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Hitachi High Performance Liquid Chromatograph Page .2Hitachi High-Technologies Corporation Hitachi High-ech Chr master 水溶性维生素的同时分析 维生素是必须的营养素,分为水溶性维生素和脂溶性维生素。此次,使用反相柱对9种水溶性维生素成分进行了同时分析,以DAD进行了检测。通过使用DAD,检测出的成分可以通过吸收光谱来进行鉴定,因此,用于像食品这样杂质成分较多的样品分析时尤为有效。 由于维生素C和异抗坏血酸不稳定,制备样品时或者放置一段时间后很容易降解,因此要获得其线性及重现性有些困难,需要引起注意。因此,请将本分析条件用于主要以定性为目的的实验。需要定量时,推荐对各维生素分别进行试验。 ◆水溶性维生素的同时分析◆ NH2 HCO HO. l标准样品 浓度及结构式 H3c H3C HO OH 成分名 维生素Bi 0H 维生素B(硫胺素)* 维生素C 维生素B,(吡哆醇)* CHOH 烟酰胺 CH H-C-OH 维生素B,(氰钴胺) CH3 维生素B12 CHOH H H 抗坏恤酸葡萄糖苷 .OH 8 维生素C(抗坏血酸) H 心OH )H 异抗坏血酸 ~OH ~NH, 抗坏血酸葡萄糖苷 维生素B2 维生素B,(核黄素) HC 烟酸 烟酰胺 _OH OI HO· (*)使用其盐酸盐 20 LO OH)H H HO DH 烟酸 异抗坏血酸 800- 600一 烟酰胺 400- 烟酸 200- 200 300 400 nm 3000- 2000- VB, VB, 100- 0 200 300 400 nm 150 ~抗坏血酸葡萄糖苷 -VC 100 -异抗坏血酸 50 0 200 300 400 nm 400 300 由于离子对试剂很难从色谱柱 VB 中完全除去,因此推荐将使用 200- 过的色谱柱作为维生素分析专 用。 1000- 0 200 300 400 nm 【水溶性维生素的光谱图】 5110泵、5210自动进样器、5310柱温箱、5430二极管阵列检测器、数据处理系统 Page.1 HitachiHigh-ech 1线性 各成分标准曲线的范围均为0.1~50 mg/L, r=0.999以上,线性关系良好。 但是,维生素C、异抗坏血酸、维生素B,很难得到线性,需要引起注意。 【VB6的标准曲线】 l样品分析例①:营养剂 营养剂与功能饮料都在10.7分的时候检测出了峰,将其鉴定为与其保留时间接近的异抗坏血酸尚有疑虑,因此对其光谱进行了确认,得知是其他物质。如上,对于杂质成分较多的食品等样品来说,能够得到光谱信息的DAD非常有用。 50 -VC - Sample RT=9.4分 200 300 400 【营养剂的前处理方法】 【检出的各峰与标准样品的光谱图】 称取2mg样品,以流动相定容至10mL, 以0.45 um 微孔滤膜过滤 样品分析例②:功能饮料 —VB - Sample RT=2.3分 200 300 400 nm -烟胺 Sample RT=4.2分 200 300 400 nm 【功能饮料的色谱图与等高线图】 【检出的各峰与标准样品的光谱图】 【功能饮料的前处理方法】 以流动相稀释10倍,以0.45 um 微孔滤膜过滤 注意:本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据。本仪器只是研究用仪器,而不是诊断、治疗或预防人或动物疾病的医疗仪器。
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