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薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能和鸡蛋营养成分的影响动物营养学报2023,35(9):5724⁃5735Chinese Journal of Animal Nutritiondoi:10.12418/CJAN2023.527 张翊慧等:薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能和鸡蛋营养成分的影响9期5275 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能和 鸡蛋营养成分的影响 张翊慧 1,2 白苗苗 2 刘红南 2 崔亚东 3 兰 伟 3 万发春 1∗ 孔祥峰 2,3∗ (1.湖南农业大学动物科学技术学院 ,长沙 410128;2.中国科学院亚热带农业生态研究所 ,亚热带农业生态过程重点实 验室 ,动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室 ,长沙 410125;3.阜阳师范大学生物与食品工程学院 ,阜阳 236037) 摘 要 :本试验旨在探究薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能和鸡蛋营养成分的影响 。选取产 蛋后期产蛋率 [(64.37±3.24)%]相近的新杨黑羽蛋鸡 216只 ,随机分为 4组 ,其中对照组饲喂 基础饲粮 ,另外 3组分别在基础饲粮中添加 0.1%、0.2%和 0.4%的薄荷叶粉 ,每组 9个重复 ,每 个重复 6只鸡 。整个试验期为 35 d ,其中预试期为 7 d ,正试期为 28 d 。结果显示 :1)与对照组 相比 ,饲粮中添加薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡的平均日采食量 (ADFI )、料蛋比 、产蛋率和蛋重均 无显著影响 (P >0.05);同时 ,3个试验组蛋鸡血清中免疫球蛋白 G ( IgG )和总蛋白 (TP )含量显 著增加 (P <0.05);饲粮中添加 0.1%薄荷叶粉显著增加卵巢中大白卵泡数 (P <0.05)。 2)与对照 组相比 ,饲粮中添加薄荷叶粉可显著提高鸡蛋的蛋壳强度 (P <0.05),改善蛋形指数 ;同时有增加 蛋清中 L -苯丙氨酸 、L -色氨酸 、L -异亮氨酸和总必需氨基酸含量的趋势 (0.05<P <0.10);添加 0.1%和 0.4%薄荷叶粉对蛋黄脂肪酸含量无显著影响 (P >0.05)。综上可知 ,饲粮中添加 0.1%和 0.4%薄荷叶粉在不影响蛋鸡生产性能的同时 ,可提高蛋鸡血清中 IgG 和 TP 含量 ,具有增强 蛋鸡免疫力的潜力 ,同时可改善鸡蛋品质 。 关键词 :薄荷叶粉 ;蛋鸡 ;蛋品质 ;氨基酸 ;脂肪酸 中图分类号 :S831 文献标识码 :A 文章编号 :1006⁃267X (2023)09⁃5724⁃12 蛋鸡在产蛋后期对营养物质的代谢效率下降 导致鸡只肥胖 、死淘率升高 。同时 ,机体中抗体水 平减少 ,蛋鸡对疾病的抵抗力减弱 ,生产性能下 降 ,所产鸡蛋破损率逐渐增加 ,蛋壳逐渐变薄 ,鸡 蛋品质下降和鸡蛋中营养结构改变 。而这些无疑 会给蛋鸡养殖者带来巨大的经济损失 。因此 ,寻 找一种可维持产蛋后期蛋鸡生产性能同时提高鸡 蛋品质的新型饲料添加剂成为许多相关从业者的 研究热点之一 。 薄荷是一种种植范围广 、适应能力强的多年 生草本植物 ,现已报道的薄荷属种已有 30多种 ,因其具有极高的药用价值和经济价值而广受人们 的欢迎 [1]。尤其是薄荷精油和薄荷提取物可以作 为一些化妆品和药制剂的天然成分 [2-3]。据报道 ,薄荷精油和薄荷提取物具有多种生物活性 ,包括 抗氧化 、抗菌 、抗炎 、抗高血压 、抗病毒和抗过敏等 作用 ,这可能与萜类化合物 (醛 、醇 、酚和甲氧基衍 生物 )和芳香物质等生物活性物质的存在有 关 [4-6]。同时 ,这些活性物质也会对家禽的健康和 生产性能产生促进作用 [7]。研究表明 ,在饲粮中 添加薄荷可改善育成期鹌鹑的肉品质 ,降低血清 中胆固醇含量 ,改善肠道形态和肠道中的微生物 结构 [8-9]。在产蛋后期蛋鸡的饲粮中添加干薄荷 叶可显著提高海兰褐蛋鸡的生产性能 ,降低血清 收稿日期 :2023-03-17 基金项目 :阜阳师范大学承接阜阳市科技专项经费市校合作项目 (SXHZ2020007) 作者简介 :张翊慧 (1996—),女 ,河南驻马店人 ,硕士研究生 ,从事畜禽健康营养研究 。 E⁃mail : 2434665743@qq.com ∗通信作者 :万发春 ,教授 ,博士生导师 ,E⁃mail :wanfc@sina.com ;孔祥峰 ,研究员 ,博士生导师 ,E⁃mail : nnkxf@isa.ac.cn 中胆固醇含量 [10]。在冷应激下 ,饲粮中添加薄荷 精油可显著增加蛋鸡采食量和蛋重 [11]。然而 ,薄 荷叶干粉对产蛋后期蛋鸡生产性能和鸡蛋营养成 分影响的研究还相对较少 。因此 ,本试验以产蛋 后期的新杨黑羽蛋鸡为研究对象 ,探究饲粮添加 不同水平薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡的生产性能和 鸡蛋营养成分的影响 ,为薄荷能在畜禽养殖中得 到充分的应用提供理论依据 。 1 材料与方法 1.1 试验设计 试验选取健康的 50周龄产蛋后期新杨黑羽 蛋鸡 216只 ,随机分为 4组 ,每组 9个重复 ,每个重 复 6只鸡 。对照组饲喂玉米 -豆粕基础饲粮 ,基础 饲粮参考 NRC (1994)和 《鸡饲养标准 》(NY/T 33—2004)配制 。 3个试验组分别在基础饲粮中添 加 0.1%、0.2%和 0.4%的薄荷叶粉 。基础饲粮组 成及营养水平见表 1。以干物质为基础的薄荷叶 营养成分含量如下 :粗灰分 14. 9%,总能 12.8 MJ /kg ,粗蛋白质 16. 2%,中性洗涤纤维 28.2%,钙 1.97%,磷 0.31%[10]。试验在安徽田园 居家禽养殖场进行 ,整个试验期为 35 d ,其中预试 期为 7 d ,正试期为 28 d 。 1.2 饲养管理 试验鸡舍全程采用人工光照 ,每天的光照时 间为 16 h ,黑暗时间为 8 h ,并保持恒定 。通风方 向为纵向机械通风 。试验蛋鸡在整个试验期内自 由采食 ,每天 07:30和 16:00各饲喂 1次 ,并观察 鸡只的精神状态和健康状况 ;乳头式饮水器自由 饮水 。采用机械清粪 ,每天 16:30清粪 1次 。 表 1 基础饲粮组成及营养水平 (风干基础 ) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet ( air⁃dry basis ) % 项目Items 含量 Content 原料Ingredients 玉米 Corn 64.56 豆粕 Soybean meal 22.55 石粉 Limestone 8.89 预混料 Premix1) 4.00 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 10.95 粗蛋白质 CP 14.86 续表 1 项目Items 含量 Content 钙 Ca 3.27 有效磷 AP 0.31 赖氨酸 Lys 0.76 蛋氨酸 Met 0.24 半胱氨酸 Cys 0.26 苏氨酸 Thr 0.57 色氨酸 Try 0.17 1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of the diet :VA 50 000 IU ,VD3 30 000 IU ,VE 400 mg ,VK 40 mg ,VB1 40 mg ,VB2 120 mg ,VB670 mg ,生物素 biotin 2.5 mg ,叶酸 folic acid 18 mg ,烟酸 ni⁃acin 550 mg ,D -泛酸 D ⁃pantothenic acid 280 mg ,Cu 12 mg ,Fe 80 mg ,Mn 120 mg ,I 1.0 mg ,Se 0.4 mg ,Zn 85 mg 。 2)代谢能为计算值 ,其余为实测值 。 ME was acalcu⁃lated value ,while the others were measured values. 1.3 样品采集 试验结束时 ,随机从每组中选择 9只蛋鸡 (每 个重复 1只 )禁饲 12 h 后进行静脉采血 ,血液静置 一段时间后在 4 ℃条件下 3 500 r /min 离心 15 min ,分装血清于 1.5 mL 离心管中于 -20 ℃冰 箱中保存 ,用于血清生化指标检测 ;鸡只采血后立 即剖杀 ,并分离输卵管 ,从卵巢中取出卵泡用于后 续输卵管形态指标的检测 ;同时 ,随机从每组中挑 选 9个鸡蛋 (每个重复 1个 )进行蛋品质 、蛋清氨 基酸含量和蛋黄脂肪酸含量的检测 。 1.4 指标测定 1.4.1 生产性能测定 试验期间 ,每天 17:00收集鸡蛋并记录每天 的剩料量 、产蛋数和蛋重 ,用于计算全期的采食 量 、平均蛋重 、料蛋比 、总产蛋数和产蛋率 。 1.4.2 血清生化指标 使用全自动血清生化仪 (Beckman CX4)检测 血清中总蛋白 (TP )、甘油三酯 (TG )、尿素氮 (UN )、免疫球蛋白 G ( IgG )、免疫球蛋白 M ( IgM )的含量 。 1.4.3 蛋鸡输卵管形态检测 使用电子天平称取输卵管重 (精确至 0.01 g )后 ,使用卷尺测量输卵管膨大部长度和狭部长度 (精确至 0.01 cm );使用计数器对大黄卵泡 、小黄 卵泡和大白卵泡计数 ,并计算卵泡总数 。 1.4.4 蛋品质检测 每个鸡蛋单独称重后 ,使用游标卡尺分别测 量鸡蛋的最大纵径和横径 (精确到 0.02 mm )并计 算蛋形指数 ,蛋形指数 =最大纵径 /最大横径 ;使用 多功能鸡蛋分析仪检测鸡蛋的白蛋白高度 、蛋黄 颜色和哈氏单位 ;使用蛋壳强度测定仪测定蛋壳 硬度 ;使用蛋壳测厚仪检测蛋壳厚度 。 1.4.5 蛋清氨基酸含量的检测 取 200 μ L 蛋清样品置于 10 mL 玻璃安倍瓶 内 ,加入 8 mL 6 mol/L 盐酸溶液 ,充分振荡 1 min ,4 ℃超声 30 min ,-60 ℃静置 10 min ,接入真空泵 ,抽取真空 ,封口 ,放入 110 ℃干燥冰箱内水解 22 h ;将水解后的样本取出 1 mL 放入 1.5 mL 离心管内 冷冻 60 min ;冷冻后将样本置于冻干机内冻干 ;用 0.200 mL 50%乙腈水 (含色氨酸 d5内标 100 ng/mL )复溶 ,充分振荡 1 min ,4 ℃超声 10 min ,12 000 r /min 离心 10 min ;取上清液过 0.22 μ m 滤膜上机进行液相色谱 -串联质谱 (LC⁃MS/MS )分析 。 1.4.6 蛋黄脂肪酸含量的检测 称取 0.1 g 蛋黄冻干样品 ,用 800 μ L 50%乙 腈 /水 ( v ∶ v )在室温下均质 1 min 。在 4 ℃下以 12 000 r /min 离心 15 min 后 ,将 400 μ L 上清液分 别与 200 μ L 3⁃NPH (200 mmol/L )和 200 μ L EDC (120 mmol/L ;含 6%吡啶和 400 ng/mL 乙酸 -D3)充分混合 。混合物均质化 1 min ,在 40 ℃下反 应 1 h ,并每 5 min 摇动 1次 。反应完成后 ,在 4 ℃下以 12 000 r /min 离心 15 min ,上清液通过 0.22 μ m 滤膜 ,用 50%乙腈水 (含 100 ng/mL 内 标 )稀释 10倍 ,进行 LC⁃MS/MS 分析 ,测定饱和 脂肪酸 (SFA )、单不饱和脂肪酸 (MUFA )和多不 饱和脂肪酸 (PUFA )的含量 。 1.5 统计分析 试验数据采用 Excel 2019进行初步处理 ,采 用 SPSS 26.0统计软件进行单因素方差分析 ,用 Duncan 氏法进行多重比较 ,用多项式对比进行线 性和二次效应分析 ,试验结果采用平均值 ±标准差 表示 。以 P ≤0.05表示差异显著 ,0.05<P <0.10表 示差异有显著的趋势 。 2 结果与分析 2.1 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响 由表 2可知 ,与对照组相比 ,饲粮中添加薄荷 叶粉对产蛋后期蛋鸡的平均日采食量 (ADFI )、产 蛋率 、蛋数和平均蛋重均没有显著影响 (P >0.05)。 表 2 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of peppermint leaf powder on performance in laying hens during late laying period 薄荷叶粉添加量 P值 P⁃value 项目 Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 Linear 二次 Quadratic Items 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment 平均日采食量ADFI/(g/d) 102.98±0.70 103.55±1.63 104.67±1.47 102.12±1.63 0.63 0.75 0.28 平均蛋重 ADEW/(g/d) 51.66±0.47 51.02±0.66 51.61±0.52 50.62±0.65 0.56 0.34 0.80 产蛋率 Egg⁃laying rate / % 64.29±7.34 77.06±2.63 68.93±3.51 74.28±5.09 0.33 0.32 0.47 蛋数 Number of eggs /个 104.14±11.89 124.83±4.25 111.67±5.68 120.33±8.25 0.33 0.32 0.47 料蛋比 Feed/ egg ratio 3.42±0.54 2.72±0.07 2.91±0.16 2.81±0.22 0.40 0.25 0.33 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著 (P >0.05),不同小写字母表示差异显著 (P <0.05)。 n =9。下表同 。In the same row , values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P >0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P <0.05) . n =9. The same as below. 2.2 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡血清生化指标的 影响 由表 3可知 ,与对照组相比 ,饲粮中添加薄荷 叶粉显著增加血清 IgG 含量 (P <0.05),添加 0.1% 和 0.2%的薄荷叶粉组血清中 TP 的含量呈二次曲 线变化 (P <0.05),而对血清中的 TG 、UN 和 IgM 含量无显著影响 (P >0.05)。 Table 3 表 3 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡血清生化指标的影响 Effects of peppermint leaf powder on serum biochemical indexes of laying hens during late laying period P 值 P ⁃value 项目 Items 薄荷叶粉添加量 Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 总蛋白 TP/(g/L) 52.97±0.87a 64.03±2.41b 62.03±1.86b 56.90±1.17a <0.01 0.27 <0.01 尿素氮 UN/(mmol/L) 0.90±0.11 0.97±0.13 1.06±0.22 0.63±0.17 0.30 0.30 0.14 甘油三酯 TG/(mmol/L) 3.54±0.43 6.59±1.74 7.40±1.74 7.56±0.57 0.19 0.06 0.31 免疫球蛋白G IgG/(g/L) 0.074±0.005a 0.087±0.002b 0.084±0.002b 0.086±0.002b 0.02 0.03 0.06 免疫球蛋白M IgM/(g/L) 0.057±0.007 0.048±0.003 0.059±0.003 0.061±0.003 0.20 0.20 0.24 0.05);同样 ,除 0.2%组与对照组相比显著降低各 卵泡数和卵泡总数 (P <0.05)外 ,其余 2个试验组 大黄卵泡数 、小黄卵泡数和卵泡总数无显著差异 (P >0.05),而 0.1%组与对照组相比 ,显著增加大 白卵泡数 (P <0.05)。 表 4 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡输卵管形态的影响 Table 4 Effects of peppermint leaf powder on morphology of oviducts of laying hens during late laying period 薄荷叶粉添加量 P值 P⁃value 项目 Items Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 输卵管重 Fallopian tube weight/g 38.71±1.11a 30.80±2.34b 31.06±1.68b 34.23±1.65ab 0.01 0.09 0.004 膨大部长度 Length of expansion/ cm 26.73±0.53a 27.33±0.83a 24.24±0.41b 25.93±0.73ab 0.02 0.08 0.51 狭部长度 7.01±0.35 7.59±0.27 7.24±0.25 7.46±0.24 0.51 0.43 0.54 Length of isthmus / cm 卵泡等级 4.44±0.38 3.38±0.60 3.14±0.26 4.00±0.29 0.12 0.40 0.03 Follicle grade 大黄卵泡数 Large yellow follicles number /个 1.13±0.13 1.22±0.28 0.50±0.27 1.29±0.18 0.09 0.72 0.18 小黄卵泡数 Small yellow follicles number /个 6.50±0.89 6.14±0.80 6.25±1.19 4.38±1.03 0.42 0.17 0.44 大白卵泡数 Large white follicles number /个 49.13±1.89b 56.13±3.04a 37.00±1.81c 46.25±2.60b <0.01 0.02 0.64 卵泡总数 Total number of follicles /个 60.75±2.27ab 66.75±2.38a 47.38±2.24c 57.00±2.98b <0.01 0.01 0.47 2.4 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡鸡蛋品质的影响 由 5表可知 ,与对照组相比 ,随着饲粮中薄荷 叶粉添加水平的增加 ,鸡蛋的蛋壳强度显著增加 (P <0.05);同时 ,薄荷叶粉可显著改善鸡蛋的蛋形 指数 (P =0.05),并随薄荷叶粉添加水平增加呈二 次曲线变化 (P <0.05),对蛋重 、蛋白高度和哈氏单 位未产生显著影响 (P >0.05)。 表 5 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡鸡蛋品质的影响 Table 5 Effects of peppermint leaf powder on egg quality of laying hens during late laying period 薄荷叶粉添加量 P 值 P ⁃value 项目 Items Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 蛋重 Egg weight/g 52.94±2.05 50.90±0.70 51.76±0.76 50.34±1.46 0.58 0.26 0.83 蛋形指数 Egg shape index 0.77±0.01a 0.74±0.01b 0.74±0.01b 0.76±0.01ab 0.05 0.54 0.01 蛋白高度 Albumen height/mm 4.53±0.65 5.14±0.32 5.26±0.15 4.88±0.39 0.62 0.54 0.24 蛋黄颜色 Yolk color 4.29±0.29 4.13±0.23 4.00±0.00 4.56±0.18 0.24 0.35 0.09 哈氏单位 Haugh unit 69.89±4.48 74.17±2.84 74.53±1.24 71.55±2.61 0.65 0.75 0.22 蛋壳强度 Eggshell strength/(kg/ cm2) 3.28±0.21a 4.08±0.19b 4.18±0.22b 4.29±0.10b <0.01 <0.01 0.08 蛋壳厚度 0.37±0.01 0.38±0.01 0.38±0.01 0.36±0.01 0.80 0.67 0.41 Eggshell thickness / mm 2.5 薄荷叶粉对产蛋后期鸡蛋蛋清氨基酸含量的 影响 由表 6可知 ,与对照组相比 ,饲粮中添加 0.1%和 0.4%薄荷叶粉显著降低蛋清 L -赖氨酸含量 (P <0.05),0.1%组 L -蛋氨酸含量呈二次曲线变 化 (P <0.05),3个试验组蛋清 L -苯丙氨酸 、L -色 氨酸 、L -异亮氨酸和总必需氨基酸含量呈二次曲 线变化 (0. 05 <P <0. 10)。同时 ,饲粮中添加 0.4%薄荷叶粉显著降低蛋清中 L -羟基脯氨酸含 量 (P <0.05),0.1%和 0.4%组显著降低 N ,N-二甲 基甘氨酸和 S-腺苷蛋氨酸含量 (P <0.05),并随薄 荷叶粉添加水平呈二次曲线变化 (P <0.05),0.1%组 L -丙氨酸含量呈二次曲线变化 (P <0.05),0.2%组有增加 L -精氨酸和肌氨酸含量的趋势 (0.05<P <0.10)。而饲粮中添加不同水平薄荷叶 粉对蛋清总非必需氨基酸和总氨基酸含量无显著 影响 (P >0.05)。 表 6 薄荷叶粉对产蛋后期鸡蛋蛋清氨基酸含量的影响 Table 6 Effects of peppermint leaf powder on amino acid contents in egg white of laying hens during late laying period ng/mL 项目 Items 薄荷叶粉添加量 P值 P⁃value Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic L-缬氨酸 L⁃Val 101.03±6.54 113.57±5.26 110.86±9.50 99.11±5.61 0.32 0.69 0.07 L-苏氨酸 L⁃Thr 114.15±2.65 117.70±2.73 121.74±3.83 112.00±2.05 0.11 0.71 0.03 L-亮氨酸 L⁃Leu 1 317.97±97.61 1 383.64±58.25 1 449.58±94.16 1 318.19±72.10 0.63 0.86 0.24 L-赖氨酸 L⁃Lys 1 025.98±13.53a 1 001.39±5.55b 1 002.13±8.40ab 976.38±5.17c <0.01 <0.01 0.98 L-蛋氨酸 L⁃Met 148.52±3.15b 161.02±2.88a 154.17±4.16ab 151.62±2.27b 0.04 0.86 0.01 L-苯丙氨酸 L⁃Phe 5 111.88±376.46 5 771.42±203.46 6 051.32±130.77 5 390.04±243.55 0.07 0.34 0.01 L-色氨酸 L⁃Try 573.49±48.97 661.29±43.86 767.03±97.32 553.73±19.71 0.08 0.78 0.02 L-异亮氨酸 L⁃Iso 133.23±4.95 139.77±2.63 145.79±2.58 136.84±2.65 0.08 0.27 0.03 L-丝氨酸 L⁃Ser 74.46±0.21 75.52±0.76 74.43±0.48 75.68±0.63 0.30 0.38 0.84 L-焦谷氨酸 L⁃Pyr 101.99±0.87 103.77±0.97 104.36±1.85 101.81±0.60 0.33 0.99 0.07 N-乙酰-beta- 丙氨酸 44.38±0.16 44.16±0.07 44.24±0.06 44.09±0.06 0.22 0.08 0.74 N⁃acetyl⁃beta⁃alanine 续表 6 P 值 P ⁃value 项目 Items 薄荷叶粉添加量 Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 111.02 116.63 111.81 110.70 L-丙氨酸 L⁃Ala ±0.42b ±2.50a ±0.69b ±0.22b 0.01 0.38 0.02 N,N-二甲基甘氨酸 27.58 26.31 28.89 25.56 N,N⁃dimethylglycine ±0.43b ±0.26c ±0.55a ±0.24c <0.01 0.06 0.01 L-脯氨酸 L⁃Pro 49.15 51.31 56.97 48.15 0.70 0.94 0.36 ±4.60 ±4.27 ±9.49 ±2.90 L-羟基脯氨酸 59.34 59.25 59.18 58.89 L⁃hydroxyproline ±0.10a ±0.15a ±0.12a ±0.04b 0.03 0.01 0.41 L-鸟氨酸 L⁃Orn 927.69 1 088.84 1 121.17 864.49 0.50 0.76 0.14 ±151.72 ±108.40 ±204.23 ±84.20 L-天冬氨酸 109.47 83.53 118.80 77.17 0.15 0.29 0.72 L⁃Asp ±16.82 ±12.86 ±16.37 ±11.19 L-组氨酸 L⁃His 211.29 212.41 210.96 205.10 0.60 0.28 0.42 ±6.12 ±1.59 ±5.30 ±2.64 L-精氨酸 L⁃Arg 3 391.99 3 122.88 3 422.23 2 383.63 0.09 0.05 0.28 ±366.04 ±226.75 ±450.34 ±225.74 1 556.00 1 744.32 1 722.50 1 563.06 L-酪氨酸 L⁃Tyr ±142.43 ±126.30 ±121.22 ±107.09 0.59 0.97 0.18 N-乙酰-L-谷氨酸 74.21 73.97 74.30 74.13 N⁃acetyl⁃L⁃glutamate ±0.29 ±0.42 ±0.27 ±0.18 0.88 0.94 0.90 102.59 102.69 102.63 101.14 L-犬尿氨酸 L⁃Kyn ±0.61 ±0.84 ±0.17 ±0.22 0.14 0.08 0.15 209.86 225.08 223.20 192.88 L-半胱氨酸 L⁃Cys ±10.15 ±8.56 ±16.25 ±6.93 0.16 0.29 0.05 肌氨酸 Sarcosine 135.54 133.80 139.31 129.98 0.07 0.27 0.16 ±1.65 ±2.29 ±3.64 ±1.62 S-(5’-腺苷)- L-高半胱氨酸 175.21 175.56 175.69 174.04 0.18 0.18 0.10 S⁃(5’ ⁃adenosine) ⁃ ±0.83 ±0.61 ±0.31 ±0.33 L⁃homocysteine 甘氨酸 Gly 1 576.76 1 559.77 1 575.40 1 524.52 0.14 0.06 0.40 ±20.54 ±17.09 ±19.00 ±12.35 292.13 238.81 247.79 224.47 L-谷氨酸 L⁃Glu ±45.89 ±37.97 ±47.90 ±27.17 0.64 0.27 0.68 L-O-磷酸丝氨酸 1 250.68 1 375.51 1 386.30 1 262.62 L⁃O⁃phosphatidylserine ±93.47 ±84.81 ±84.01 ±60.91 0.52 0.93 0.14 S-腺苷蛋氨酸 1 635.12 571.01 488.58 426.36 S⁃adenosylmethionine ±216.80a ±11.11b ±8.99b ±4.90b <0.01 <0.01 <0.01 总必需氨基酸 8 388.33 9 349.80 9 493.98 8 676.39 Total essential ±488.57 ±299.88 ±218.93 ±349.39 0.10 0.53 0.02 amino acid 总非必需氨基酸 12 072.78 11 185.14 9 233.52 9 636.38 Total non⁃essential ±930.75 ±564.11 ±1 621.22 ±451.06 0.18 0.05 0.52 amino acid 续表 6 薄荷叶粉添加量 P 值 P ⁃value 项目 Items Peppermint leaf powder addition/% 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 总氨基酸 20 461.12 20 534.94 18 727.50 18 312.77 0.47 0.15 0.84 Total amino acid ±1 359.87 ±858.09 ±1 727.28 ±751.35 2.6 薄荷叶粉对产蛋后期蛋鸡蛋黄脂肪酸含量的 影响 由表 7可知 ,与其他 3组比 ,产蛋后期蛋鸡饲 粮中添加 0.2%薄荷叶粉可显著增加鸡蛋蛋黄中庚 酸含量 (P <0.05);同时 ,与其他 2组相比 ,0.2%组 显著增加蛋黄中 10-反 -十七碳烯酸含量 (P <0.05),而饲粮中添加 0.1%和 0.4%的薄荷叶粉对 蛋黄 SFA 、MUFA 、PUFA 含量以及 n⁃6PUFA/n⁃3PUFA 均无显著影响 (P >0.05)。 表 7 薄荷叶粉对产蛋后期鸡蛋蛋黄脂肪酸含量的影响 Table 7 Effects of peppermint leaf powder on fatty acid contents in egg yolk of laying hens during late laying period ng/mg 薄荷叶粉添加量 P 值 P ⁃value 项目 Items Peppermint leaf powder addition level / % 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 己酸 C6∶0 0.55±0.01 0.60±0.03 0.62±0.04 0.60±0.02 0.25 0.10 0.24 庚酸 C7∶0 2.89±0.20b 2.71±0.08b 3.47±0.24a 2.62±0.19b 0.02 1.00 0.06 癸酸 C10∶0 0.53±0.00 0.53±0.01 0.52±0.01 0.54±0.01 0.47 0.49 0.21 十二烷酸 C12∶0 0.25±0.04 0.23±0.06 0.26±0.08 0.18±0.03 0.76 0.51 0.58 十三烷酸 C13∶0 3.62±0.37 3.15±0.38 3.95±0.25 3.67±0.48 0.54 0.61 0.79 肉豆蔻酸 C14∶0 1.43±0.05 1.41±0.04 1.46±0.01 1.44±0.05 0.91 0.74 0.92 十五烷酸 C15∶0 0.10±0.02 0.10±0.01 0.10±0.01 0.12±0.01 0.81 0.53 0.48 棕榈酸 C16∶0 19.35±0.48 19.02±1.00 19.17±0.87 18.08±1.93 0.89 0.51 0.75 珠光脂酸 C17∶0 0.38±0.02 0.36±0.03 0.39±0.03 0.38±0.04 0.87 0.75 0.91 硬脂酸 C18∶0 49.60±1.92 45.66±6.12 41.28±4.14 43.29±6.13 0.64 0.28 0.53 花生酸 C20∶0 14.28±0.88 9.34±1.94 10.21±2.03 14.06±2.40 0.17 0.98 0.03 二十一烷酸 C21∶0 2.99±0.89 2.68±0.36 2.11±0.18 1.82±0.15 0.42 0.10 1.00 山嵛酸 C22∶0 2.32±0.67 1.48±0.07 1.57±0.05 1.52±0.08 0.30 0.14 0.29 二十三烷酸 C23∶0 45.67±3.68 47.34±1.37 50.82±0.75 45.28±1.60 0.33 0.79 0.13 木蜡酸 C24∶0 13.94±0.57 14.84±0.68 15.49±0.67 14.41±0.58 0.38 0.51 0.13 饱和脂肪酸 SFA 142.83±7.30 134.03±10.01 147.24±6.86 141.46±10.12 0.76 0.82 0.86 棕榈油酸 C16∶1 3.59±0.19 3.43±0.24 3.55±0.23 3.18±0.28 0.61 0.29 0.66 10-顺-十七碳烯酸 0.11±0.03 0.09±0.02 0.08±0.02 0.14±0.03 0.39 0.56 0.13 C17∶1n⁃10c 10-反-十七碳烯酸 C17∶1n⁃10t 0.080±0.002ab 0.073±0.003b 0.087±0.004a 0.074±0.003b 0.02 0.77 0.44 油酸 C18∶1n⁃9c 5.46±0.21 5.42±0.23 5.45±0.40 5.75±0.36 0.88 0.55 0.60 岩芹酸 C18∶1n⁃6 6.28±0.24 6.16±0.30 6.06±0.49 5.60±0.78 0.79 0.35 0.74 反油酸 C18∶1n⁃9t 6.58±0.24 6.63±0.29 6.38±0.43 6.15±0.74 0.89 0.47 0.77 反-10-十九碳烯酸 0.50±0.04 0.40±0.02 0.37±0.04 0.47±0.06 0.14 0.55 0.03 C19∶1n⁃10t 薄荷叶粉添加量 P 值 P ⁃value 项目 Peppermint leaf powder addition level / % Items 处理 线性 二次 0(对照 Control) 0.1 0.2 0.4 Treatment Linear Quadratic 反-7-十九碳烯酸 0.37±0.03 0.36±0.05 0.37±0.08 0.40±0.07 0.98 0.78 0.78 C19∶1n⁃7t 顺-11-二十烯酸 0.47±0.04 0.49±0.08 0.41±0.07 0.46±0.05 0.80 0.73 0.77 C20∶1n⁃11c 反-11-二十烯酸 C20∶1n⁃11t 0.47±0.04 0.49±0.07 0.36±0.07 0.45±0.04 0.33 0.41 0.58 芥酸 C22∶1n⁃13c 0.87±0.08 0.89±0.04 0.78±0.05 0.82±0.06 0.62 0.36 0.94 巴惟酸 C22∶1n⁃13t 0.08±0.02 0.06±0.02 0.07±0.01 0.11±0.02 0.16 0.15 0.08 神经酸 C24∶1n⁃15 8.81±0.25 8.83±0.10 8.90±0.15 9.39±0.21 0.12 0.05 0.20 反亚油酸 C18∶2n⁃6t 0.16±0.01 0.19±0.01 0.18±0.01 0.16±0.02 0.56 0.87 0.19 亚油酸 C18∶2n⁃6c 17.15±1.08 21.34±1.79 19.06±1.47 17.41±2.20 0.29 0.84 0.09 α-亚麻酸 C18∶3n⁃3 0.16±0.02 0.19±0.02 0.20±0.02 0.17±0.04 0.66 0.69 0.25 γ-亚麻酸 C18∶3n⁃6 0.15±0.02 0.21±0.03 0.21±0.02 0.17±0.05 0.50 0.69 0.15 顺-11,14-二十碳二烯酸 0.36±0.02 0.50±0.04 0.44±0.06 0.40±0.05 0.18 0.82 0.06 C20∶2n⁃11,14 HOMO-γ-亚麻酸 0.40±0.04 0.51±0.10 0.55±0.09 0.49±0.08 0.65 0.41 0.34 C20∶3n⁃3 二十碳三烯酸 C20∶3 0.57±0.03 0.70±0.08 0.70±0.10 0.55±0.11 0.48 0.87 0.13 花生四烯酸 C20∶4n⁃6 25.58±1.60 21.82±2.22 23.62±2.18 20.96±2.34 0.43 0.22 0.78 二十碳五烯酸 C20∶5n⁃3 0.11±0.02 0.14±0.04 0.16±0.04 0.11±0.03 0.65 0.78 0.24 二十二碳二烯酸 C22∶2 0.15±0.02 0.19±0.01 0.21±0.02 0.23±0.04 0.14 0.02 0.74 二十二碳三烯酸 C22∶3 2.06±0.16 2.87±0.37 1.78±0.27 2.40±0.40 0.12 0.93 0.81 二十二碳四烯酸 C22∶4 1.07±0.09 1.09±0.04 0.96±0.05 1.06±0.07 0.53 0.63 0.55 二十二碳五烯酸 C22∶5n⁃6 0.62±0.11 0.55±0.09 0.62±0.09 0.67±0.09 0.83 0.63 0.49 二十二碳五烯酸 C22∶5n⁃3 11.62±0.98 10.04±0.97 9.92±0.87 9.31±0.97 0.38 0.11 0.61 单不饱和脂肪酸 MUFA 30.91±1.45 32.82±1.03 31.61±1.34 30.39±3.24 0.84 0.75 0.43 多不饱和脂肪酸 PUFA 57.93±2.87 58.38±4.57 55.74±3.84 50.39±7.40 0.66 0.27 0.56 n⁃6多不饱和脂肪酸 44.72±2.74 41.28±4.09 41.80±3.23 40.46±3.93 0.17 0.60 0.52 n⁃6PUFA n⁃3多不饱和脂肪酸 12.34±1.03 11.13±1.08 10.93±0.94 10.51±1.20 0.08 0.53 0.16 n⁃3PUFA n⁃6多不饱和脂肪酸 / n⁃3多不饱和脂肪酸 n⁃6PUFA/n⁃3PUFA 3.71±0.19 4.20±0.17 4.08±0.12 4.39±0.26 0.40 0.61 0.04 3 讨 论 随着全面禁抗时代的到来 ,薄荷作为一种绿 色的草本植物 ,因其具有多种生物活性 ,将其作为 家禽饲粮添加剂已成为人们的研究热点之一 。Akbari 等 [12]研究表明 ,在饲粮中单独添加薄荷精 油对热应激下肉鸡的生长性能无显著影响 ,而同 时添加吡啶甲酸铬和薄荷精油则可降低肉鸡血清 中 TG 和葡萄糖的含量 ,并增加血清中白蛋白含 量 ;而在冷应激下蛋鸡饲粮中添加薄荷精油可显 著增加蛋鸡采食量和蛋重 。 Gharetappe 等 [13]研究 同样发现在幼龄肉鸡饲粮中添加薄荷叶对肉鸡的 生长性能和健康状况无显著影响 。这可能是由于 植物中的活性萜类化合物被困在分泌腺结构中 ,使其不能充分发挥作用 ,同时由于家禽消化液的 运输时间相对较短 ,所以这一问题更为突出 [14]。 但 Toghyani 等 [15]研究发现 ,饲粮中添加薄荷可增 加 28日龄肉鸡体重 ,但对 42日龄终体重无显著影 响 ,并且对血清中的 TG 和总胆固醇含量也均无显 著影响 ,这与本试验结果相一致 。 Abdel⁃Wareth 等 [16]研究表明 ,随着蛋鸡饲粮中薄荷精油水平的 增加 ,蛋鸡的产蛋量 、蛋重和饲料转化率都呈线性 提高 。 Hussein 等 [17-18]研究表明 ,在感染球虫病的 肉鸡饲粮中单独添加薄荷粉或配合洋甘菊和酵母 益生菌可有效预防或减少球虫病对肉鸡的影响 ,同时恢复肉鸡采食量并提高饲料转化率 ,增加肠 绒毛高度 ,降低隐窝深度 。本试验结果表明 ,饲粮 中添加薄荷叶粉在不影响生产性能的前提下 ,可 显著增加血清中 IgG 和 TP 含量 ,可能对提高机体 免疫具有促进作用 ,还需进一步研究 。同时 ,有增 加蛋清中氨基酸含量的趋势 ,但对血清中 TG 含量 无显著影响 。阮栋等 [19]研究发现 ,禽类血液中 TP 含量与饲粮代谢能和粗蛋白质水平密切相关 。因 此 ,我们推测在产蛋后期蛋鸡饲粮中添加薄荷叶 粉可能通过改变饲粮的代谢能和粗蛋白质水平 ,从而影响血清中 TP 含量 ,而其作用机制还需进一 步的试验证明 。本试验结果与前人使用薄荷精油 或薄荷叶的试验结果在蛋鸡生产性能方面存在差 异 ,可能是由于单位体积内薄荷叶粉中薄荷醇和 薄荷酮等有效成分含量相对较低 ,试验周期较短 ,对蛋鸡的产蛋性能未产生显著影响 。但也表明在 产蛋后期蛋鸡饲粮中添加薄荷叶粉在可能提高机 体免疫力的同时不影响其正常生产性能 。 蛋鸡卵巢外观类似一串葡萄 ,由众多卵泡相 簇而成 [20]。同时 ,卵巢卵泡的大小等级从 6 nm 到 20 mm [21],卵泡大小是衡量卵泡成熟度的标准之 一 [22]。产蛋后期蛋鸡卵泡发育速度降低 ,多种因 素可造成蛋鸡卵子产量下降 ,包括卵黄卵泡的大 小 、进入卵泡的卵黄物质积累模式的变化以及小 卵泡闭锁的发生率 [23-24]。此外 ,性激素水平的微 妙变化 ,即排卵前激素激增的时间或幅度 ,被认为 是产蛋后期蛋鸡卵泡生长波动的原因 [25]。卵巢中 卵泡的数量和质量是蛋黄形成的重要影响因素 ,在本研究中 ,0.1%和 0.4%组对卵泡总数无显著影 响 ,与之不影响蛋黄脂肪酸含量的结果相对应 。而 0.2%薄荷叶粉的添加 ,显著降低了卵巢中卵泡 总数 ,却显著增加了蛋黄庚酸和 10-反 -十七碳烯 酸的含量 。而薄荷叶粉的添加水平与卵泡总数和 蛋黄脂肪酸的组成是否存在某种联系 ,还需进一 步的研究证明 。雌性动物饲粮中添加不同类型脂 肪会改变卵巢卵泡的数量 、排卵率和黄体产生的 孕酮水平 [26]。而通过营养调控在蛋鸡饲粮中添加 植物籽 、油或海洋生物油等调控蛋鸡的脂质代谢 ,也可改变蛋黄脂肪酸的含量 。在蛋鸡饲粮中添加 10%亚麻籽或 3.4%亚麻籽油都会显著降低蛋黄总 SFA 和 MUFA 的含量 ,增加 n⁃3PUFA 和总 PUFA 的含量 [27-28]。而 Grcˇevi′c 等 [29]研究表明 ,在蛋鸡饲 粮中添加万寿菊对蛋黄 SFA 和 MUFA 的含量无 显著影响 ,同时降低 n⁃6PUFA 含量 ,显著增加 n⁃3PUFA 含量 ,从而显著降低 n⁃6PUFA/n⁃3PUFA ,与 本试验在 SFA 、MUFA 和 n⁃6PUFA 含量上的结果 相似 ;而薄荷叶粉的添加对 n⁃6PUFA/n⁃3PUFA 无 显著影响 ,此结果与 Karadagˇogˇlu 等 [30]在蛋鸡饮水 中加入含薄荷精油的结果相似 。而有关薄荷对蛋 黄脂肪酸组成的影响研究较为有限 ,还需进行更 深入的探究 。 蛋鸡的输卵管包括漏斗部 、膨大部 、狭部 、子 宫部和阴道部 ,其中膨大部是输卵管中最长的部 分 ,也是蛋清形成的部分 。蛋清中的蛋白是氨基 酸组成最接近人类需要且廉价的优质动物源性蛋 白质 [31-33]。与对照组相比 ,饲粮中添加薄荷叶粉 对蛋鸡的膨大部和狭部无显著影响 ,因此对鸡蛋 的蛋重 、蛋白高度和哈氏单等指标也不产生显著 影响 ;但有增加蛋清中多种氨基酸和必需氨基酸 含量 ,提高鸡蛋中营养价值的趋势 ,薄荷叶粉可能 是通过增加血清中 TP 含量调控膨大部黏膜内腺 体的分泌或功能从而影响蛋清中氨基酸的组成 ,改变其营养成分 ,但作用机制还需进一步的研究 。同时 ,由于本试验周期较短 ,如延长试验周期 ,增 加薄荷叶粉在产蛋后期蛋鸡机体中的作用时间 ,可能对蛋清中氨基酸含量的影响更为显著 。鸡蛋 在子宫部的停留时间最长 ,薄荷叶粉的添加可能 通过促进子宫部黏膜中蛋壳腺体分泌物的积累 ,增加蛋壳强度 ,改善蛋形指数同时降低输卵管重 ,而 Abdel⁃Wareth 等 [16]研究表明 ,在海兰褐蛋鸡产 蛋后期饲粮中添加干薄荷叶可显著增加蛋壳厚 度 ,对蛋白高度无显著影响 ,与本试验在蛋壳厚度 上的结果存在差异可能是由于所选蛋鸡品种和试 验周期不同导致 。 4 结 论 在产蛋后期蛋鸡饲粮中添加 0.1%或 0.4%薄 荷叶粉可在保证蛋鸡生产性能的同时改善蛋品质 并有增强机体免疫力的潜力 。 参考文献 : [ 1] TAFRIHI M ,IMRAN M ,TUFAIL T ,et al.The won⁃derful activities of the genus Mentha :not only antioxi⁃dant properties [ J ] .Molecules ,2021,26(4):1118. 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Key Laboratory of Animal Nutrition Physiology and Metabolic Processes in Hunan Province , Key Experiment of Subtropical Agroecological Processes ,Institute of Subtropical Agroecology , Chinese Academy of Sciences Changsha 410125, China ; 3. College of Biology and Food Engineering , Fuyang Normal University , Fuyang 236037, China ) Abstract : This experiment was designed to investigate the effects of peppermint leaf powder on performance and egg nutritional composition of laying hens during late laying period.Two hundred and sixteen New Yang Black⁃feathered hens with similar egg production rate of (64.37±5.24)% in laying hens during the late laying period were randomly divided into four groups , hens in the control group fed a basal dietand the other three groups fed the basal diet supplemented with 0.1%,0.2% and 0.4% peppermint leaf powder , respectively , with nine replicates in each group and six hens in each replicate. The whole test period was 35 days , including pilot trial for 7 days and formal trial for 28 days. The results showed as follows : 1) compared with the control group ,supplementation of dietary peppermint leaf powder did not significantly increasethe average daily feed intake (ADFI ),feed / egg ratio ,laying rate and average egg weight (P >0.05); meanwhile , contents of im⁃munoglobulin G ( IgG ) and total protein (TP ) in serum was significantly increased in the three treatment groups (P <0.05); dietary supplementation with 0.1% peppermint leaf powder significantly increased the number of large white follicles in the ovaries (P <0.05) . 2) Compared with the control group , dietary supplementation of peppermint leaf powder significantly enhanced egg shell strength and improved egg shape index (P <0.05);there was also a tendency to increase in the contents of L ⁃phenylalanine , L ⁃tryptophan , L ⁃isoleucine and total essential amino acids in egg white (0.05<P <0.10); 0.1% and 0.4% peppermint leaf powder had no signifi⁃cant effect on fatty acid contents in egg yolk (P >0.05) . In conclusion , dietary 0.1% and 0.4% peppermint leaf powder can increase IgG and TP contents in serum of laying hens without affecting performance , which has the potential to enhance immunity of laying hens and improve egg quality.[Chinese Journal of Animal Nu⁃trition , 2023, 35(9):5724⁃5735] Key words : peppermint leaf powder ;laying hens ;egg quality ;amino acids ;fatty acids 陈
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