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【求助】脂类提取物进样前处理

  • wangtaofrank
    2009/01/05
  • 私聊

前处理综合讨论

  • 我用ESI-MS/MS检测植物叶片中磷脂和糖脂成分,经过初步提取的总脂提取物用什么方法除去蛋白质等干扰,然后用质谱检测?谢谢!
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  • ronghui

    第1楼2009/01/05

    你的基质含什么比较的多,使用过滤器可以过滤可以,一般的使用针筒式过滤器过滤就可以了,如果是有机的比较多就使用有机过滤膜过滤就好!

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  • wangtaofrank

    第2楼2009/01/05

    我提取的是小麦叶子的脂类,我委托我们这的分析中心检测,他们说直接没经过前处理,蛋白质之类的杂质太多,容易污染仪器,要经过柱子进行初步处理才能做质谱。我就问用什么柱子处理?哪个公司有卖的?
    我看国外人家做的,不用做前处理,直接过滤上质谱就行。没办法,用人家的仪器,得遵照人家的意思做。

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  • aifenxi

    第3楼2009/01/05

    我们是做农残分析的,用SPE净化,比如用Carb除色素,用氨基除杂质(蛋白质可除掉),氨基除油不行,不知道您提取的目标物会不会被氨基吸附掉,要试试才知道.

    wangtaofrank 发表:我提取的是小麦叶子的脂类,我委托我们这的分析中心检测,他们说直接没经过前处理,蛋白质之类的杂质太多,容易污染仪器,要经过柱子进行初步处理才能做质谱。我就问用什么柱子处理?哪个公司有卖的?
    我看国外人家做的,不用做前处理,直接过滤上质谱就行。没办法,用人家的仪器,得遵照人家的意思做。

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  • tianru的爸爸

    第5楼2009/01/06

    对于脂类物质的萃取,可以用氯仿类溶剂,然后再用常温干燥法(不超过50度)把脂蛋白的蛋白成分变性,最后再用氯仿类溶剂溶解,就不会有蛋白类成分了。

    如果嫌氯仿(三氯甲烷)毒性太大,可以用二氯甲烷代替。

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  • wangtaofrank

    第6楼2009/01/06

    楼上的专家,能给我提供你介绍你所说的方法的文献吗? 其实我就是按你说的那么做的(我用的是氯仿:甲醇,2:1提取,氮气吹干再用氯仿溶解,参照Kansas University,Ruth Welti的方法),但我送去检测的人说,没经过过柱前处理,会有蛋白质污染,让我过柱再给做。有这方面的资料的话给我发一份行吗?

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  • tianru的爸爸

    第7楼2009/01/06

    在氮气吹干的时候用45度左右的温度干燥15分钟(但必须是你的目标物在这时不易升华);
    还有最好过一下柱子,因为萃取时是用了大量萃取液,而浓缩过程把很多痕量杂质(主要是不挥发性的)也被浓缩了,可能还会影响后面的分析。

    wangtaofrank 发表:我用的是氯仿:甲醇,2:1提取,氮气吹干再用氯仿溶解,参照Kansas University,Ruth Welti的方法

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  • xumu2009

    第8楼2009/01/07

    楼上前辈你好!我刚做完几个样品的脂质提取,用得是氯仿甲醇溶解,用旋转蒸发仪蒸干,但是得出来的不是油脂,而是有色素的东西,粘附在烧瓶壁上。我想请问去除色素干扰的具体方法是什么?还有什么是柱子过滤?能把这方面的资料给我发一份吗?我的邮箱是shlao1222@126.com!谢谢

    lxdongzi2003 发表:在氮气吹干的时候用45度左右的温度干燥15分钟(但必须是你的目标物在这时不易升华);
    还有最好过一下柱子,因为萃取时是用了大量萃取液,而浓缩过程把很多痕量杂质(主要是不挥发性的)也被浓缩了,可能还会影响后面的分析。

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  • xumu2009

    第9楼2009/01/07

    你好,我和你做同样的实验,不过我的对像是动物,能把你的提取方法发给我参考参考吗?我的邮箱shlao1222@126.com

    wangtaofrank 发表:楼上的专家,能给我提供你介绍你所说的方法的文献吗? 其实我就是按你说的那么做的(我用的是氯仿:甲醇,2:1提取,氮气吹干再用氯仿溶解,参照Kansas University,Ruth Welti的方法),但我送去检测的人说,没经过过柱前处理,会有蛋白质污染,让我过柱再给做。有这方面的资料的话给我发一份行吗?
    我的邮箱是;wangtaofrank@163.com QQ:276693046。谢谢了!

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  • 雾非雾

    第10楼2009/01/07

    应助达人

    植物的提取液除色素一般是用Carb.

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  • wangtaofrank

    第11楼2009/01/07

    我是直接进质谱分析,不用连接液相色谱,也要把色素除去吗? 色素对质谱有干扰没?谢谢!

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