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【求助】凝胶色谱一般常用流动相有那些,比例如何?

凝胶色谱(GPC)

  • 最近开始做凝胶色谱了,不知道有那些常用的流动相,请教一下。另外保存柱子用什么溶液呀
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  • 小不董

    第1楼2009/03/10

    应助达人

    根据你做的样品,选择溶剂,选择柱子。
    要看你用的什么柱子,根据柱子的性质,要求来选择流动相。

    yuan_log 发表:最近开始做凝胶色谱了,不知道有那些常用的流动相,请教一下。另外保存柱子用什么溶液呀

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  • yuan_log

    第2楼2009/03/10

    常见的AT柱子,G250填料,平时冲洗保养柱子用什么流动相呢,保存柱子用什么流动相呢?

    doxw0323 发表:根据你做的样品,选择溶剂,选择柱子。
    要看你用的什么柱子,根据柱子的性质,要求来选择流动相。

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  • 阿宝

    第3楼2009/03/10

    凝胶分GPC和GFC,分别为疏水和亲水的,一般是用纯的溶剂,比如有的GPC用纯THF

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  • yuan_log

    第4楼2009/03/11

    能不能详细一些,望不吝赐教

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  • tosohsh

    第5楼2009/04/02

    流动相大致分为水相和有机相

    水相一般有磷酸缓冲盐溶液,有时还可以加入少量的乙腈等有机溶剂
    有机相一般是纯的有机溶剂,常用的有THF,DMF,DMSO,氯仿等

    这些都是根据样品的溶解性来选的

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  • tigertooth

    第6楼2009/04/02

    最常见的溶剂有水相(包括纯水,缓冲盐溶液等)的和THF,另外还有氯仿,甲苯,DMF,DMSO.
    正如上面的说的,用什么流动相和柱子是根据样品来选择。

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  • viscotektegent

    第7楼2009/04/14

    除了要考虑样品的溶解性,还要考虑样品在这种溶剂中的dn/dc值,一般地,水相样品不存在这个问题,而有机相样品就常发生类似的情况:虽然能够溶解,但是由于dn/dc值太小,示差折光检测器的测量信号与样品浓度变化不成比例,线性关系不好,造成偏差较大、重现性差。就不适合这种溶剂了,需要另换溶剂。对聚合物样品是这样的,主要因为聚合物多数都没有紫外吸收,或者吸收很小,不适合用紫外检测器。但是生化类样品就好多了,可以用紫外检测器。

    另外,有些有机相溶剂也要加缓冲液,例如:DMF、DMAC等等有些极性的溶剂/流动相,就往往加入无水氯化锂、溴化锂。此时,普通GPC柱子的寿命、效果都会随着使用时间的延长而下降。而有些特殊应用,需要特殊溶剂/流动相,例如:甲酸体系、六氟异丙醇体系则需要很特殊的专用柱子,并且也是针对一些很不好做的样品,像尼龙、PET等等。
    还有些聚合物就不适合用GPC作分子量分布,例如:聚丙烯酰胺PAM,对一般的色谱柱,PAM往往与柱填料发生键合,造成无法按照排阻体积来分离样品。此时,只能选择粘度法分析粘均分子量、用场流仪FFF来分析分子量分布。
    所以,选择色谱柱、选择溶剂/流动相体系,需要根据样品情况具体分析,尤其是聚合物、化纤类样品。对未知方法的样品,那么查文献找方法是捷径,避免走弯路。

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  • 爱杰杰

    第8楼2009/04/14

    我们使用的是GPC,用的是2.84%的硫酸钠,再加0.02%的迭氮纳做抑菌剂就OK了

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  • 冷咖啡

    第9楼2009/04/21

    我用的是GPC,THF做流动相,也可以用甲苯的,看你的柱子还有测什么体系了!

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