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【求助】抗菌肽处理的细菌悬浮液上ICP测渗漏的钙离子浓度的样品前处理

  • chenwuwarrior
    2009/12/04
  • 私聊

ICP光谱

  • 各位,本人分离到一株拮抗菌,该菌株能有效地杀灭一些植物病原细菌。根据已有资料,我们推测抗菌肽的作用机制是破坏细菌的细胞膜,进而使细胞内的钙离子、钾离子等释放到胞外。因此,我们计划用ICP测量抗菌肽处理后的细菌悬浮液中钙离子和钾离子浓度的变化。现在苦恼的是不知道如何进行样品的前处理。各位如有良方,请不吝赐教!
    十分感谢!
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  • popo

    第1楼2009/12/05

    是不是可以取你的悬浮液来检测就好了~
    如果只是检测Ca,K,那么直接消解就好了~~~

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  • lilongfei14

    第2楼2009/12/05

    用水浸取试试!

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  • chenwuwarrior

    第3楼2009/12/07

    是不是将有效成份处理过的菌液用细菌过滤器过滤后直接用2%的硝酸硝化就可以了?查了几份文献,关于直接处理液体的资料还真不多见。
    用水浸取?麻烦lilongfei14给个详细的说法。
    谢谢!

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  • popo

    第4楼2009/12/08

    如果你的过滤液是澄清的话我觉得酸化之后就可以做了!~

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  • chenwuwarrior

    第5楼2009/12/13

    过滤液不是澄清的,但通过0.22um孔径的滤膜后,基本可以认为该溶液中是不含固体溶质的。拮抗菌在液体培养基中发酵培养一段时间后过滤除菌,用无菌滤液(即通过0.22um滤膜处理,外观呈淡黄色)直接处理病原细菌,然后在某些时间点取样检测阳离子浓度的变化。
    请问popo,色素的存在是否会干扰测定?
    如果存在干扰,那我就只能先把有效成分分离纯化后,溶于PBS(磷酸缓冲液)中再处理病原细菌了。但不知磷酸缓冲液又是否会影响ICP的测定?
    呵呵,很业余的问题啊。谢谢各位的帮助!!

    popo(popo) 发表:如果你的过滤液是澄清的话我觉得酸化之后就可以做了!~

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  • windeast

    第6楼2009/12/14

    色素不会干扰测定的。

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  • popo

    第7楼2009/12/14

    那你这个我觉得直接就可以测定。
    色素应该不会影响测定。
    在ICP测定中,一般不用或者少用磷酸。

    chenwuwarrior(chenwuwarrior) 发表:过滤液不是澄清的,但通过0.22um孔径的滤膜后,基本可以认为该溶液中是不含固体溶质的。拮抗菌在液体培养基中发酵培养一段时间后过滤除菌,用无菌滤液(即通过0.22um滤膜处理,外观呈淡黄色)直接处理病原细菌,然后在某些时间点取样检测阳离子浓度的变化。
    请问popo,色素的存在是否会干扰测定?
    如果存在干扰,那我就只能先把有效成分分离纯化后,溶于PBS(磷酸缓冲液)中再处理病原细菌了。但不知磷酸缓冲液又是否会影响ICP的测定?
    呵呵,很业余的问题啊。谢谢各位的帮助!!

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  • chenwuwarrior

    第8楼2009/12/15

    呵呵,谢谢popo和windeast!
    这就联系实验室准备开工了。

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  • chenwuwarrior

    第9楼2009/12/24

    呵呵,回来汇报一下实验的进展,我后来直接测定未经硝化处理样品了。处理前后的钙离子浓度变化还是很明显的。
    在这期间得到了各位的热情帮助,谢谢你们!!

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  • rzxjz

    第10楼2012/02/09

    抗菌肽及其应用前景概述

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