土壤中磺酰脲类中除草剂残留量检测方案(固相萃取仪)

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iGASSPE-02-2019 固相萃取法用于土壤中磺酰脲类除草剂残留量的测定 1前言 磺酰脲类除草剂是一种能有效防除阔叶杂草的除草剂，它具有低毒和高选择性的优点。但残留药害十分突出，容易影响地表水的水质，所以，其在生态方面尤其是土壤中的安全性受到人们的高度重视。土壤中微量的磺酰脲类除草剂残留就可对当茬及后茬作物造成药害，且对环境带来的污染和生态毒性也十分严重。因此，对磺酰脲类除草剂在土壤中环境行为进行研究具有重要意义。本文用 SPE400 全自动机械臂固相萃取仪对土壤中磺酰脲类除草剂残留量的整个检测过程中的净化环节进行了实验，有效的缩短了样品中目标物的固相净化所需要的时间，提高了工作效率，也节约了人力。 2仪器与试剂 2.1仪器 SPE400 全自动机械臂固相萃取仪；液相色谱-质谱仪；超声波清洗机；离心机；涡旋混合器 2.2试剂及耗材 乙腈(色谱纯)、磷酸二氢钾、磷酸(83%)、氢氧化钠、冰乙酸 农药标准物质：纯度≥96% C18柱，6ml，填充物 500mg 磷酸缓冲溶液： 0.038mol/L的磷酸二氢钾溶液用氢氧化钠调节 pH至7.8； 磷酸缓冲活化液：磷酸缓冲溶液用磷酸调节 pH至2.5；' 07 乙腈+磷酸缓冲溶液(2+8))：20mL乙腈和 80mL磷酸缓冲溶液充分混匀后备用； 乙腈+磷酸缓冲溶液(9+1)：90mL乙腈和10mL 磷酸缓冲溶液充分混匀后备用。 3实验方法 3.1实验步骤 3.1.1取样 土壤样品经过研磨过 1mm 筛后备用。 3.1.2提取 精确称取过筛后的土壤样品 10g于聚四氟乙烯离心管中，加入10mL的乙腈+磷酸缓冲溶液(2+8)，在涡旋混合器中剧烈涡旋 1min 后超声提取 5min ， 再在 4000r/min 下离心 5min ，提取步骤重复3次，每次提取液均为10mL。合并3次提取并离心后的上清液于20mL样品管中，加入约1mL磷酸(83%)调节溶液 pH至2.5±0.1，待净化。 (称样后) (加入提取液后) (离心后) 3.1.3固相小柱净化 过程 试剂名称 用量 速度 等待时间 氮吹时间 空气助推 次数 活化 乙腈 5mL 5mL/min 0s Os 2mL 1 磷酸缓冲溶液 5mL 5mL/min 0s Os 2mL 1 上样 13mL 2mL/min 0s 600s 2mL 1 润洗上样 乙腈+磷酸缓冲溶液 (9+1) 13mL 60mL/min Os 0s 2mL 2 洗脱 乙腈+磷酸缓冲溶液(9+1) 3mL 3mL/min 5s Os 2mL 1 收集的洗脱液于氮吹仪上吹干后，用1mL乙腈定容供色谱测定。 3.1.4色谱测定条件 色谱柱：C18 柱温箱温度：30℃ 进样体积：10uL 检测波长：254nm 07 流动相组成 时间(min ) 水(0.2%冰乙酸)的体积分数(%) 乙腈的体积分数(%) 甲醇的体积分数(%) 0.00 80 10 10 14.00 10 45 45 16.00 4 48 48 18.00 80 10 10 3.1.5质谱条件 采用正电子电离方式，扫描范围 m/z100~500， 碎裂电压为 2.75V，喷雾电压为 3.5kV ，雾化气压力为 40psi，干燥气(N2)流速为 6mL/min ， 温度为350℃，碰撞气为氦气。9种磺酰脲类除草剂的质谱检测结果参照其国标标注。 3.1.6色谱测定 定性测定：保留时间及质谱提取离子定性，如果此方法不能确证，可以采用以下方式，将前处理后的样品按照一定倍数浓缩后或者按照进样量重新进样。 定量测定：分别吸取10uL 混合标准溶液及样品净化液注入色谱仪中，以试样的提取离子峰面积与标准峰对应提取离子峰面积比较，外标法定量。 4结果与讨论 4.11 活化步骤的流速保持适中，保证活化液充分湿润吸附剂即可。上样和洗脱过程流速应当适当慢一些，以使目标物尽量多的保留在柱内以及最后可以完全将其洗脱。 4.2上样步骤里国标要求样品溶液全部过柱后抽真空10-15min ，因仪器采用的全部是正压上样，故可以设置为氮吹10min 代替抽真空。 4.3润洗上样中 60mL/min 的度洗速度可实现喷淋润洗，减少样品溶液的残留比。 07 4.4洗脱步骤里因洗脱液流出小柱较为缓慢需设置一段等待时间，以保证足量的洗脱液可以充分将目标物洗脱。 4.5整个实验流程里默认的空气助推即可将管路里的试剂全部排出，此外再设置一较小体积的空气助推有助于将小柱底部残留的试剂排出。 4.6结论 用固相萃取法净化土壤中磺酰脲类除草剂残留量的过程实现自动化，减少人力的消耗，实验过程中使用的有机溶剂采用密封处理，降低了对人体的伤害且仪器能精准的控制活化、上样、洗脱等溶剂流速，使样品净化的更为充分。 ( 参考文献 ) [1] NY/T 1616-2008土壤中9种磺酰脲类除草剂残留量的测定液相色谱-质谱法 注意事项 磷酸缓冲溶液调节 pH时建议使用较高浓度(如0.5mol/L)的氢氧化钠，避免加入的氢氧化钠量过多影响缓冲溶液的浓度。 1 1 前言磺酰脲类除草剂是一种能有效防除阔叶杂草的除草剂，它具有低毒和高选择性的优点。但残留药害十分突出，容易影响地表水的水质，所以，其在生态方面尤其是土壤中的安全性受到人们的高度重视。土壤中微量的磺酰脲类除草剂残留就可对当茬及后茬作物造成药害，且对环境带来的污染和生态毒性也十分严重。因此，对磺酰脲类除草剂在土壤中环境行为进行研究具有重要意义。本文用SPE400全自动机械臂固相萃取仪对土壤中磺酰脲类除草剂残留量的整个检测过程中的净化环节进行了实验，有效的缩短了样品中目标物的固相净化所需要的时间，提高了工作效率，也节约了人力。2 仪器与试剂2.1 仪器SPE400全自动机械臂固相萃取仪；液相色谱-质谱仪；超声波清洗机；离心机；涡旋混合器2.2 试剂及耗材乙腈（色谱纯）、磷酸二氢钾、磷酸（83%）、氢氧化钠、冰乙酸农药标准物质：纯度≥96%C18柱，6ml，填充物500mg磷酸缓冲溶液：0.038mol/L的磷酸二氢钾溶液用氢氧化钠调节pH至7.8；磷酸缓冲活化液：磷酸缓冲溶液用磷酸调节pH至2.5；’乙腈+磷酸缓冲溶液（2+8）：20mL乙腈和80mL磷酸缓冲溶液充分混匀后备用；乙腈+磷酸缓冲溶液（9+1）：90mL乙腈和10mL磷酸缓冲溶液充分混匀后备用。