西洋参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1检测方案(液相色谱仪)

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文档编号：LC-K2025-01-200501-02 西洋参中人参皂苷 Rg1、Re、Rb1的测定高效液相色谱法 一、摘要 本文使用悟空 K2025 高效液相色谱仪测定西洋参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。其连续进样7针的峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。 二、背景 西洋参具有补气养阴，清热生津。用于气虚阴亏，虚热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干。西洋参为市场上较为常见的名贵药材，其主要的活性成分为皂苷类，如人参皂苷Re、人参皂苷Rb1等。在2020年版《中国药典》中规定了利用高效液相色谱法测定西洋参中人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量以控制药物的质量。 三、实验过程 1范围 适用于西洋参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的测定 2原理 人参皂苷Rg1、Re、Rbl易溶于甲醇，在203nm处有紫外吸收，使用高效液相色谱法进行检测，外标法定量。 3试剂与材料 3.1水：符合 GB/T6682 的一级水； 3.2乙青：色谱纯； 3.3磷酸：优级纯； 3.40.1%磷酸水溶液：吸取 1mL 磷酸用一级水定容至1L，过 0.22um滤膜。 4仪器与设备 4.1高效液相色谱仪(悟空仪器K2025)：配有紫外检测器； 4.2分析天平：精确到0.0001g； 5测定步骤 5.1样品前处理 客户提供处理后的样品 5.2测定 5.2.1色谱条件： a)色谱柱： C184.6×250mm， 5um b)流动相： A：乙腈；B：0.1%磷酸水溶液； c)柱温：40℃； d)进井量：10pL； e)流速：1mL/min； f)波长：203nm； h)梯度洗脱程序见表1： 表1梯度洗脱程序 时间/min A%(乙腈) B%(0.1%磷酸水溶液) 0 19 81 25 20 80 60 40 60 90 55 45 100 60 40 110 19 81 120 19 81 6结果计算 人参皂苷 Rg1、Re、Rb1测定浓度c， 按公式(A.1)计算： Ai---对照品峰面积； A---供试品的峰面积(去除空白中的出峰)。 Ci_--对照品的浓度 7色谱图及重复性结果 对照品参考色谱图如图1 图11.对照品参考色谱图 对照品进样7针的色谱图叠加图如图2 图2.进样7针对照品色谱图的叠加图 表2进样7针对照品重复性计算结果 峰1Rg1 对照品1 对照品2 对照品3 对照品4 对照品5 对照品6 对照品7 平均值 SD RSD% 保留时间 33.760 33.818 33.675 33.755 33.685 33.747 33.675 33.731 0.054 0.161 峰面积 406.775 406.708 409.409 410.531 407.131 407.826 410.157 408.362 1.637 0.401 峰2Re 对照品1 对照品2 对照品3 对照品4 对照品5 对照品6 对照品7 平均值 SD RSD% 保留时间 34.550 34.602 34.470 34.542 34.482 34.532 34.472 34.521 0.049 0.142 峰面积 1203.446 1205.585 1212.382 1214.792 1204.29 1206.646 1213.277 1208.631 4.700 0.389 峰3Rb1 对照品1 对照品2 对照品3 对照品4 对照品5 对照品6 对照品7 平均值 SD RSD% 保留时间 54.850 54.860 54.808 54.873 54.813 54.84 54.833 54.840 0.024 0.043 峰面积 2855.097 2858.418 2876.438 2878.897 2856.686 2860.233 2877.542 2866.187 10.837 0.378 供试品参考色谱图如图3 图3 供试品参考色谱图 进样7针供试品色谱图叠加图如图4 图4 进样7针供试品色谱图叠加图 表3进样7针供试品重复性计算结果 峰1Rg1 供试品1 供试品2 供试品3 供试品4 供试品5 供试品6 供试品7 平均值 SD RSD% 保留时间 33.755 33.69 33.705 33.785 33.745 33.788 33.837 33.758 0.051 0.150 峰面积 131.802 131.307 131.923 132.136 132.972 132.87 132.272 132.183 0.589 0.446 峰2Re 供试品1 供试品2 供试品3 供试品4 供试品5 供试品6 供试品7 平均值 SD RSD% 保留时间 34.548 34.487 34.5 34.57 34.535 34.587 34.622 34.550 0.048 0.138 峰面积 1909.479 1914.707 1910.289 1912.251 1915.361 1918.142 1917.844 1914.010 3.453 0.180 峰3Rb1 供试品1 供试品2 供试品3 供试品4 供试品5 供试品6 供试品7 平均值 SD RSD% 保留时间 54.923 54.895 54.87 54.895 54.87 54.918 54.907 54.897 0.021 0.039 峰面积 4592.244 4604.912 4600.139 4605.279 4614.771 4623.34 4625.138 4609.403 12.166 0.264 8结论 采用wooking K2025 高效液相色谱仪对西洋参中的人参皂苷 Rb1、Rg1、Re进行测定，实验结果表明，在连续梯度洗脱条件的重复性，进样7针对照品 Rg1 保留时间的 RSD 为0.161%，进样7针对照品Re保留时间的 RSD 为0.142%，进样7针对照品Rb1保留时间的RSD 为 0.043%，均小于0.200%；进样7针对照品Rg1峰面积的 RSD 为 0.401%，进样7针对照品 Re 峰面积的 RSD 为0.389%，进样7针对照品Rb1峰面积的 RSD 为 0.378%，均满足药典要求小于2.0%。进样7针供试品 Rg1 保留时间 RSD 为0.150%；进样7针供试品 Re保留时间 RSD 为0.138%；进样7针供试品Rb1保留时间 RSD 为0.039%，均小于0.200；进样7针供试品Rgl 峰面积的 RSD 为 0.446%；进样7针供试品 Re 峰面积的 RSD 为 0.108%；进样7针供试品Rb1 峰面积的RSD 为 0.264%，均满足药典要求小于2.0%。因此，使用 wookingK2025的高效液相色谱仪测定西洋参中的人参皂苷 Rb1、Rg1、Re有良好的重复性。 一、摘要一、摘要本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定西洋参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。其连续进样7针的峰面积的重复性完全满足2020年版《中国药典》的要求。二、背景西洋参具有补气养阴，清热生津。用于气虛阴亏，虛热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干。西洋参为市场上较为常见的名贵药材，其主要的活性成分为皂苷类，如人参皂苷Re、人参皂苷Rb1等。在2020年版《中国药典》中规定了利用高效液相色谱法测定西洋参中人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量以控制药物的质量。