食品接触材料及制品中抗氧化剂迁移量检测方案(液质联用仪)

智能文字提取功能测试中

SSL-CA22-246Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-672 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 液相色谱-串联质谱法测定食品接触材料及制品中9种抗氧化剂迁移量 LCMSMS-672 摘要：本文利用岛津三重四极杆液质联用仪，建立了一种食品接触材料及制品中9种抗氧化剂迁移量的测定方法。结果表明，9种抗氧化剂各组分线性关系良好，抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168方法检出限为0.03 mg/kg，方法定量限为 0.30 mg/kg。 BHA、抗氧化剂2246、抗氧化剂300、抗氧化剂425、抗氧化剂1010、抗氧化剂1076方法检出限为 0.01 mg/kg， 方法定量限为0.10 mg/kg。标准溶液重复进样6针，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，各组分回收及精密度良好。该方法简单方便，灵敏度高、分析速度快，能有效检测食品接触材料及制品中的抗氧化剂含量。 关键词：三重四极杆液质联用仪抗氧化剂食品接触材料 抗氧化剂(Antioxidants) 是阻止氧气不良影响的物质。 它是一类能帮助捕获并中和自由基，从而祛除自由基对人体损害的一类物质。抗氧化剂常作为食品添加剂用来防止或延缓食品氧化，提高食品的稳定性和延长贮存期。抗氧化剂的正确使用不仅可以延长食品的贮存期、货架期，给生产者、消费者带来良好的经济效益，而且给消费者带来更好的食品安全。但是某些抗氧化剂的不适当补充会诱发疾病和增加人的死亡几率。因此需要对食品接触材料及制品中的抗氧 化剂进行监测是必要的。 本法采用20%(体积分数)乙醇进行浸泡提取，过滤后直接上机测定，具有操作简单，效率高，重现性好等特点。 本文利用岛津三重四极杆液质联用仪 LCMS-8050，通过液体浸泡提取法，建立了食品接触材料及制品中9种抗氧化剂迁移量的检测方法，供检测人员参考。 1.1仪器配置 检测器： LCMS-8050自动进样器： SIL-20AC XR输液泵： LC-30AD×2柱温箱： CTO-16色谱工作站： LabSolutions Ver. 4.5离子源：ESI 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱： XBridge BEH Shield RP18 Column， 50 mmx2.1 mm I.D.， 130A， 5 um 流动相：A相10 mmol/L 氟化铵，B相甲醇 流速：0.5mL/min 进样量：0.5uL 柱温：40℃ 洗脱方式：梯度洗脱 初始浓度：A相初始浓度为50%，B相初始浓度为50%，详见表1 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 0 泵 B.Conc 50 1.5 泵 B.Conc 90 3 泵 B.Conc 90 3.1 泵 B.Conc 100 10 泵 B.Conc 100 10.1 泵 B.Conc B.Conc 控制器 Stop 质谱条件： 离子源： ESI(-)& ESI(+)接口电压：4.5kV&-4.5 kV雾化气流速： 3L/min加热模块温度：400℃加热气流速：5.0L/minDL温度：250℃接口温度：300℃干燥气流速： 5.0L/min扫描模式：多反应监测(MRM)MRM 参数：详见表2 表2 抗氧化剂 MRM 参数 No. 化合物 ESI(+/-) 前体离子 产物离子 Q1PreBias(V) CE(V) Q3PreBias(V) 563.1 -46.0 -35.0 -22.0 1 抗氧化剂1010 + 1194.7 675.3* -46.0 -42.0 -20.0 729.15 -46.0 -39.0 -28.0 475.3* -20.0 -2.0 -18.0 2 抗氧化剂1076 + 548.45 419.2 -20.0 -3.0 -16.0 148.95 -20.0 -5.0 -16.0 147 -24.0 -26.0 -16.0 3 抗氧化剂 168 十 647.4 291* -24.0 -37.0 -15.0 347.1 -24.0 -28.0 -13.0 BHA 179.1 149.1 24.0 45.0 13.0 4 164.3* 10.0 33.0 16.0 5 抗氧化剂264 219.15 219.25* 30.0 28.0 21.0 203.25 30.0 27.0 19.0 6 抗氧化剂300 357.25 194.2* 20.0 15.0 20.0 179.2 11.0 23.0 16.0 抗氧化剂2246 339.2 163.05* 20.0 10.0 20.0 147.1 20.0 40.0 13.0 8 抗氧化剂425 367.1 177.05* 20.0 10.0 20.0 162.2 21.0 30.0 15.0 9 2，4-二叔丁基苯酚 205.15 189.25* 12.0 20.0 17.0 173.3 28.0 42.0 19.0 注：*表示定量离子 1.3标准溶液的配置 将各抗氧化剂标准物质配制成1 mg/mL的储备液，分别取适量各抗氧化剂储备液以20%((体积分数)乙醇为溶剂配制成含抗氧化抗264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168浓度为 0.03 ug/mL、0.30 ug/mL、1.5 ug/mL、3.0ug/mL、9 ug/mL、15 ug/mL， 含 BHA、抗氧化剂2246、抗氧化剂300、抗氧化剂425，、抗氧化剂1010、抗氧化剂 1076浓度为 0.01 ug/mL、0.1 ug/mL、0.5 ug/mL、1.0ug/mL、3.0 ug/mL、5.0 ug/mL 的混合标准工作溶液，待上机分析。 1.4样品前处理方法 参照《食品安全国家标准食品接触材料及制品9种抗氧化剂迁移量的测定》(征求意见稿2021年版)第二法。 图1 前处理流程图 结果与讨论 2.1标准溶液色谱图 9种抗氧化剂的标准溶液 MRM 色谱图如图2所示，相关化合物信息见表3。 图2 9种抗氧化剂标准溶液 MRM色谱图 表3 9种抗氧化剂信息 No. 化合物 英文名称 CAS号 保留时间 (min) 1 BHA Butylated hydroxyanisole 25013-16-5 1.370 2 抗氧化剂264 2，6-Di-tert-butyl-4-methylphenol 128-37-0 2.043 3 抗氧化剂300 4，4'-Thiobis(6-tert-butyl-m-cresol) 96-69-5 2.160 4 抗氧化剂2246 2，2'-Methylenebis(6-tert-butyl-4-methylphenol) 119-47-1 2.252 5 抗氧化剂425 2，2’-Methlyene bis(4-ethly-6-tert-butylphenol) 88-24-4 2.362 6 抗氧化剂1010 Pentaerythritol tetrakis(3-(3，5-di-tert-butyl-4- hydroxyphenyl)propionate) 6683-19-8 3.861 7 抗氧化剂1076 Octadecyl3-(3，5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)propionate 2082-79-3 3.998 8 抗氧化剂168 Tris(2，4-ditert-butylphenyl) phosphite 31570-04-4 4.120 9 2，4-二叔丁基苯酚 2，4-Di-tert-butylphenol 96-76-4 4.121 2.2线性范围 按照1.3配制成各浓度标准溶液，以各目标物浓度为横坐标，目标物峰面积为纵坐标，以外标法绘制标准曲线，所得校准曲线线性关系良好，线性相关系数大于 0.995。曲线结果如下图3.线性方程及相关系数如下表4.所示。 图3 化合物校准曲线 表4 校准曲线参数 No. 化合物 校准曲线 相关系数 精确度 检测限 定量限 (%) (mg/kg) (mg/kg) 1 BHA v=86339.85x-3385.521 0.9996 89.2-100.9 0.003 0.01 2 抗氧化剂264 v=515638.9x+44078.51 0.9996 83.2-102.9 0.01 0.03 3 抗氧化剂300 v=1479656x+1374.084 0.9992 86.0-106.3 0.003 0.01 4 抗氧化剂2246 v=1620747x-46577.93 0.9997 88.2-106.2 0.003 0.01 5 抗氧化剂425 v=886636.5x+335.3474 0.9999 92.7-107.9 0.003 0.01 6 抗氧化剂1010 v=3559766x+146374.6 0.9999 85.5-102.6 0.003 0.01 7 抗氧化剂1076 v=1634699x+57931.30 0.9999 92.8-106.3 0.003 0.01 8 抗氧化剂168 v=3223530x+506063.5 0.9989 97.5-105.4 0.003 0.01 9 2，4-二叔丁基苯酚 v=10472.53x+407.2627 0.9995 97.5-106.1 0.01 0.03 2.3重复性考察 按照1.3步骤配制低、中、高三个浓度标准溶液，对 0.03 ug/mL、1.5 ug/mL、9.0 pg/mL(抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168)、0.01 ug/mL、0.5 ug/mL、3.0 ug/mL(BHA、抗氧化剂2246、抗氧化剂300、抗氧化剂425，、抗氧化剂1010、抗氧化剂1076)连续进样6次，考察分析方法保留时间和峰面积的重复性。结果表明：保留时间的 RSD% 均小于1.0%和峰面积的 RSD%均小于10.0%，方法重复性良好，仪器精密度良好。结果见表5。 表5重复性测试 BHA 7.95 0.86 抗氧化剂264 6.83 0.94 3 抗氧化剂300 8.97 0.36 4 抗氧化剂2246 4.98 0.38 5 抗氧化剂425 9.32 0.36 6 抗氧化剂1010 7.16 0.38 7 抗氧化剂1076 3.73 0.079 8 抗氧化剂168 6.74 0.070 9 2，4-二叔丁基苯酚 2.81 0.072 2.4加标回收实验 按照1.4步骤中制备样品和加标样品， J，三个水平加标浓度如下表6所示。测试结果显示：各水平的加标回收率在82.69~109.62%之间，相对标准偏差 RSD% 在 0.15~6.25%之间。 图4 样品谱图 4.5(×1，000，000) 图5.加标1.5ug/mL样品谱图 (1、BHA 2、抗氧化剂2643、抗氧化剂3004、抗氧化剂22465、抗氧化剂4256、抗氧化剂1010 7、抗氧化剂10768、抗氧化剂168 9、2，4-二叔丁基苯酚) 表6样品加标实验结果 .No. 化合物 样品浓度 加标[1] 加标 加标 (ug/mL) 回收率% RSD% 回收率% RSD% 回收率% RSD% BHA N.D. 98.93 0.15 99.26 6.25 99.11 1.61 2 2，4-二叔丁基苯酚 N.D. 103.68 1.06 82.69 4.19 96.60 2.06 3 抗氧化剂300 N.D. 97.58 1.08 108.69 5.23 107.45 1.48 4 抗氧化剂264 .N.D 93.62 2.88 102.88 4.51 97.73 3.56 5 抗氧化剂2246 N.D. 86.96 3.68 103.14 3.29 98.58 0.43 6 抗氧化剂425 N.D. 101.84 1.94 100.48 5.22 98.51 0.54 7 抗氧化剂1010 N.D. 98.84 3.05 103.88 1.15 103.32 1.93 8 抗氧化剂1076 .N.D 105.48 2.45 108.73 4.88 100.94 1.35 9 抗氧化剂168 N.D. 100.15 0.44 109.62 1.64 109.29 0.69 N.D.：表示未检出。 备注： [1]：抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168浓度为 0.03 ug/mL， 其余物质 0.01 ug/mL； ( [2]：抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168加标浓度为 1.5 pg/mL，其它为 0.5 ug/mL； ) ( [3]：抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168加标浓度为 9.0 ug/mL， 其它为 3.0ug/mL. ) 结论 本文利用岛津公司的 LCMS-8050三重四极杆液质联用仪，参照《食品安全国家标准食品接触材料及制品9种抗氧化剂迁移量的测定》 (征求意见稿2021年版)第二法，建立了食品接触材料及制品中9种抗氧化剂迁移量的测定方法。结果表明，抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168在0.03~15 ug/mL浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.995以上，方法检出限为 0.03 mg/kg， 方法定量限为0.30 mg/kg。BHA、抗氧化剂2246、抗氧化剂300、抗氧化剂425，、抗氧化剂1010、抗氧化剂1076在0.1~5.0 ug/mL浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.995以上，方法检出限为 0.01 mg/kg， 方法定量限为0.10 mg/kg。；重复性实验中，对 0.03 ug/mL(抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168)、0.01ug/mL (BHA、抗氧化剂2246、抗氧化剂300、抗氧化剂425，、抗氧化剂1010、抗氧化剂1076)的标准溶液重复进样6针，9种抗氧化剂保留时间的 RSD在0.07%~0.94%的范围，峰面积的 RSD 在2.81%~9.32%的范围，仪器精密度良好；加标回收实验中，加标量为：抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168加标浓度分别为 0.03 ug/mL、1.5 ug/mL、9.0 ug/mL， 其它分别为 0.01 ug/mL、0.5 ug/mL、3.0 ug/mL；样品的综合加标回收率分布在82.69%~109.62%的范围之间， RSD% 在0.15~6.25%之间，各组分回收及精密度良好。该方法简单方便，能有效检测食品接触材料及制品中的抗氧化剂含量。 岛津应用云 本文利用岛津公司的LCMS-8050三重四极杆液质联用仪，参照《食品安全国家标准 食品接触材料及制品 9种抗氧化剂迁移量的测定》（征求意见稿2021年版）第二法，建立了食品接触材料及制品中9种抗氧化剂迁移量的测定方法。结果表明，抗氧化剂264、2，4-二叔丁基苯酚和抗氧化剂168在0.03~15 µg/mL浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.995以上，方法检出限为0.03 mg/kg，方法定量限为0.30 mg/kg。该方法简单方便，能有效检测食品接触材料及制品中的抗氧化剂含量。