zihuadd
第7楼2008/07/04
果然是高手!!!我们用的的是激光标过的羟乙基淀粉,是Mw分子量,现在发现误差特别大,而且是测出来的值普遍偏高,中检所的多糖标样能用来测羟乙基淀粉吗?
viscotektegent
第9楼2008/07/08
你的标准样品可能有问题。对于传统标定法GPC来说,在做标准曲线时,应该采用单分布的标准样品,也就是说,其重均分子量与数均分子量的比值应该是1,或者是1.0几,这样可以近似认为是1。此时,标准样品的色谱峰很窄,峰值分子量Mp近似与重均、数均相等,再用其峰值分子量做成标准曲线,然后再进样分析你的样品。如果你的样品分布较宽,那么软件算出来的分子量当然是积分出来的!此时,你可以看一下峰形是否对称、有无拖尾现象,并且可以用峰值分子量Mp值来大致看一下分子量情况。如果峰形很好,很对称、前面没有“鼓包”后面拖尾现象,那么说明色谱柱上的分离可能还是不错的,此时也可以用峰值分子量大致作参考。
另外,我了解的情况是,中检所那边的光散射好像是一些较低档次的产品吧?既不是真正的脱机的大型的光散射仪,也不是好的与GPC联机使用的光散射检测器,属于“展示品”,所以只能对分子量小于5万、10万的样品测一测还凑合,分子量越大,误差越大。超过1百万Dalton,多角外推法激光散射技术就不太适用了,小角激光就是优势明显了。
对于传统GPC,误差在10%以内其实是可以容忍的。本来就因为影响因素太多,近似于“瞎做”,您还能要求什么呢?呵呵,不过也别灰心,如果样品比较固定,就是那么一种或者几种,也比较干净,流动相/溶剂也比较好,那么重现性还是可以的。当然,这与操作者的实际操作水平有关。