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【求助】求助:生物制品中的氨苄西林检测,峰形很怪!!

  • hanlaoda199
    2009/12/30
  • 私聊

生物制药

  • 我做的是生物制品中的氨苄西林残留,内标选的阿莫西林。
    仪器:美国AB3200,液相是岛津LC-20AD。
    流动相条件:乙腈,甲酸水(甲酸调PH3.1)
    梯度程序:0.01min 乙腈5%
    2min 乙腈5%
    6min 乙腈80%
    7min 乙腈5%
    8min 乙腈5%
    由于基质里面含有不挥发性盐,所以用了切换阀,前三分钟打进废液,后面再进质谱。
    这个条件一直做的很好,内标在4min出峰,氨苄西林在5.4min出峰。现在的问题是:条件不能重复了,内标峰形很怪(峰分叉,很毛糙),而且出峰时间延迟了0.5min.而氨苄西林没有变化。如果轻微变一下梯度条件,内标峰就变的很好了,所以我认为质谱是没有问题的。现在的问题就出在液相条件上,我找了很多原因,最开始换了色谱柱,换了两根(同品牌,同规格),一根还是新的,但内标出峰还是一样怪!现在就排除了柱子的问题,那么问题是不是就出在流动相条件上?!乙腈用的牌子是默克的,应该没问题吧。水是制的超纯水,以前也一直这样用的,调PH前是校正了PH仪的,PH值应该还是没问题。但问题还是没有解决!是否是梯度程序问题呢?(但以前一直都是用的这个梯度,重复性很好啊)
    请教高手,帮忙找下原因啊!这个问题困扰我好久了,方法学已经做完了,现在要测样品了,确出现了这种问题,小妹真的很急啊!
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  • 论坛版主招募|新窦

    第1楼2009/12/30

    peek连接管路是否有变化呢?
    如果氨苄西林峰始终很好,而内标峰变掉,是否考虑到内标标准品有问题呢?

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  • zhufangwei

    第2楼2009/12/30

    这个问题是不是重复提过啊,好像我回答过吧,希望不是幻觉。

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  • tf19617

    第3楼2011/01/20

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