奶粉中牛磺酸检测方案(液相色谱柱)

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采用 TSKgel 色谱柱参考 GB 5009.169-2016分析色谱图集 (荧光检测器) 牛磺酸 Taurine 【基本信息】 牛磺酸，又称β-氨基乙磺酸。纯品为无色或白色斜状晶体，无臭，牛磺酸化学性质稳定，不溶于乙醚等有机溶剂，是一种含硫的非蛋白氨基酸，在体内以游离状态存在，不参与体内蛋白的生物合成，但它却与胱氨酸、半胱氨酸的代谢密切相关。人体合成牛磺酸的半胱氨酸亚硫酸羧酶(CSAD)活性较低，主要依靠摄取食物中的牛磺酸来满 足机体需要。 【国标条件】 色谱柱： C18反相色谱柱(250mmx4.6mm， 5um)或相当者。 流动相：：乙酸钠溶液+乙腈=70+30。 流动相流速：1.0mL/min 柱温：室温 检测器：荧光检测器：激发波长：330nm，发射波长：530 nm。 进样量：20pL 【前处理步骤】 奶粉样品：准确称取固体试样1~5g (精确至 0.01 g)于锥形瓶中，加入40℃左右温水40 mL，摇匀使试样溶解，放入超声波振荡器中超声提取 10 min。冷却到室温，加1.0mL 沉淀剂I，涡旋混合， 1.0 mL沉淀剂I，涡旋混合，转入100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，充分混匀。样液于5000 r/min 下离心10 min， 取上清液备用。 准确吸取1.00 mL 所得上清液到 10 mL 具塞玻璃试管中，加入1.00 mL 碳酸钠缓冲液， 1.00mL丹磺酰氯溶液，充分混合，室温避光衍生反应2h(1h后需摇晃1次)，加入 0.10 mL盐酸甲胺溶液，涡旋混合，以终止反应，避光静置至沉淀完全。取上清液经 0.45 pm 微孔滤膜过滤，取滤液备用。衍生物在4℃以下可避光保存48h。 另取 1.00 mL标准工作液，与试液同步进行衍生。 【分析条件】 色谱柱：TSKgel ODS-100Z (I.D.4.6 mmx250 mm， 5 um) 流动相：乙酸钠溶液(10mmol/L， pH 4.2)+乙腈=70+30， 流速：!：1.0mL/min 柱温：30℃ 检测器：荧光检测器(激发波长：330nm， 发射波长：530nm) 进样体积：20pL 分析结果： counts min 图1牛磺酸对照品溶液谱图 图2牛磺酸样品溶液谱图 图3牛磺酸样品溶液重复性谱图 No. 名称 保留时间(min) 理论塔板数 精密度 1 牛磺酸 (Taurine) 8.074 8719 0.46%(<10%) 结论 采用上述方法可以满足国标 GB 5009.169-2016 对牛磺酸分析测定要求。 本文采用TSKgel ODS-100Z（4.6 mmIDX250mm,5um）反相色谱柱，参照国标GB 5009.169-2016对奶粉样品中牛磺酸含量进行了测定（荧光检测）。结果表明，该分析方法可以满足国标对牛磺酸分析测定的要求。