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【求助】新毛细管柱清洗求助

zhangkii

2009/11/18

毛细管电泳（CE）

最近在熟悉单位新买的毛细管电泳仪

网上看到这样一段话：新毛细管柱处理方法——先用1M的HCL冲洗半个小时左右，然后再用1M NaOH冲洗30 min左右，0.1M的NaOH冲洗到基线基本平直为止，之后用水去离子水冲洗柱子，最后用缓冲溶液平衡柱子。

请问：冲洗是以HCL或NaOH替代缓冲液来冲洗还是手动压力冲洗？如果是替代缓冲液，去离子水替代缓冲液时，恐怕不能形成电渗流，怎么能起到冲洗效果？

请指点

我用的是彩陆CL3030

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viernes

第1楼2009/11/19

没用过你的仪器
但是你的毛细管电泳
应该都有气动进样和气动冲洗吧
就用气动冲洗吧

我所知的毛细管活化程序

分别用甲醇 1 M HCl 1M NaOH冲洗
每换一种溶液冲洗中间加纯水冲洗
最后那电泳缓冲液冲洗预电泳观察基线

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sunpengwjh

第2楼2009/11/19

柱子没有处理好电渗流很不稳定，因为管壁的硅羟基没有活化好，你的仪器没有压力冲洗么？不是电压，就是压力冲柱子，一端是缓冲溶液，一端是空瓶！
zhangkii(zhangkii) 发表:最近在熟悉单位新买的毛细管电泳仪

网上看到这样一段话：新毛细管柱处理方法——先用1M的HCL冲洗半个小时左右，然后再用1M NaOH冲洗30 min左右，0.1M的NaOH冲洗到基线基本平直为止，之后用水去离子水冲洗柱子，最后用缓冲溶液平衡柱子。

请问：冲洗是以HCL或NaOH替代缓冲液来冲洗还是手动压力冲洗？如果是替代缓冲液，去离子水替代缓冲液时，恐怕不能形成电渗流，怎么能起到冲洗效果？

请指点

我用的是彩陆CL3030

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zhangkii

第3楼2009/11/19

压力冲洗有的，但是手动的，超级麻烦
用注射器推进的那种
国产的东西，不能比啊

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sunpengwjh

第4楼2009/11/19

注射器，有手动泵么？如果没哟建议购买一个手动泵，这样会很方便，也不用管，安上自己就冲洗了！

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cpudaxiao

第5楼2009/11/19

这种方法处理的柱子是利用了所谓的“PH滞后效应”，是分离蛋白时常用的方法（减少吸附）。但个人认为作为新管冲洗的话最好有甲醇来吸取有机杂质。
zhangkii(zhangkii) 发表:最近在熟悉单位新买的毛细管电泳仪

网上看到这样一段话：新毛细管柱处理方法——先用1M的HCL冲洗半个小时左右，然后再用1M NaOH冲洗30 min左右，0.1M的NaOH冲洗到基线基本平直为止，之后用水去离子水冲洗柱子，最后用缓冲溶液平衡柱子。

请问：冲洗是以HCL或NaOH替代缓冲液来冲洗还是手动压力冲洗？如果是替代缓冲液，去离子水替代缓冲液时，恐怕不能形成电渗流，怎么能起到冲洗效果？

请指点

我用的是彩陆CL3030

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zhangkii

第6楼2009/11/20

谢谢
受教了

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256k

第7楼2017/01/16

推荐一种清洗方案：
flush the capillary with methanol to remove any oganic residues
fluch with water
flush with 1M hydrochloric acid to remove any cation
flush with water
flush with 1N NaOH to hydrolyze the siloxane to create charged silanol group that provide EOF
Flush with water
Flush with buffer

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