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重组单克隆抗体中肽图检测方案(液相色谱柱)

检测样品其他

检测项目肽图

关联设备共1种

方案详情文

肽图是用于对蛋白质药物一级结构进行鉴定以及检测蛋白质产品批间一致性的常规检测方法。一般进行肽图谱鉴别时往往需要时间较长，如重组人胰岛素肽图测定在中国药典、美国药典、欧洲药典中均采用反相HPLC法，检测时间长达60~86min不等；本公司的重组单克隆抗体肽图的检测时间也长达52分钟。目前的方法中使用的常规液相色谱仪和液相分析柱，分析时间长，且有机试剂耗用量大，快速液相色谱仪和快速液相分析柱的应运而生，使得分析时间和试剂耗量大大降低。但针对目前基层实验室常规液相色谱仪的普及，与快速液相分析柱的不兼容性，使得快速分析检测很难实现。安捷伦公司最新推出的Poroshell 120系列表面多孔层色谱柱，由于其具有低反压，高柱效的特点，从而真正实现在常规液相色谱仪上进行快速分析的可操作性。本文使用Poroshell 120色谱柱，并采用常规液相色谱仪，对重组单克隆抗体肽图检测方法加以改进，分析时间和试剂耗量均降低了1/2以上，一次分析仅需26分钟；色谱峰的理论塔板数及分离度也优于常规检测方法。

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摘要肽图是用于对蛋白质药物一级结构进行鉴定以及检测蛋白质产品批间一致性的常规检测方法。一般进行肽图谱鉴别时往往需要时间较长，如重组人胰岛素肽图测定在中国药典、美国药典、欧洲药典中均采用反相HPLC法，检测时间长达60~86min不等；本公司的重组单克隆抗体肽图的检测时间也长达52分钟。目前的方法中使用的常规液相色谱仪和液相分析柱，分析时间长，且有机试剂耗用量大，快速液相色谱仪和快速液相分析柱的应运而生，使得分析时间和试剂耗量大大降低。但针对目前基层实验室常规液相色谱仪的普及，与快速液相分析柱的不兼容性，使得快速分析检测很难实现。安捷伦公司最新推出的Poroshell 120系列表面多孔层色谱柱，由于其具有低反压，高柱效的特点，从而真正实现在常规液相色谱仪上进行快速分析的可操作性。本文使用Poroshell 120色谱柱，并采用常规液相色谱仪，对重组单克隆抗体肽图检测方法加以改进，分析时间和试剂耗量均降低了1/2以上，一次分析仅需26分钟；色谱峰的理论塔板数及分离度也优于常规检测方法。小结本法采用Poroshell120，在基层普遍使用的常规液相色谱仪上测定重组单克隆抗体肽图。该方法的分析速度更快、试剂消耗少、灵敏度更高、回收率和重复性均符合批量样品的检测要求，结果令人满意，很适合于基层检测蛋白类产品肽图工作的开展。

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