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【求助】过柱慢了会影响回收吗?

液相色谱(LC)

  • 想请教一下大家,在过小柱的时候,比如过C18,都说要控制好流速。流速快了会流失,影响回收。那么流速慢了会对回收有影响吗?
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  • 老多_小多

    第1楼2010/01/04

    太慢了洗脱不下来

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  • 雪在烧

    第2楼2010/01/04

    速度一定要控制适当,我们当时做甘草中黄酮提纯时,太快不行,但是太慢就洗脱的不彻底,对回收率的影响特别大。

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  • 土老冒豆豆

    第3楼2010/01/04

    应助达人

    这是因为样品过柱太慢了被过多吸附,那在洗脱的时候也要洗脱久点才行啦。

    lishuhong(lishuhong) 发表:速度一定要控制适当,我们当时做甘草中黄酮提纯时,太快不行,但是太慢就洗脱的不彻底,对回收率的影响特别大。

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  • 12qw

    第4楼2010/01/04

    那这样的话洗脱时1秒钟1滴差不多了吧,我没抽,让他自动住下滴

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  • tyys98

    第5楼2010/01/05

    小柱分离其实也是一个色谱过程,服从范第姆特方程,流速会影响塔板高度,粗略讲最佳线速大概在1mm/s数量级,据此可以根据柱的截面积估算体积流速,例如直径8mm的柱,截面积为50平方毫米,扣除固定相的体积(比如占30%)每秒流速为35微升为宜。

    12qw(12qw) 发表:那这样的话洗脱时1秒钟1滴差不多了吧,我没抽,让他自动住下滴

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  • 皎然

    第6楼2010/01/05

    如果你的回收试验不好,当然会影响回收了!
    1、你说的慢要分清是:上样、冲洗还是洗脱的慢
    2、操作要点:
    上样要慢,充分吸附
    冲洗要快,避免大量溶剂长时间洗脱(尤其是吸附物质在洗脱溶剂中有一定溶解性的)
    洗脱要慢,一方面要充分洗脱,令一方面也要控制收集液体达到既定的要求,省得后续浓缩,引入误差
    3、对于快和慢,其实关键还是要看你的目标物质的吸附和溶解情况

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  • dickwang2008

    第7楼2010/01/05

    流慢了没什么问题,只要最后用外力将洗脱液赶出即可。

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  • 雾非雾

    第8楼2010/01/05

    应助达人

    个人理解洗脱流速太快容易穿透,使共萃物也洗脱下来,净化效果大打折扣。还有就是洗脱流速太快,洗脱溶剂与目标物及SPE柱填料基体没有充分作用即流出,有可能使洗脱不完全,造成回收率偏低。


    洗脱流速太慢会严重降低工作效率。做农残检测过程中没发现洗脱太慢导致目标物洗不下来的情况(如果洗不下来有可能是洗脱溶剂选的不对,或是SPE柱型即填料类型选的不对),洗脱不是靠改变流速来冲出目标物,以达到良好的回收效果的。

    12qw(12qw) 发表:想请教一下大家,在过小柱的时候,比如过C18,都说要控制好流速。流速快了会流失,影响回收。那么流速慢了会对回收有影响吗?

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  • yajun50288

    第9楼2010/01/05

    个人觉得有,但不大

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  • yewentao1983011

    第10楼2010/01/05

    个人认为:影响不大

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