It is me! 2009/07/24
[quote]原文由 [B]dong3626[/B] 发表: 茶叶里面的酶主要就是多酚氧化酶。。。 [/quote] 茶叶里可能你需要研究的是多酚氧化酶,其实里面有很多很多的酶的。 如果有机试剂消耗量比较大的话,你可以添加高浓度的盐。例如盐酸胍,可能比有机试剂要便宜一些。
〓疯子哥〓 2009/07/23
酶应该留在滤纸之上的吧~我以前用过好象是在上面的~不知道其他的酶怎样
雾非雾 2009/07/23
个人觉得滤纸只能滤掉大的酶基质的颗粒,酶是应该具有溶解性的,滤不掉。低温只是能大大降低酶活性,尽可能使之处于停滞状态吧。 酶也是蛋白质,一般都是加热,重金属,盐析的方法使它变性吧,不过对于特定的酶可能要用有针对性的方法的。
家有宝贝儿 2009/07/23
[quote]原文由 [B]dong3626[/B] 发表: 最近,在做一个工艺实验:主要是利用鲜叶中的多酚氧化酶酶促氧化生产茶色素。 中间需要在线取样分析含量变化。 但是因为溶液里面残存有酶液,如果不将酶失活或者处理的话,反应还会继续,那如何终止酶反应呢? 目前我们的做法是: 1. 取出后,用普通滤纸过滤,放置零下20度冰箱中保存,直至开始分析。 2. 取出,加入有机溶剂,如乙醇或者乙腈,将反应终止,分析! 有个小问题:在1中,用滤纸过滤,感觉酶一般比较大,可以被截留?不知道是不是这样呢? 大家还有什么好 的办法没有??[/quote] 普通滤纸过滤应该是无法达到过滤酶的作用,用普通滤纸过滤的作用可能是去除不溶物,至于放置于-20冰箱中,使酶的活性降低,反应暂时停止,之后可直接进行分析,这种做法一般用于检测酶反应的过程。 采用有机溶剂能起到使酶失活的作用,比较适合于后期采用反相检测的情况。
tianru的爸爸 2009/07/27
[quote]原文由 [B]dong3626[/B] 发表: 2. 取出,加入有机溶剂,如乙醇或者乙腈,将反应终止,分析![/quote]这个方法可靠些。
It is me!
第2楼2009/07/23
因为酶是具有生物活性的,所以没有绝对的方法适用于所有的酶活中止。通常用的比较多的是热变形,或者加高浓度的有机试剂或者盐去改变酶的结构,从而导致其失活。但是这些条件不是对所有的酶都具有作用的。
对于滤纸过滤,你们过滤的应该是鲜叶的碎片。普通滤纸是不可能截留住酶的,酶分子相对滤纸太小了。有可以依据分子量大小过滤蛋白的膜,称为超滤膜。
家有宝贝儿
第10楼2009/07/23
普通滤纸过滤应该是无法达到过滤酶的作用,用普通滤纸过滤的作用可能是去除不溶物,至于放置于-20冰箱中,使酶的活性降低,反应暂时停止,之后可直接进行分析,这种做法一般用于检测酶反应的过程。
采用有机溶剂能起到使酶失活的作用,比较适合于后期采用反相检测的情况。