方图，可通过软件直接得到线粒体的体分布和面分布， 进而分析细胞内线粒体的数目及分布。 切片厚度50 nm 切片数 300 图.为老鼠肝细胞整体染色并树脂包埋后的高分辨截面观测结果，图中可观测测整个细胞及细胞器的分布。右图是左图黄框内区域数字放大倍后的结果，图中可明显观测到细胞核(N)及其附近的内质网(ER)，线粒体(M)及嵴(←)，高尔基体(G)，糖原颗粒()分布。Application development Dept. Tomoko Shimamori， Shuichi Takeuchi， Marketing Dept. Mami Konomi Application development Dept. Tomoko Shimamori， Shuichi Takeuchi， Marketing Dept. Mami Konomi