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【资料】体积排阻色谱

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  • 先一起回顾一下什么是体积排阻色谱。
    原理: 以多孔凝胶(如葡萄糖,琼脂糖,硅胶,聚丙烯酰胺等)作固定相,依据样品分子量大小达到分离目的。大分子不进入凝胶孔洞,沿多孔凝胶胶粒间隙流出,先被洗脱;小分子进入大部分凝胶孔洞,在柱中被强滞留,后被洗脱。

    根据样品性质分类:凝胶过滤(GFC)—用于分析水溶性样品,如多肽、蛋白、生物酶、寡聚核苷酸、多聚核 苷酸、多糖。
    凝胶渗透(GPC)—用于分析脂溶性样品,如测定高聚物的分子量。
    不知各位专家能否讲解一些WELCH MATERIALS 柱子在这方面的应用。给大家一个学习的机会。
  • 该帖子已被版主-月旭科技--小S加5积分,加2经验;加分理由:鼓励来极限色谱柱版发布资料
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  • 1234chen

    第1楼2009/12/09

    我想分析的是一个分子量在5000左右的样品。

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  • 雪妖

    第2楼2009/12/09

    直接和厂家说清楚你的样品,会有很好的推荐的

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  • 雾非雾

    第3楼2009/12/09

    应助达人

    月旭也出凝胶色谱柱吗?

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  • 1234chen

    第4楼2009/12/10

    月旭也出凝胶色谱柱吗? 前面查过产品目录好像没找到。不知道有没有。 不过可以给大家介绍点这种柱了的保养,应用。 借鉴学习。

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  • 雪妖

    第5楼2009/12/10

    月旭暂时没有凝胶色谱柱

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  • 1234chen

    第6楼2009/12/11

    看来用这种柱子的人不多。目前我们用的GEL柱子是WATERS和TSK的。资料上讲的清洗方法有4种:
    1、0.1-0.2mol/L NaOH水溶液(ABA-5PW柱不适用)
    测定状态下,用0.1-0.2mol/L的NaOH水溶液通过样品进样阀清洗数次(3-5回)。
    2、20-40% 醋酸水溶液
    与上述NaOH水溶液的清洗方法相同。
    3、在淋洗液中添加水溶性有机溶剂(疏水性吸附物质的去除)
    在淋洗液中添加甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂(浓度《20%)进行过柱清洗。(注意盐的析出)
    4、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂(难溶性蛋白的去除)
    在淋洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性界面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后进行过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂的柱中残留。

    我常用的是第三种。

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  • 毛毛儿

    第7楼2010/04/26

    应助工程师

    没有用过这种色谱柱,它对液相本身有什么特别的要求吗?

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  • 东风恶

    第8楼2010/04/26

    目前还没有特别的要求啊!

    毛毛儿(yangxy12345) 发表:没有用过这种色谱柱,它对液相本身有什么特别的要求吗?

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  • 快乐

    第9楼2010/04/30

    应助达人

    这种作为净化的手段比较好。只是价格太贵了。

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  • 毛毛儿

    第10楼2010/04/30

    应助工程师

    除了净化以为,也可以用于测试吧!

    快乐(ynsfeed) 发表:这种作为净化的手段比较好。只是价格太贵了。

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