白酒中塑化剂检测方案(液质联用仪)

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ANALYSIS & TEST分析与检测 分析与检测ANALYSIS & TEST AB SCIEX针对白酒中塑化剂的最新检测解决方案 近日来，媒体报道某白酒公司生产的产品中共检测出3种塑化剂成分，分别为邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)，引发公众广泛关注，在此之前，卫生部规定食品中部分塑化剂限量，如DBP残留不超过0.3mg/kg.因此白酒中塑化剂的分析成为食品安全实验室的高度关注项目。 目前，国家标准委员会现已发布标准《GB/T21911-2008食食品中邻苯二甲酸酯的测定》，使用气相质谱仪标准用于分析食品中塑化剂。但是考虑到气质方法中样品处理后待分析液体中不能含有水这一因素，标准推荐气质方法不适合用于白酒中的塑化剂的分析。此外，塑化剂种类包含800多种，单依靠气相质谱法难以满足逐渐扩大的塑化剂范围，所以国家各相关部门正在酝酿新液相色谱法来覆盖更多的塑化剂检测。 在媒体报道白酒中检测出塑化剂成分剂， AB SCIEX公司亚太应用支持中心上海实验室迅速开发了以白酒为基质的样品中邻苯二甲酸酯二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)5种常见塑化剂的解决方案。针对液相系统中普遍存在DBP. DIBPDEHP等的本底干扰问题，专门开发了采用预吸附柱去除干扰的方法，以保证这些常见塑化剂的准确测定。 实验内容 1.仪器设备和试剂 AB SCIEX公司4000 QTRAP系统配岛津UFLC液相，Phenomenex公司Kinetex C18，100A， 2.6u， 100mmx4.6mm色谱柱；预吸附柱Agilent poroshell EC-C18， 2.7um， 4.6mmx50mm、 标准物质(纯品)、甲醇(色谱纯)、乙醇(色谱纯)、去离子水 (Millipore超纯水，电阻≥18.2MQ·cm)、 2.色谱条件 流动相A：含0.1%甲酸水溶液，B.甲醇，流速及梯度程序见表1. 表1液相色谱的梯度洗脱条件 时间(min) 流速(mL/min) A(%) B(%) 0.0 0.5 60 40 2.0 0.5 20 80 6.0 0.5 20 80 6.1 0.5 5 95 10.0 0.5 5 95 10.1 1.0 2 98 12.5 1.0 2 98 12.6 0.5 60 40 18.0 0.5 60 40 3.质谱条件 (1)离子源参数 电离模式为ESI*：碰撞气CAD设置6 (medium)；气帘气Curtain gas设置25雾化气Gas1/Gas2设置55/55.喷雾电压IS设置5500V，离子源温度TEM设置600℃， (2)化合物参数(见表2) 表2化合物参数 化合物 01 Q3 Time(msec} 碰撞能量CE(eV) 去簇电压DP(V) DMP 195195 135 20 4447 43 133 20 DIBP 279279 223167 2020 1928 50 DBP 279279 205 2020 2147 50140 149 DEHP 391 167 20 40 77 23 391 279 20 DINP 419 275 2020 2074 40 419 149 注：①本实验只针对5种常见的塑化剂进行检测；②因为此类化合物在容器、流动相及色谱中广泛存在，应尽可能避免使用peek管，在液相部分尽可能用金属管路代替peek管， 4.标准溶液的配制 5种塑化剂用甲醇稀释到1000mg/mL的标准储备液，使用时用甲醇：水为1：1的溶剂稀释到50、100，500.1000ng/mL的混合标准工作浓度. 5.样品制备 移取摇匀后的白酒试样直接进样待质谱测定。 实验结果与讨论 1.标准溶液及样品色谱峰 DBP， DIBP， DEHP液相系统存在本底干扰，分析中采用预吸附柱将系统干扰，图1中显示通过使用预分析柱将色谱系统的杂质干扰峰与标准溶液的色谱峰分开，这里保留时间7.3~7.8分钟之间色谱峰为DBP， DIBP系统干扰，保留时间10.6分钟色谱峰为DEHP系统干扰，即使利用预吸附柱能够将液相系统中的干扰排除，实验过程中仍需应尽可能减少干扰或污染，以免影响数据准确性。 图1相关色谱图(上图为常见5种邻苯二甲酸酯类标准溶液色谱图，浓度为100ng/mL；下图为白酒样品色谱图；其中保留时间在7.3~7.8分钟之间的两组峰为来自色谱系统的杂质干扰) 从图1中可以明显看到，在白酒样品中检出DMP、DIBP、DBP，DEHP和DINP 5种邻苯二甲酸酯类化合物， 2.稳定性和准确度 以乙醇、去离子水按照1：1模拟空白基质，通过添加标准溶液考察方法重现性。通过添加50ng/mL、100ng/mL.1000ng/mL这3个浓度的标准溶液，每个样品制备重复3次，采集数据重复3次(n=9)，计算方法重现性，结果发现各组分结果相对标准偏差均小于4%，通过考察不同品牌的白酒样品，塑化剂均不同程度检出。 塑化剂鉴定 实验中塑化剂分子量小，背景干扰严重，定量结果容易出现假阳性。借助AB SCIEX公司QTRAP系统，采用增强子离子扫描(EPI)、三级子离子扫描(MS3)、三级离子定量(MRM3)模式用于化合物定性，实现一次进样定性定量，实验证实，以塑化剂DMP为例，采集MRM数据定量的同时得到准分子离子峰m/z195的EPI质谱图(图2)，通过与标准溶液质谱图的对比，确证疑似色谱峰的真伪，鉴定阳性样品，或者在阱内生成三级碎片，利用三级子离子与标准溶液的对比鉴定化合物的真伪(图3a.c.d).此外，选择特定的三级子离子采集MRM3数据，可有效提高质谱选择性，减少背景、基质干扰，提高定量准确度(图3b.e)， 图2塑化剂DMP标准溶液的MRM色谱图a及同时采集的增强子离子数据b 图3QTRAP系统针对塑化剂阳性样品确证的独特方式 此外，在运行MRM→IDA一EPI基础上，通过普库检索模式，得到化合物与标准谱库的相似度(匹配度、反相匹配度)，可同时实现色谱峰定量定性分析。 结论 AB SCIEX公司一直致力于为用户提供全方位的解决方案，在本次塑化剂曝光事件发生后，迅速组织专业人员建立相关的检测方法，在第一时间为用户提供高效液相串联质谱法测定白酒中塑化剂的整体解决方案，方法重现性好，稳定性高、适合白酒中塑化剂的确证和定量检测，LS 品安全导刊合刊 Jan~Feb CHINA FOOD SAFETY / 为解决《GB/T 21911-2008 食品中邻苯二甲酸酯的测定》中样品处理后分析液体中不能含有水这一因素，使用AB SCIEX公司4000 QTRA系统配岛津UFLC液相色谱仪检测白酒中塑化剂，方法重现性良好，稳定性高，适合白酒中塑化剂的确证和定量检测。