仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
基础知识专区
>
分析化学
>
帖子详情
【转帖】水果中维生素c的测定
wang0109
2008/09/20
私聊
分析化学
一、目的与要求:
1、掌握2.6-二氯酚靛酚测定维生毒C的原理和方法。
二、原理:
还原型抗坏血酸能还原染料2.6-二氯酚靛酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2.6-二氯酚靛酚后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准2.6-二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
反应式如下:
还原型抗坏血酸染料(粉红色)脱氢型抗坏血酸染料(无色)三、试剂:
(1)2%草酸溶液:溶解20克草酸结晶于200毫升水中,然后稀释至1000ml。
(2)1%草酸溶液:取上述2%草酸溶液500ml,用水稀释至1000m1。
(3)抗坏血酸标准溶液:准确称取20mg抗坏血酸,溶于1%草酸溶液中,移入lOml量瓶中,并用1%草酸溶液稀释至100毫升,混匀,置冰箱中保存。
使用时吸取上述抗坏血酸5ml,置于50毫升容量瓶中,用1%草酸溶液定容之。此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C。
标定:吸取标准使用液5m1于三角烧瓶中,加入6%碘化钾溶液0.5ml,1%淀粉溶液3滴,再以0.001N碘酸钾标准溶液滴定,终点为淡蓝色。
计算如下:
抗坏血酸浓度(mg/ml)=( V1×0.088)/V2
V1:滴定时所耗0.001N碘酸钾标准溶液的量(ml)
V2:所取抗坏血酸的量(ml)
0.088:lml O.0001N碘酸钾标准溶
液相
当于抗坏血酸的量(mg/m1)
(4)2.6:二氯靛酚溶液:称取碳酸氢钠52mg,溶于200ml沸水中,然后称取2.6-二氯靛酚50mg,溶解在上述碳酸氢钠的溶液中,待冷,置于冰箱中过夜,次日过滤置于250ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。此液应贮于棕色瓶中并冷藏,每星期至少标定1次。
标定方法:取5m1已知浓度的抗坏血酸标准溶液,加入1%草酸溶液5ml,摇匀,用上述配制的染料溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒不褪色为止
每毫升染料溶
液相
当于Vc的毫克数=滴定度(T)=(C×V1)/V2
式中:
C;抗坏血酸(V)的浓度(mg/m1)
Vl:抗坏血酸的量(m1)
V2:消耗染料溶液量(m1)
(5)0.1N碘酸钾溶液:精确取干燥的碘酸钾0.100ml。0.3567克用水稀释至100ml.
(6)0.001N碘酸钾溶液:吸取0.1N碘酸钾溶液1ml,用水稀释至100毫升。此溶液1ml相当于抗坏血酸0.088mg。
(7)1%淀粉溶液。
(8)6%碘化钾溶液。
四、操作方法:
1、称取适量(50.0-100.0克)样品,加等量的2%草酸溶液,倒入组织捣碎机中捣成匀浆。称取10.00-30.00克浆状样品(使其含有抗坏血酸1-5mg),置于小烧杯中,用1%草酸溶液将样品移入100毫升容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀。
2、将样液过滤,弃去最初毫升滤液。若样液具有颜色,用白陶土(应选择脱色力强但对抗坏血酸无损失的白陶土)去色,然后迅速吸取5-lOml滤液,置于50ml三角烧瓶中,用标定的2.6-二氯靛酚染料溶液滴定之,直至溶液呈粉红色于15秒内不褪色为止。
计算:
每百克样品中抗坏血酸毫克数=(V .T)/W×100
V:滴定时所耗去染料溶液的量(ml);
T:lml染料溶
液相
当于抗坏血酸标准溶液的量(mg)
W:滴定时所取的滤液中含样品量(g).
五、说明:
(1)所有试剂配制最好用重蒸馏水。
(2)样品取样后,应浸泡在已知量2%草酸溶液中使抗坏血酸受损失。以免发生氧化,使抗坏血酸受损失。
(3)对动性的样品可用10%三氯醋酸代替2%草酸溶液提取;对含有大量Fe的样品,如储藏过久的罐头食品可用8%醋酸溶液代替草酸溶液提取。
(4)整个操作过程要迅速,防止还原型抗坏血酸被氧化。
(5)若样品滤液无色,可不加色陶土。须加白陶土的,要对每批新的白陶土测定回收率。加白陶土脱色过滤后,样品要迅速滴定。
(6)滴定开始时,染料溶液要迅速加入,直至红色不立即消失而后尽可能一滴一滴地加入,并要不断振动三角烧瓶,直至呈粉红色于15秒内不消失为止。样品中可能有其他杂质也能还原2.6-二氯靛酚,但一般杂质还原该染料的速度均较抗坏血酸慢,所以滴定时以15秒钟红色不褪为终点。
(7)测定样品溶液时必须同时作一空白对照,样品溶液滴定的毫升数须扣除空白液滴定的毫升数。
实验法(二) 2.4-二硝基苯肼法
一、原理:
用酸处理过的活性炭把还原型的抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸再继续氧化为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2.4-二硝基苯肼偶联生成红色的络合物。其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正比,可以比色定量。
二、试剂:
(1) 1%草酸溶液。
(2) 2%草酸溶液。
(3) 酸处理过的活性炭:取200克活性炭,加入10%盐酸1000ml,煮沸后,抽气过滤,再用沸水1000ml煮沸,过滤,重复用水洗至滤液中无高价铁离子(即用1%硫氰化钾溶液试验不呈红色为止),于100-120℃烘干。
(4) 2%2.4-二硝基苯肼溶液:取2克2.4-二硝基苯肼溶液溶解于lOOml9N硫酸中。
(5) 9N硫酸溶液:量取浓硫酸250ml,慢慢地倒入750m1水中,加水边搅拌。
(6) 10%硫酸溶液:称取5克硫酸,溶解于50ml50%酒精中。
(7) 85%硫酸溶液:精确称取20mg抗坏血酸,溶解在1%草酸中,溶液稀释至lOOml。吸取此液50ml,加入0.1克活性炭,振摇1分钟,过滤吸取上述滤液5ml,用1%草酸稀释到100毫升(此标准使用液每亳升含lOug抗坏血酸)。
三、操作方法:
(1)样品的处理和分析:称取适量样品加等量的2%草酸溶液于组织捣碎机中打成匀浆。取匀浆20克用1%草酸稀释至lOOml,摇匀,过滤。
取滤液lOml,加入1%草酸10ml(取滤液的量视抗坏血酸含量而定,一般控制每毫升抗坏血酸的浓度为1-lOug),加l勺活性炭,摇1分钟,静置过滤。
各取滤液2毫升于样品管和样品空白管中,各管加1滴硫酸溶液。于样品管中加入2.4-二硝基苯肼0.5ml,样品管,样品空白管加盖,置于37℃保温箱中保温3小时。后取出样品管放人冰水中,样品管和样品空白管置于冰浴中,从滴点管中滴加85%硫酸2ml于各管中,边滴边摇试管(为防止溶液温度升高,溶液中糖炭化而转黑色)。
将各管于冰浴中取出,在室温下放置30分钟后,立即在分光光度计波长540nm处读取光密度。根据测得的光密度,从标准曲线中查出相应的含量。
(2) 标准曲线的绘制:分别吸取抗坏血酸标准工作液10、20、30、40、50ml,稀释至50ml,这些标准液每毫升含有2、4、6、8、lOug抗坏血酸。
各取2ml,置于各标准管中,加硫酸溶液1滴和2.4-二硝基苯肼溶液0.5ml,置各管于30℃保温箱中保温3—4小时,取出,放在冰浴中,于各管中滴加85%硫酸2.5ml边滴边摇试管,然后取出,放置30分钟,于分光光度计540nm波长条件下测定光密度。根据测得的光密度绘制标准曲线。
同时作一试剂空白,于一试剂空白管中加入1%草酸溶液2m1,操作同标准管。
计算:每百克食品中含抗坏血酸的毫克数=C/W×100
C:相当于标准溶液的量(mg)
W:测定时所取得样品溶
液相
当于样品的量(g)
四、说明:
(1) 加入85%硫酸后,将试管从水中取出。溶液的颜色会继续变深所以必须计算好,加入硫酸后准于30分钟内比色。
(2)硫酸可防止抗坏血酸被氧化,且可帮助准于的形成,最终溶液中硫酸的浓度均需一致,否则影响色度。
相关话题
1
混凝烧杯实验时,混凝剂是直接加入还是需要先混合成液体加入呢?
2
标准曲线的浓度梯度怎么确定
3
纯化水硝酸盐的检测
4
关于玫瑰红钠颜色变化
5
注射用透明质酸钠含量测定
+关注
私聊
cyllzm
第1楼
2009/12/19
看了一下你写的说明,有很大的用途,谢谢!请高手说一下,你做西红柿的含量能有多少?
0
发表回复
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
校准曲线、标准曲线和工作曲线,什么区别,你搞懂了吗
讨论
2013/09/30
【求助】请问Tween20、tween40、Tween60、Tween80的临界胶团浓度是多少?
2007/05/14
【求购】优级纯以上硝酸钯
2006/12/26
【原创】如何将亚磷酸中二价铁转变为三价铁
2008/05/09
【讨论】市场上现时的洗洁精
2009/03/12
磷矿石中二氧化碳含量的测定
求助
2013/04/05
奎琳不溶物的测定方法有吗?各位同仁
2005/12/21
【讨论】周末悬赏——奇妙的化学反应,想一想,为什么会有这种现象!
2010/06/06
磷酸盐标准曲线的斜率和截距在哪个范围?
求助
2024/07/05
不同方法检测磷酸盐和总磷,磷酸盐浓度比总磷高正常吗?
原创
2024/07/05
关于化学试剂MSDS编写问题
原创
2024/07/03
乳品检测硝酸盐
求助
2024/07/01
买的镀铜镉粒
求助
2024/07/01
有机酸提取
求助
2024/07/01
如何判定水质
已应助
2024/07/01
求助求助
已应助
2024/07/01
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
衍射斑点标定求助
已应助
2024/06/30
【求助】求:请问谁有PAN--PW4400 的操作手册?
2008/09/20
【原创】FID点不着火
2008/09/20
【求助】二维noes 时样品要不要除氧?
2008/09/20
【求助】纳米钨粉能做DSC吗
2008/09/20
【原创】举报帖子“RE:【求助】请各位朋友帮帮忙! 氧气瓶发生泄露该如何处理?”
2008/09/20
【求助】请问哪里可以买到康塔monosorb氮吸附比表面仪的U型试样管
2008/09/20
【原创】讨论试剂的验收方法
2008/09/20
【原创】仪器信息网推出“食品中三聚氰胺检测”专题,其中有很多厂家提供的检测方法可以下载
2008/09/20
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...