当前位置: 生物农业 > 方案详情

粗提取植物DNA的实验步骤和原理

检测样品 生物农业

检测项目 提取植物DNA

关联设备 共2种 下载方案

方案详情

原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

智能文字提取功能测试中

提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。步骤如下:1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;(3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;(4)小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min。(5)重复步骤(4)1-2次,以蛋白层不出现为止;(6)取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,离心10 min;(7)弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次;(8)室温下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用。

关闭
  • 1/1

上海远慕生物科技有限公司为您提供《粗提取植物DNA的实验步骤和原理》,该方案主要用于生物农业中提取植物DNA检测,参考标准《暂无》,《粗提取植物DNA的实验步骤和原理》用到的仪器有新型植物基因组DNA快速提取试剂盒50T、植物吲哚乙酸(IAA)ELISA试剂盒kit说明书。

我要纠错

相关方案